電針足陽明經(jīng)（穴）對(duì)大鼠胃黏膜細(xì)胞EGFR及其ERK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的影響.pdf

1、目的：以中醫(yī)經(jīng)絡(luò)學(xué)說中經(jīng)脈一臟腑相關(guān)理論為指導(dǎo)，觀察電針足陽明經(jīng)(穴)對(duì)大鼠胃黏膜損傷的修復(fù)效應(yīng)、大鼠胃黏膜細(xì)胞表皮生長因子受體(EGFR)、細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK)和c-myc表達(dá)的影響，從器官、細(xì)胞、分子水平多層次系統(tǒng)地探討“足陽明經(jīng)與胃相關(guān)”的物質(zhì)基礎(chǔ)以及電針足陽明經(jīng)(穴)參與胃黏膜損傷修復(fù)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。 方法：采用水浸束縛應(yīng)激法(WRS)制作應(yīng)激性大鼠胃黏膜損傷模型，以電針足陽明經(jīng)“足三里”、“梁門”、“四白”穴為

2、施治因素，按Guth等標(biāo)準(zhǔn)記錄大鼠胃黏膜損傷指數(shù)，光鏡下觀察胃黏膜組織形態(tài)學(xué)變化；采用免疫組化和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)檢測(cè)胃黏膜細(xì)胞EGFR蛋白和基因的表達(dá)；免疫組化和免疫印跡法(Western blot)檢測(cè)胃黏膜細(xì)胞ERK磷酸化水平：RT-PCR法檢測(cè)胃黏膜細(xì)胞c-myc基因的表達(dá)。 結(jié)果：①經(jīng)造模后，模型組大鼠胃黏膜損傷指數(shù)最高，正常組大鼠胃黏膜損傷指數(shù)最低，兩組間差異有非常顯著性意義(p<0.01)，說明造

3、模是成功的；電針胃經(jīng)組和電針膽經(jīng)組大鼠胃黏膜損傷指數(shù)均明顯降低，與模型組比較有非常顯著性差異(P<0.01)，其中電針胃經(jīng)組大鼠胃黏膜損傷指數(shù)降低最為明顯，與電針膽經(jīng)組比較有非常顯著性差異(P<0.01)； ②在電針足陽明經(jīng)(穴)后提取的不同稀釋度血清對(duì)大鼠胃黏膜細(xì)胞EGFR表達(dá)差異影響中，1/10胃經(jīng)血清組大鼠胃黏膜細(xì)胞EGFR表達(dá)與1/2、1/5和1/20胃經(jīng)血清組比較均有非常顯著性差異(P<0.01)，大鼠胃黏膜細(xì)胞EGF

4、R表達(dá)強(qiáng)弱依次為：1/10胃經(jīng)血清組>1/20胃經(jīng)血清組>1/5胃經(jīng)血清組>1/2胃經(jīng)血清組；③在與電針足陽明經(jīng)(穴)或足少陽經(jīng)(穴)提取的血清孵育后，胃經(jīng)組和膽經(jīng)組大鼠胃黏膜細(xì)胞EGFR及其基因的表達(dá)均明顯增強(qiáng)，與正常組、模型組比較均有非常顯著性差異(P<0.01)；其中胃經(jīng)組大鼠胃黏膜細(xì)胞EGFR及其基因的表達(dá)又最為明顯，與膽經(jīng)組比較有顯著性差異(P<0.05)； ④在與電針足陽明經(jīng)(穴)或電針足少陽經(jīng)(穴)提取的血清孵育后

5、，胃經(jīng)組和膽經(jīng)組大鼠胃黏膜細(xì)胞ERK磷酸化、c-myc基因表達(dá)均明顯升高，與正常組、模型組比較均有非常顯著性差異(P<0.01)；胃經(jīng)組大鼠胃黏膜細(xì)胞ERK磷酸化、c-myd基因表達(dá)升高最為明顯，與膽經(jīng)組比較均有非常顯著性差異(P<0.01)；當(dāng)用PD153035阻斷EGFR后，胃經(jīng)+PD153035組大鼠胃黏膜細(xì)胞ERK磷酸化、c-myc基因表達(dá)均明顯降低，與胃經(jīng)組比較均有非常顯著性差異(P<0.01)。 結(jié)論：①電針足陽明經(jīng)

6、(穴)可促進(jìn)大鼠胃黏膜損傷的修復(fù)，足陽明經(jīng)與胃具有相對(duì)的特異性聯(lián)系； ②電針足陽明經(jīng)(穴)后提取的不同稀釋度血清皆能使大鼠胃黏膜細(xì)胞EGFR蛋白的表達(dá)增強(qiáng)，但存在一定的濃度效應(yīng)相關(guān)性，1/10稀釋度血清的效應(yīng)最為明顯； ③電針足陽明經(jīng)(穴)后提取的血清可提高大鼠胃黏膜細(xì)胞EGFR及其基因的表達(dá)，EGFR是足陽明經(jīng)與胃相關(guān)的重要物質(zhì)基礎(chǔ)； ④電針足陽明經(jīng)(穴)后提取的血清可提高大鼠胃黏膜細(xì)胞ERK磷酸化和c-myc