谷胱甘肽納米脂質(zhì)體的研制.pdf

1、谷胱甘肽(GSH)是一種生物活性三肽，在生物體內(nèi)具有多種重要的生理功能，在食品工業(yè)、臨床醫(yī)藥及有關(guān)生物研究領(lǐng)域都有著廣泛的用途。但GSH易氧化，貨架期短，不易透過細胞膜，這些因素限制了它的應(yīng)用。因此，本論文對GSH的納米脂質(zhì)體和前體脂質(zhì)體的制備進行了研究，旨在提高谷胱甘肽的穩(wěn)定性、保持其功效。 本論文首先探討了制備GSH納米脂質(zhì)體的可行性。研究結(jié)果顯示，GSH在酸性的正辛醇／水的體系中分配系數(shù)均遠遠小于-0．3，水溶性好；脂質(zhì)體

2、膜材(卵磷脂、膽固醇和吐溫80)以及制備工藝過程(旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、pH的調(diào)節(jié)和超聲乳化)對GSH的穩(wěn)定性影響較小，不會引起GSH失活。因此，脂質(zhì)體可以用來包埋谷胱甘肽。 本研究采用凝膠過濾法來分離脂質(zhì)體和游離的GSH，以0．05mol·L-1PBS(0．5mol·L-1NaCI)為洗脫劑，不同濃度的GSH溶液經(jīng)凝膠柱分離后平均回收率可達94．O％。 選擇了pH梯度法、反相蒸發(fā)法、乙醇注入法和乙醚注入法來制備GSH脂質(zhì)體，以包封

3、率、粒徑、多分散性指數(shù)(PDI)以及貯藏穩(wěn)定性為指標，對這四種方法進行了比較。綜合考慮，確定采用pH梯度法制備GSH脂質(zhì)體。 pH梯度法制備GSH納米脂質(zhì)體的最佳工藝條件和配方為：GSH載量(W／W)為25％，膽固醇／卵磷脂(W/W)為0．25／1，吐溫80／卵磷脂(W／W)為0．5／1，乙醚／檸檬酸緩沖液(V／V)為3／1，pH梯度范圍為pH3-6，水合溫度為40℃，水合時間為30min，超聲強度為200W，超聲時間為5min

4、。制備得到的GSH脂質(zhì)體的包封率為90．3％，平均粒徑為102．1nm，PDI為0．031，微觀形態(tài)良好，囊泡分散均勻。然后考察了GSH脂質(zhì)體在不同貯藏條件下的物理化學(xué)穩(wěn)定性。結(jié)果表明，溫度對脂質(zhì)體的穩(wěn)定性影響很大，4℃條件下貯藏的脂質(zhì)體的穩(wěn)定性較好。 對制備GSH前體脂質(zhì)體所用的凍干保護劑進行了篩選，結(jié)果表明，在七種保護劑中，甘露醇的保護效果最好。甘露醇與磷脂質(zhì)量比為15／1時，制得的GSH前體脂質(zhì)體顏色均勻，結(jié)構(gòu)致密，形態(tài)飽

5、滿，復(fù)水后包封率為85．4％，保留率達到了88．1％，粒徑為469．9nm。FTIR．紅外光譜分析顯示甘露醇對脂質(zhì)體膜的完整性起到了保護作用。GSH前體脂質(zhì)體經(jīng)20℃和40℃下儲藏30天后，粒徑、包封率、pH值、丙二醛含量(MDA)等均未發(fā)生顯著的變化，儲藏穩(wěn)定性較好，說明了將脂質(zhì)體制備成前體脂質(zhì)體提高了脂質(zhì)體的穩(wěn)定性。吸濕平衡試驗結(jié)果表明，較低濕度對GSH前體脂質(zhì)體的穩(wěn)定性影響很小，脂質(zhì)體穩(wěn)定；高濕環(huán)境對前體脂質(zhì)體的穩(wěn)定性影響較大。因