人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞移植改善大鼠缺血性腦梗死免疫炎性反應(yīng)的研究.pdf

1、目的：
　　研究人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞（human umbilical cord blood mesenchymal stem cells,hUCB-MSCs）移植對大鼠腦梗死炎性因子表達和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Regulatory T cell,Treg）數(shù)量及神經(jīng)功能缺損的影響。
　　方法：
　　40只健康雄性SD大鼠，隨機分成四組，分別是①假手術(shù)組（n=10）②缺血再灌注組（n=10）③MSC組（n=10）④生理鹽水組（n

2、=10）。假手術(shù)組大鼠只分離出頸部動脈，其余三組均采用改良Longa線栓法制作大鼠右側(cè)大腦中動脈缺血再灌注模型（middle cerebral artery occlusion,MCAO）。無菌條件下采集臍帶血100ml，體外分離hUCB-MSCs并傳代培養(yǎng)，選擇第6代培養(yǎng)的干細(xì)胞做治療移植用。內(nèi)含1ml1×106個hUCB-MSCs的懸液經(jīng)尾靜脈注射入MSC組，將等量的生理鹽水采用同樣的方式注射到生理鹽水組。分別于缺血前、缺血后30m

3、in、缺血再灌注2h、3h、6h測定各組實驗動物血清中的白細(xì)胞介素-6（interleukin IL-6）、γ干擾素（interferon IFN-γ）、IL-10、轉(zhuǎn)化生長因子β（transforming growth factor TGF-β）水平變化，評價hUCB-MSCs移植調(diào)節(jié)大鼠腦梗死后炎性反應(yīng)的效果。于1、3、7、14d對大鼠神經(jīng)功能進行評分，并檢測外周血中 Treg細(xì)胞表達，評價hUCB-MSCs移植對實驗動物的神經(jīng)保護

4、機制。
　　結(jié)果：
　　MSC組、缺血再灌注組和生理鹽水組缺血后 IL-6、IFN-γ水平升高，分別在缺血再灌注2h、缺血后30min達高峰，MSC組顯著小于缺血再灌注組和生理鹽水組；缺血后IL-10、TGF-β水平缺血再灌注組和生理鹽水組降低，MSC組升高。在缺血再灌注3、7、14d，缺血再灌注組和生理鹽水組的神經(jīng)功能缺損評分顯著高于MSC組（P＜0.05）。缺血后7、14d缺血再灌注組和生理鹽水組Treg細(xì)胞表達較假手術(shù)