腫瘤多藥耐藥逆轉(zhuǎn)小分子H6和Mogrol的發(fā)現(xiàn)與作用機(jī)制探討.pdf

1、腫瘤的多藥耐藥(Multiple Drug Resistance，MDR)是指腫瘤細(xì)胞對(duì)某種藥物產(chǎn)生耐藥性之后，會(huì)對(duì)從未接觸過的、結(jié)構(gòu)不同、作用機(jī)制各異的多種化療藥物產(chǎn)生交叉耐藥的現(xiàn)象。腫瘤的多藥耐藥是當(dāng)前腫瘤治療的所面臨的重大難題之一。為了克服腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的MDR特性，研究者們一直在尋找有效的MDR抑制劑，這些化合物也被稱為MDR的調(diào)節(jié)劑、逆轉(zhuǎn)劑或者化療增敏劑。近年來，研究發(fā)現(xiàn)多種天然產(chǎn)物具有逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞MDR的作用。由于天然產(chǎn)

2、物本身對(duì)細(xì)胞毒性較小，具有良好的安全性，因此，從天然產(chǎn)物中篩選高效低毒的MDR逆轉(zhuǎn)劑日益被醫(yī)學(xué)界所重視并逐漸成為研究的熱點(diǎn)。
　　在本文研究中，我利用人口腔癌和人乳腺癌多藥耐藥細(xì)胞株KB/VCR和MCF-7/ADR作為體外篩選模型，從大量天然產(chǎn)物中篩選并鑒定了H6、Mogrol、Z88和H5等多個(gè)具有逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥作用的分子。本文重點(diǎn)研究了絞股藍(lán)皂苷元H6和羅漢果皂苷元羅漢果醇(Mogrol)對(duì)腫瘤多藥耐藥的逆轉(zhuǎn)作用及其可能的內(nèi)

3、在機(jī)制。
　　H6是由絞股藍(lán)皂苷XLIX在堿性條件下水解得到的。研究結(jié)果顯示H6可以逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的多藥耐藥，增加KB/VCR和MCF-7/ADR細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性，促進(jìn)了ADR和VCR所誘導(dǎo)的G2/M阻滯和凋亡?？寺⌒纬陕试囼?yàn)的結(jié)果說明了H6可以增強(qiáng)VCR和ADR對(duì)KB/VCR和MCF-7/ADR細(xì)胞增殖的抑制。ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白P-gp、MRP1和ABCG2在KB/VCR和MCF-7/ADR細(xì)胞均高表達(dá)，提示H6對(duì)多藥耐藥的逆轉(zhuǎn)

4、作用可能與它們相關(guān)。因此，進(jìn)一步的研究我們檢測(cè)了H6對(duì)三者的特異性底物Rho123、CFDA和Mitoxantone在耐藥細(xì)胞內(nèi)聚集的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明，H6能抑制P-gp糖蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)功能，增加P-gp糖蛋白底物Rho123在耐藥細(xì)胞內(nèi)的聚集。H6同時(shí)還可抑制MRP1蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)功能，增加其特異性底物CFDA在耐藥細(xì)胞內(nèi)的聚集。H6通過抑制STAT3的磷酸化降低了MRP1細(xì)胞的表達(dá)，H6對(duì)ABCG2蛋白的活性以及P-gp和ABCG2的表達(dá)

5、無明顯影響。
　　Mogrol（羅漢果醇）是羅漢果皂苷ⅠA1、ⅠE1、ⅡE、Ⅲ、Ⅳ、ⅣE、Ⅴ和賽門苷Ⅰ等的苷元。我們的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)了Mogrol逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥的活性。Mogrol可以增加KB/VCR和MCF-7/ADR細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性，促進(jìn)ADR引起的MCF-7/ADR細(xì)胞的G2/M阻滯和VCR誘導(dǎo)的KB/VCR細(xì)胞的凋亡。在對(duì)Mogrol的作用機(jī)制研究中，Mogrol能夠調(diào)節(jié)P-gp糖蛋白的ATP酶活性，抑制P-gp糖蛋

6、白的轉(zhuǎn)運(yùn)功能，增加Rho123在KB/VCR和MCF-7/ADR細(xì)胞內(nèi)的聚集。Mogrol對(duì)MRP1和ABCG2蛋白的活性無明顯影響。Mogrol可以降低P-gp糖蛋白和MRP1蛋白的表達(dá)水平，對(duì)ABCG2的表達(dá)無明顯影響。
　　綜上所述，本文的研究發(fā)現(xiàn)了絞股藍(lán)皂苷元H6和羅漢果皂苷元Mogrol對(duì)KB/VCR細(xì)胞和MCF-7/ADR細(xì)胞多藥耐藥的逆轉(zhuǎn)活性。這些新的發(fā)現(xiàn)為尋找MDR抑制劑提供了新的候選化合物。H6和Mogrol逆轉(zhuǎn)