三維培養(yǎng)體系下Aurora-A激酶促乳腺永生細胞MCF-10A惡性轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)移中的作用研究.pdf

1、目的：研究Aurora-A激酶對乳腺永生化細胞MCF-10A的惡性轉(zhuǎn)化作用及轉(zhuǎn)移能力的影響，初步探討Aurora-A對三維培養(yǎng)體系下的乳腺永生化細胞的影響；為深入認識Aurora-A激酶的作用、三維培養(yǎng)體系在腫瘤研究的作用提供一定的證據(jù)。 方法：用逆轉(zhuǎn)錄病毒法轉(zhuǎn)染MCF-10A細胞株，通過藥物篩選，獲得穩(wěn)定高表達Aurora-A的MCF-10A細胞株，用Western印跡法檢測Aurora-A表達情況。用細胞計數(shù)法檢測Auror

2、a-A高表達對MCF-10A細胞生長的影響；用間接免疫熒光法在激光共聚焦顯微鏡下觀察三維培養(yǎng)體系中Aurora-A高表達對MCF-10A細胞增殖、凋亡的影響；觀察細胞極性變化；用遷移實驗研究Aurora-A對MCF-10A細胞遷移能力的影響。 結(jié)果：用逆轉(zhuǎn)錄的方法通過藥物篩選，我們獲得了穩(wěn)定高表示Aurora-A的MCF-10A細胞株；用細胞計數(shù)和間接免疫熒光法都證實Aurora-A激酶在二維和三維培養(yǎng)體系中都促進MCF-10A

3、細胞的增殖；在三維培養(yǎng)體系中Aurora-A對細胞凋亡也起促進作用；但Aurora-A對MCF-10A細胞的增殖作用較凋亡作用明顯。高表達Aurora-A可以改變?nèi)S培養(yǎng)體系中的乳腺細胞極性，上皮細胞的極性蛋白分子表達分布發(fā)生改變，細胞間的粘附力減弱，細胞的遷移能力增強。 結(jié)論：Aurora-A激酶有促進乳腺永生化細胞MCF-10A增殖的作用，在三維培養(yǎng)體系中Aurora-A促增殖和促凋亡作用是同時存在的，而且促增殖的作用較促凋