懸浮培養(yǎng)富集三陰性乳腺癌干細(xì)胞.pdf

1、目的：
　　探討MDA-MB-231細(xì)胞經(jīng)無血清培養(yǎng)富集三陰性乳腺癌干細(xì)胞。
　　方法：
　　將MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞進(jìn)行微球體培養(yǎng)，取培養(yǎng)第7-9天的微球體,判斷干細(xì)胞富集的程度；比較不同細(xì)胞濃度對(duì)癌球細(xì)胞成球率影響；干細(xì)胞表型CD44+CD24-/low流式細(xì)胞儀的測(cè)定; Western blot法分析癌球與貼壁細(xì)胞CXCR4蛋白表達(dá)；單個(gè)癌球細(xì)胞再成球能力；觀察癌球與貼壁細(xì)胞集落形成。
　　結(jié)果：<

2、br>　?。?).在含20ng/ml EGF,10ng/ml bFGF,2％b27無血清培養(yǎng)基中可培養(yǎng)三陰性乳腺癌癌球，1*104/ml、2*104/ml、3*104/ml、4*104/ml、5*104/ml細(xì)胞濃度癌球細(xì)胞成球率分別為（5.61±0.02）%、（3.23±0.54）%、（2.28±0.48）%、（1.05±0.13）%、（0.91±0.01）%，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P值均＜0.05。
　　（2).貼壁 MD

3、A-MB-231細(xì)胞與癌球細(xì)胞 CD44+CD24-/low含量分別為（38.54±2.00）%VS(66.35±2.06）%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P=0.003。
　?。?).癌球細(xì)胞CXCR4蛋白表達(dá)高于貼壁MDA-MB-231細(xì)胞，灰度掃描分析差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P=0.03。
　?。?).單個(gè)癌球細(xì)胞具有再成球能力。
　?。?).軟瓊脂糖集落形成能力癌球需200個(gè)細(xì)胞即可見集落形成，而貼壁細(xì)胞需1000個(gè)MDA-M