Zp1突變與家族性不育.pdf

1、目的:透明帶(zonapellucida，ZP)是包繞卵細(xì)胞外的膜，其成分為糖蛋白，由卵細(xì)胞和顆粒細(xì)胞分泌。ZP在受精（精卵結(jié)合、阻止多精受精）和胚胎著床前的早期發(fā)育中發(fā)揮重要作用。本研究通過(guò)對(duì)一可疑因透明帶缺失而致家族多發(fā)不孕的家系分析和透明帶基因的突變分析，探索該家族不孕、透明帶發(fā)育障礙發(fā)生的原因和分子遺傳機(jī)制。
　　 研究方法:收集家系成員三代共9人的婚育史資料，繪制家系圖;提取所有成員外周血DNA，對(duì)先證者進(jìn)行人透明帶基

2、因zp1、zp2、zp3和zp4全部外顯子進(jìn)行缺失篩查;對(duì)先證者及其他8名家族成員分別進(jìn)行zp1～4基因的PCR-測(cè)序及分析;對(duì)發(fā)現(xiàn)的突變基因進(jìn)行生物信息分析。
　　 結(jié)果:1.繪制自先證者曾祖父（母）至先證者下一代共五代家系圖，其中Ⅲ-1和2為姑表近親婚配（先證者父母），有異常表型（不孕）患者集中發(fā)生于第四代，分別為Ⅳ-1、3（先證者）、4、5共4人，另有2人尚未婚配，僅Ⅳ-2生育后代，符合隱性遺傳特征;2.PCR-測(cè)序分析發(fā)

3、現(xiàn)該家系先證者(Ⅳ-3)和Ⅳ-1、4、5、6、7共4名女性不孕患者和2名尚未婚配者（其中1名為男性）存在zp1基因7號(hào)外顯子c.1169處“TGGGAAAA”共8個(gè)堿基的純合缺失，其他3名成員（Ⅱ-1、Ⅲ-2和Ⅳ-2，有生育史）均為雜合缺失;3.家系患者(Ⅳ-5)COH取卵，發(fā)現(xiàn)3枚卵子無(wú)透明帶;4.通過(guò)BCM在線分析軟件分析，zp1基因7號(hào)外顯子部分缺失后，將導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄終止子提前出現(xiàn)，編碼氨基酸由638aa突變?yōu)?28aa，其中突變后出