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文檔簡介
1、研究背景:阿爾茨海默病(Alzheimerdisease,AD)是發(fā)生于老年期或老年前期的以慢性進(jìn)行性不可逆記憶減退、認(rèn)知障礙和人格改變?yōu)橹饕R床特征的大腦退行性疾病,是最常見的一種癡呆類型,其病因和病機(jī)迄今不明,治療更缺乏有效手段。隨著世界人口老齡化,其發(fā)病率呈上升趨勢,嚴(yán)重影響患者的身心健康和生活質(zhì)量,在發(fā)達(dá)國家已是導(dǎo)致死亡的第四位原因,故而成為全世界廣受關(guān)注的一大健康難題。 第一部分:雌激素對Aβ25-35致PC12細(xì)胞損
2、傷的影響 目的:觀察可溶性Aβ25-35作用下PC12細(xì)胞細(xì)胞活力、膜通透性的改變及17β—雌二醇(17βE2)對此改變的影響。 結(jié)論:1超生理量的Aβ(5μM)即使呈可溶解狀態(tài)也可以對神經(jīng)元細(xì)胞造成毒性損害,使PC12細(xì)胞代謝活力(MTT還原率)明顯降低;使PC12細(xì)胞膜完整性受到損傷,培養(yǎng)液上清中LDH漏出明顯增多;以上損傷出現(xiàn)較早,并隨著時(shí)間的延長而加劇。2可溶性Aβ25-35作用于PC12細(xì)胞可作為AD早期病理損
3、害的細(xì)胞模型。 3雌激素具有明顯的抗Aβ?lián)p傷和神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用,10-9-10-6M17βE2對Aβ25-35所造成的PC12細(xì)胞MTT還原率下降、LDH漏出濃度升高具有明顯的逆轉(zhuǎn)作用,且這種作用具有劑量依賴性。 第二部分:雌激素對Aβ25-35致PC12細(xì)胞膜流動性改變的影響 目的:觀察可溶性Aβ25-35作用下PC12細(xì)胞膜流動性的改變及17βE2對此改變的影響。 結(jié)論:15μM可溶性Aβ25-35使
4、PC12細(xì)胞膜流動性明顯下降,熒光偏振度和微粘度明顯升高,這種改變比MTT、LDH更加靈敏,在超早期即出現(xiàn),并隨著時(shí)間的延長而加劇,為Aβ膜毒理學(xué)提供了新的證據(jù);2雌激素具有改善膜流動性的神經(jīng)元保護(hù)作用,且這種作用具有劑量依賴性,該作用國內(nèi)外尚未見報(bào)道,為雌激素作用機(jī)制增添了新的內(nèi)容。 第三部分:雌激素對Aβ25-35致PC12細(xì)胞自由基代謝改變的影響 目的:觀察可溶性Aβ25-35作用下PC12細(xì)胞自由基代謝的改變及1
5、7βE2對此改變的影響。 結(jié)論:15μM可溶性Aβ25-35可引起PC12細(xì)胞自由基生成增多,胞內(nèi)MDA含量明顯增加,并破壞細(xì)胞自由基清除系統(tǒng)使其抗氧化能力下降,胞內(nèi)抗氧化酶GSH-Px活性明顯降低,導(dǎo)致氧應(yīng)激損傷,這可能是可溶性Aβ25-35對PC12細(xì)胞損傷作用及其導(dǎo)致膜流動性下降的原因;2雌激素具有調(diào)動機(jī)體抗氧化酶活性和自由基清除能力、降低自由基水平的抗氧化功效,17βE2能有效逆轉(zhuǎn)Aβ25-35所致PC12細(xì)胞MDA的增
6、加及GSH-Px活性的下降,這種作用呈劑量依賴性,雌激素抗氧化損傷作用可能是其神經(jīng)保護(hù)作用的基礎(chǔ)。 第四部分雌激素對Aβ25-35致PC12細(xì)胞nAchR受體表達(dá)改變的影響 目的:觀察可溶性Aβ25-35作用下PC12細(xì)胞nAChRα7亞基蛋白表達(dá)水平的變化及17βE2對此變化的影響。 結(jié)論:1首次采用間接免疫熒光技術(shù)觀察到nAChRα7主要分布于PC12細(xì)胞膜表面,并發(fā)現(xiàn)5μM可溶性Aβ25-35作用于PC12
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