2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、博士學(xué)住論文南方醫(yī)科大學(xué)2009級(jí)博士學(xué)位論文p38通過磷酸化HPC2調(diào)控次砷酸鈉誘導(dǎo)的U20S細(xì)胞G2/M期阻滯p38regulatesG2/MarrestofU20ScellthroughphosphorylationofHPC2課題來源:廣東省高等學(xué)校人才引進(jìn)專項(xiàng)基金;國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81071549)專業(yè)名稱學(xué)位申請(qǐng)人指導(dǎo)教師答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)成員同行專家評(píng)閱人2012年5月3日廣州摘要要作用,它們通過形成轉(zhuǎn)錄抑

2、制復(fù)合體調(diào)節(jié)著基因的開關(guān),維持細(xì)胞不同時(shí)期的身份和功能。因此必定有某種機(jī)制,調(diào)節(jié)這些不同信號(hào)通路的蛋白發(fā)生聯(lián)系,介導(dǎo)它們的結(jié)合與解離。本研究致力于研究PcG蛋白,尤其是HPC2所在的Polycombrepressivecomplexl(PRCl)jtl何在在細(xì)胞周期調(diào)控中發(fā)揮作用,以及PRCl與相關(guān)蛋白比如Rb相互作用和結(jié)合的機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)室曾通過噬菌體展示技術(shù),發(fā)現(xiàn)HPC2可以在體外與絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶p38特異結(jié)合。本研究小組趙明

3、教授的研究證實(shí),p38的活化參與了丫射線引起的人骨肉瘤細(xì)胞G2/M期阻滯。因此可以假設(shè),當(dāng)細(xì)胞DNA發(fā)生損傷時(shí),p38可能通過磷酸化HPC2啟動(dòng)了PeG蛋白復(fù)合體的組裝,介導(dǎo)其與Rb、E2F4等轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合,并共同作用于cdc2等蛋白的啟動(dòng)子,抑制其表達(dá),從而引起細(xì)胞周期阻滯。為了驗(yàn)證研究假設(shè),本研究構(gòu)建了HPC2標(biāo)簽融合真核表達(dá)載體以及磷酸化位點(diǎn)突變真核表達(dá)載體,Rb真核表達(dá)載體、Ringl真核表達(dá)載體,通過免疫共沉淀技術(shù)和免疫熒光技

4、術(shù)觀察它們?cè)诩?xì)胞內(nèi)同內(nèi)源性p38蛋白的相互作用;尋找p38與HPC2相互作用的結(jié)構(gòu)域和p38磷酸化HPC2的位點(diǎn);研究HPC2磷酸化位點(diǎn)突變載體與其他PcG小體成員的相互作用關(guān)系;進(jìn)而分析p38以及HPC2分別在亞砷酸鈉引起的U20S細(xì)胞G2/M阻滯中發(fā)揮的作用,探索p38與PeG小體轉(zhuǎn)錄抑制功能之間的關(guān)系。研究方法:1、利用亞砷酸鈉刺激人骨肉瘤U20S細(xì)胞,用75%酒精固定穿透細(xì)胞,PI染色并用流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞,制備G2/M期阻滯細(xì)

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