紫杉醇對(duì)尤文肉瘤細(xì)胞系誘導(dǎo)凋亡及生長(zhǎng)抑制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探討抗微管藥物紫杉醇在體外實(shí)驗(yàn)條件下對(duì)尤文肉瘤細(xì)胞系RD-ES的誘導(dǎo)凋亡及生長(zhǎng)抑制作用，為臨床應(yīng)用及活體實(shí)驗(yàn)提供依據(jù)?！　》椒?　　1選用液氮冷凍的RE-DS細(xì)胞系復(fù)蘇，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，傳代，達(dá)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后分別加入不同濃度的化療藥物置入溫箱中孵育。化療藥物為紫杉醇(Paclitaxel)，順鉑(Cisplatin，DDP)，阿霉素(Adriamycin，ADM)。然后收集藥物作用時(shí)間0，8，16，24，48，72小時(shí)后的培養(yǎng)細(xì)胞

2、，進(jìn)行臺(tái)盼籃染色，活細(xì)胞計(jì)數(shù)，觀察細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率?！　?將依上述方法培養(yǎng)的細(xì)胞接種于帶玻片的小培養(yǎng)管內(nèi)，同樣方法加入上述不同濃度的化療藥物，在不同的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行細(xì)胞搜集，Giemsa染色，觀察細(xì)胞形態(tài)。計(jì)數(shù)凋亡細(xì)胞數(shù)。攝片。3通過(guò)同樣方法制備細(xì)胞標(biāo)本，加入紫杉醇等藥物后在不同時(shí)間點(diǎn)用流式細(xì)胞儀(FCM)測(cè)定細(xì)胞周期及凋亡率的變化情況。4將上述方法培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞藥物作用后進(jìn)行DNA降解產(chǎn)物的原位缺口末端標(biāo)記(TUNEL)檢測(cè)，計(jì)數(shù)