江蘇地區(qū)禽源沙門(mén)菌的臨床檢測(cè)及相關(guān)特性的分析.pdf

1、沙門(mén)菌?。⊿almonellosis）是不同血清型沙門(mén)菌感染人類(lèi)和動(dòng)物所引起的疾病的總稱(chēng)。由沙門(mén)菌引起的食物中毒在世界各國(guó)的細(xì)菌性食物中毒中常位居前列，其導(dǎo)致的畜禽生產(chǎn)能力的降低更對(duì)經(jīng)濟(jì)造成了嚴(yán)重影響。不僅嚴(yán)重阻礙了畜禽業(yè)的發(fā)展，而且威脅人類(lèi)健康，已經(jīng)成為公共衛(wèi)生重點(diǎn)關(guān)注的問(wèn)題。本研究主要調(diào)查了江蘇省海安縣部分雞場(chǎng)和揚(yáng)州大學(xué)禽病門(mén)診臨床沙門(mén)菌污染狀況，對(duì)血液樣品樣進(jìn)行抗體檢測(cè)，分離臨床肝臟樣品，規(guī)模場(chǎng)活禽泄殖腔棉拭子、雞蛋和環(huán)境樣品中的

2、沙門(mén)菌及血清型鑒定，并對(duì)分離到的沙門(mén)菌進(jìn)行了抗生素敏感性測(cè)定、分子分型和毒力基因檢測(cè)，為制定防控措施提供了重要參考。
　　2014-2015年間，對(duì)江蘇省海安縣4個(gè)不同飼養(yǎng)模式雞場(chǎng)分別進(jìn)行4次血樣采集，采集血樣共1600份，進(jìn)行血清玻板凝集試驗(yàn)，檢測(cè)得到陽(yáng)性血清共165份，陽(yáng)性率為10.3％。其中，開(kāi)放飼養(yǎng)模式雞場(chǎng)陽(yáng)性率為22％，明顯高于其他飼養(yǎng)模式（半封閉飼養(yǎng)模式7.4％，全封閉飼養(yǎng)模式4.5％）;夏季血樣檢測(cè)到的陽(yáng)性率為20.

3、3％，明顯高于其他季度（冬季8.3％，春季7.5％，秋季5.3％）。共采集泄殖腔棉拭子1600份，分離出沙門(mén)菌12株，陽(yáng)性率為0.75％。其中，開(kāi)放飼養(yǎng)模式分離率為1.5％（6/400），高于半封閉飼養(yǎng)模式0.63％(5/800)，高于全封閉飼養(yǎng)模式0.25％(1/400)。采集的雞蛋、飼料和環(huán)境樣品中未分離到沙門(mén)菌。
　　從揚(yáng)州大學(xué)禽病門(mén)診共采集臨床樣品161份，分離獲得18株沙門(mén)菌，陽(yáng)性率為11.2％。揚(yáng)州地區(qū)沙門(mén)菌分離率最高

4、，為13.6％(11/81);其次是鎮(zhèn)江和萊安，均為12.5％;淮安、南通、南京依次為8.7％、7.4％、7.1％。
　　對(duì)分離到的30株沙門(mén)菌進(jìn)行血清學(xué)試驗(yàn)和藥物敏感性檢測(cè)。血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果顯示，其中20株為1，9，12∶-∶-（雞沙門(mén)菌或雛沙門(mén)菌）、5株為1，4，[5]，12∶i∶1，2（鼠傷寒沙門(mén)菌）、3株為1，4，[5]，12∶b∶1，2（乙型副傷寒沙門(mén)菌）、2株為1，9，12∶g，m∶[1，7]（腸炎沙門(mén)菌）。12種抗菌藥

5、物的敏感性試驗(yàn)結(jié)果顯示，所有分離株對(duì)丁胺卡那霉素、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、氨曲南、卡那霉素均高度敏感(100％);對(duì)四環(huán)素耐藥率最高，為40％;對(duì)其余抗生素均有不同程度的耐藥。有18株沙門(mén)菌至少對(duì)2種抗菌藥物耐藥。不同地區(qū)沙門(mén)菌耐藥率有所不同，南通地區(qū)沙門(mén)菌多重耐藥情況最為嚴(yán)重，耐4種及以上抗菌藥物的菌株比例達(dá)16.7％。不同血清型的沙門(mén)菌耐藥情況也有一定的差異，雞沙門(mén)菌或雛沙門(mén)菌耐藥率最高，鼠傷寒沙門(mén)菌次之，腸炎沙門(mén)菌耐藥率最低。

6、　　為了進(jìn)一步了解分離株的遺傳特性，選取沙門(mén)菌7個(gè)管家基因aroC、dnaN、hemD、hisD、purE、sucA和thrA，對(duì)30株分離株和26株模板進(jìn)行MLST試驗(yàn)，共獲得8個(gè)不同的ST型，分別為ST11、ST19、ST86、ST92、ST99、ST1690、ST2039和ST2151，其中ST2151為新發(fā)現(xiàn)的ST型。運(yùn)用eBURST和MEGA軟件進(jìn)行聚類(lèi)分析，研究其進(jìn)化的相關(guān)性。選取沙門(mén)菌主要毒力島代表性基因，包括sitC(S

7、PI-1)、invA(SPI-1)、spiC(SPI-2)、sifA(SPI-2)、misL(SPI-3)、orfL(SPI-4)、pipD(SPI-5)，及其他重要結(jié)構(gòu)性毒力基因(pefA、iroN、msgA和lpfC)進(jìn)行檢測(cè)。其中，sitC、spiC、orfL、pipD陽(yáng)性檢出率為100％，iroN、msgA、lpfC以及sifA作為毒力島保守基因檢出率也很高，分別為92.5％、95％、97.5％、97.5％，檢出率最低的是mis