鼠抗人纖維蛋白單鏈抗體的二次人源化及人源化抗體的體外成熟.pdf_第1頁(yè)
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1、ScFvA11是該實(shí)驗(yàn)室利用噬菌體表面呈現(xiàn)技術(shù)篩選到一株對(duì)人纖維蛋白特異的鼠單鏈抗體,而且以該鼠抗體為基礎(chǔ),構(gòu)建和表達(dá)了單鏈抗體-低分子量尿激酶融合基因.動(dòng)物試驗(yàn)表明,在達(dá)到相同的溶栓效果時(shí),單鏈抗體-尿激酶融合蛋白的用量只是尿激酶且量的1/4,顯示該融合蛋白具有較好的體內(nèi)導(dǎo)向溶栓效果,有很好的應(yīng)用前景.為降低鼠抗體的免疫原性,該實(shí)驗(yàn)室已采用表面重塑(surface reshaping)的人源化方案對(duì)該鼠抗體進(jìn)行了第一次人源化.第一次人

2、源化后,人源化抗體重鏈框架區(qū)與人源性抗體模板(HSVHIF)的同源性達(dá)到86﹪,人源化抗體輕鏈框架區(qū)與人源性抗體模板(KV3L-H)的同源性達(dá)到75﹪,經(jīng)在大腸桿表達(dá)和對(duì)表達(dá)產(chǎn)物的純化及活性分析,結(jié)果表明人源化單鏈抗體具有與親本鼠抗體相擬的體外活性.在該研究中,為了進(jìn)一步提高人源化抗體輕鏈的人源化程度,在對(duì)鼠單鏈抗體的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分子模建的基礎(chǔ)上,參照大量成功人源化的實(shí)例對(duì)該鼠抗體輕鏈進(jìn)行了第二次人源化.二次人源化之后,輕鏈框架區(qū)與人源性模

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