microRNA-145對乳腺癌細(xì)胞系MCF7的調(diào)控作用及其分子機(jī)制研究.pdf

1、microRNA是一類長約19-22nt的內(nèi)源性的,非編碼RNA,通過作用于靶基因的3’UTR區(qū),導(dǎo)致靶基因的mRNA降解或者抑制其翻譯,在轉(zhuǎn)錄后水平對基因進(jìn)行調(diào)控。microRNA具有多種生物學(xué)功能,參與調(diào)控細(xì)胞分化,增殖和凋亡等。因此,microRNA表達(dá)異常會(huì)引起多種疾病,包括腫瘤。
　　 研究表明人類惡性疾病的發(fā)生發(fā)展中有microRNA的參與。研究人員提出microRNA具有腫瘤原癌基因或抑癌基因的功能。此外,有報(bào)道多

2、種類型的腫瘤組織中存在microRNA的異常失活或過度表達(dá)。例如,由于缺失或其他未知機(jī)制,68％慢性淋巴細(xì)胞白血病患者體內(nèi)miR-15a和miR-16表達(dá)下調(diào)。B細(xì)胞淋巴瘤患者體內(nèi)miR-17-92簇表達(dá)顯著升高。此外,在一項(xiàng)對540例肺癌,乳腺癌,胃癌,前列腺癌以及結(jié)直腸癌腫瘤標(biāo)本的大規(guī)模研究中,研究人員發(fā)現(xiàn)了所謂的腫瘤microRNA表達(dá)譜。然而,這些研究主要是集中在microRNA的表達(dá)情況,對其功能以及相應(yīng)的分子機(jī)制研究的比較少

3、。
　　 之前有研究報(bào)道m(xù)iR-145在多種腫瘤,如結(jié)直腸癌,B細(xì)胞淋巴瘤,宮頸癌,肝癌,卵巢癌中表達(dá)下調(diào)。提示miR-145可能具有抑癌功能。本研究中,我們發(fā)現(xiàn)microRNA-145在人乳腺癌細(xì)胞系MCF7中表達(dá)下調(diào),這與之前的研究相一致。在MCF7中過表達(dá)microRNA-145能在體外顯著抑制細(xì)胞生長,并誘導(dǎo)其凋亡。為了研究這一現(xiàn)象的潛在機(jī)制,我們采用多種計(jì)算方法來尋找miR-145的靶基因。通過targetscan和p

4、ictar,找到了大約100個(gè)靶基因。其中,RTKN是我們重點(diǎn)研究的靶基因。因?yàn)楹芏嘌芯勘砻鱎TKN在腫瘤中表達(dá)升高。更重要的是抑制RTKN后,可以增強(qiáng)細(xì)胞對凋亡刺激信號(hào)的敏感性。RTKN連接Rho信號(hào)與NFκB活化,激活其下游的抗凋亡基因,促進(jìn)細(xì)胞存活,在MCF7中,miR-145直接作用于RTKN的3’UTR區(qū),從而抑制RTKN的表達(dá)。此外,用siRNA抑制RTKN的表達(dá)后,能夠抑制MCF7細(xì)胞生長。這些研究均提示miR-145通過