豬源與禽源沙門菌的分離鑒定及生物學(xué)特性研究.pdf

1、沙門菌是腸桿菌科沙門菌屬細菌，是一種重要的人獸共患病病原。在養(yǎng)殖業(yè)中，沙門菌是危害3月齡內(nèi)仔豬和3周齡內(nèi)雛禽腸道健康的一種重要的致病菌，能對養(yǎng)殖業(yè)的生產(chǎn)造成嚴(yán)重影響。本研究通過采集臨床發(fā)病的豬和家禽的病變組織以及健康蛋雞的泄殖腔拭子等樣品，進行沙門菌的分離和鑒定，在此基礎(chǔ)上，進行分離菌株的耐藥性、耐藥基因、毒力基因和生物被膜形成能力等檢測，以掌握當(dāng)前養(yǎng)殖場沙門菌的部分生物學(xué)特性及分子特征，為防控沙門菌病提供技術(shù)支撐，主要研究結(jié)果如下：<

2、br>　　1.沙門菌的分離鑒定
　　本研究從臨床送檢的發(fā)病動物病變組織中，一共分離得到豬源沙門菌55株，禽源沙門菌5株，其中包含3株雞源、1株鴨源和1株鵝源。另外，通過在規(guī)?；B(yǎng)雞場采集3周齡健康蛋雞的泄殖腔拭子、混合糞便和環(huán)境樣品，分離得到沙門菌11株。
　　2.沙門菌分離菌株的耐藥性檢測
　　本研究使用微量肉湯稀釋法分別對豬源和禽源分離菌株進行了12種藥物的耐藥性檢測。結(jié)果表明，豬源沙門菌對青霉素類、氯霉素類、四環(huán)

3、素類的藥物耐藥率在80％以上，對頭孢菌素類、喹諾酮類、磺胺類和氨基糖苷類藥物的耐藥率在50%以上，對甲氧芐啶的耐藥率最低，不足2%；禽源沙門菌對青霉素類藥物的耐藥率高于80%，對其他藥物多數(shù)耐藥率在50%~75%，但是對卡那霉素、多西環(huán)素和甲氧芐啶的耐藥率則在50%以下。
　　本研究使用PCR方法分別對豬源和禽源分離菌株進行了23種相關(guān)耐藥基因的檢測，發(fā)現(xiàn)所分離的菌株中存在15種相關(guān)耐藥基因。在豬源沙門菌中，磺胺類相關(guān)抗性基因 s

4、ul2、sul1和四環(huán)素類相關(guān)抗性基因 tetA基因的檢出率分別是78.43%、60.78%和72.55%，是檢出率最高的三種基因；在禽源沙門菌中，磺胺類相關(guān)抗性基因 sul1基因和氨基糖苷類相關(guān)抗性基因 aac(3')-IV基因的檢出率分別是62.5%和60%，是檢出率最高的兩種基因。此外，通過基因測序的方式對喹諾酮類耐藥決定區(qū)域的主要基因gyrA和parC進行了氨基酸突變的測序分析，結(jié)果表明，gyrA基因的主要突變發(fā)生在其氨基酸序列

5、的第83個位點和第87個位點，parC基因的主要突變發(fā)生在其氨基酸序列的第80個位點和第129個位點。
　　3.沙門菌其他生物學(xué)特性研究
　　本研究用PCR方法檢測了12種沙門菌毒力基因，發(fā)現(xiàn)有6種基因在豬源沙門菌中檢出率在90%以上，禽源沙門菌中毒力基因 spv C檢出率最高（87.5%）， sseL基因在豬源沙門菌中檢出率是4.55%，在禽源沙門菌中的檢出率是0，在所有毒力基因中檢出率最低。
　　通過結(jié)晶紫染色法檢