2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、背景:腎細(xì)胞癌是泌尿系統(tǒng)常見的惡性腫瘤,發(fā)病率高居泌尿系統(tǒng)腫瘤的第二位,近年來,腎細(xì)胞癌的發(fā)病率和死亡率均有明顯上升趨勢,嚴(yán)重威脅著人類的健康和生命。目前的治療仍以根治性手術(shù)為主,但術(shù)后的復(fù)發(fā)率達(dá)20%以上,且放療、化療的效果均不佳,因此尋找更有效的治療手段仍是目前腎細(xì)胞癌研究的重點(diǎn)之一。組蛋白去乙?;敢种苿?histone deacetylase inhibitors,HDACi)是近年來發(fā)現(xiàn)的一類新的靶向抗腫瘤藥物,它主要通過調(diào)節(jié)

2、組蛋白的乙?;癄顟B(tài)來改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu),進(jìn)而引起相關(guān)基因,包括一些抑癌基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá),抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)分化和凋亡。曲古菌素A(trichostatin A,TSA)來源自鏈霉菌的代謝產(chǎn)物,作為組蛋白去乙酰化酶抑制劑的代表藥物之一,TSA已被證明對多種人類腫瘤具有顯著的抑制作用,但迄今為止,TSA抗腫瘤的作用機(jī)制尚不完全清楚。
   目的:觀察TSA體外對人腎細(xì)胞癌Caki—1細(xì)胞生長情況、乙?;M蛋白H3、Survivin蛋白

3、以及p21cip1/waf1mRNA表達(dá)的影響,并探討其可能的相關(guān)作用機(jī)制。
   方法:1.采用四甲基偶氮唑藍(lán)(methyl thiazolyl terazolium,MTT)比色法測定經(jīng)0.2、0.4、0.8umol/L的TSA分別作用12、24、48、72h后對Caki—1細(xì)胞生長活性的影響,并于倒置顯微鏡下觀察0.4umol/L的TSA處理12、24、48、72h后Caki—1細(xì)胞的形態(tài)變化。2—蛋白質(zhì)印跡法檢測0.4u

4、mol/L的TSA處理12、24h后Caki—1細(xì)胞乙酰化組蛋白H3、Survivin蛋白表達(dá)水平的變化。3.實(shí)時熒光定量PCR檢測0.4umol/L的TSA處理12、24h后Caki—1細(xì)胞p21cip1/waf1 mRNA表達(dá)水平的變化。
   結(jié)果:1.MTT結(jié)果顯示TSA能顯著抑制Caki—1細(xì)胞的生長,生長抑制率隨處理濃度和時間的增加明顯上升,呈明顯的劑量、時間依賴性。同一濃度組,不同時間段的生長抑制率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

5、意義(P<0.05);同一時間段,不同濃度組的生長抑制率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。倒置顯微鏡下可見TSA處理后,Caki—1細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變,并隨作用時間的延長更加明顯。2.蛋白免疫印跡結(jié)果顯示,TSA能提高Caki—1細(xì)胞乙?;M蛋白H3的表達(dá),下調(diào)Survivin蛋白的表達(dá)。給予0.4umol/L的TSA處理Caki—1細(xì)胞,12h后Caki—1細(xì)胞的乙酰化組蛋白H3的表達(dá)水平比對照組明顯提高,24h后進(jìn)一步提高;而Su

6、rvivin蛋白的表達(dá)12h后比對照組明顯下降,24h后進(jìn)一步下降。3.實(shí)時熒光定量PCR結(jié)果顯示,TSA能促進(jìn)Caki—1細(xì)胞p21cip1/waf1 mRNA表達(dá)。給予0.4umol/L的TSA處理Caki—1細(xì)胞,Caki—1細(xì)胞p21cip1/waf1mRNA的表達(dá)水平12h后明顯升高,24h后進(jìn)一步升高,達(dá)到對照組的9倍多,各組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
   結(jié)論:1.TSA能顯著抑制Caki—1細(xì)胞

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