豬帶絳蟲重組Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗保護力及其免疫機制研究.pdf

1、目的：在成功構建豬帶絳蟲重組Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗的基礎上，將豬帶絳蟲重組Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗口服灌胃免疫仔豬，觀察其誘導免疫應答的動態(tài)變化和對豬帶絳蟲卵攻擊的保護力及其免疫機制，為豬囊尾蚴病的防治提供一種有價值的疫苗。
　　方法:為了觀察其誘導免疫應答的動態(tài)變化，將40日齡健康仔豬隨機分為4組，每組4頭。第1組為1011CFU豬帶絳蟲重組Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗灌胃組；

2、第2組為1011CFU豬帶絳蟲重組Bb-TSO45W-4B疫苗灌胃組；第3組為1011CFU豬帶絳蟲重組Bb-TSOL18疫苗灌胃組；第4組為雙歧桿菌液體培養(yǎng)基（MRS）對照組。間隔兩周免疫1次，共免疫次。采用ELISA法檢測各組仔豬免疫后0、2、4、6、8周血清抗體IgG、IgG1、IgG2a水平和外周血淋巴細胞（PBMC）培養(yǎng)上清液IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10水平；采用MTT比色法檢測 PBMC增殖水平；采用流式細胞術

3、（FCM）檢測PBMC中CD4+和CD8+T細胞亞群。
　　為了研究豬帶絳蟲卵攻擊后誘導的保護力及其免疫機制，將40日齡健康仔豬隨機分為5組，每組4頭。第1組為1011CFU豬帶絳蟲重組Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗灌胃組；第2組為1011CFU豬帶絳蟲重組Bb-TSO45W-4B疫苗灌胃組；第3組為1011CFU豬帶絳蟲重組Bb-TSOL18疫苗灌胃組；第4組為空載體對照組；第5組為MRS對照組。間隔兩周免疫1次，共

4、免疫2次。于疫苗末次免疫后4周，用豬帶絳蟲活蟲卵給每頭仔豬灌胃進行攻擊感染，攻擊感染3月后，解剖豬體，摘取囊尾蚴，計算減蚴率；采用ELISA法檢測各組仔豬血清抗體IgG、IgG1、IgG2a水平和PBMC培養(yǎng)上清液IL-2、IL-4、IFN-γ、IL-10水平；采用MTT比色法檢測PBMC增殖水平。
　　結果：動態(tài)觀察發(fā)現豬帶絳蟲重組Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗免疫仔豬后，血清抗體IgG、IgG1、IgG2a水平分別

5、在免疫后2～8周、2～8周、2～8周升高，分別在免疫后4周、6周、4周達較高水平；PBMC增殖水平在免疫后2～8周升高，在免疫后6周達較高水平；PBMC中CD4+和CD8+細胞亞群分別在免疫后2～8周和2～8周升高，分別在免疫后8周和6周達較高水平；PBMC培養(yǎng)上清液中 IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10水平分別在免疫后2～6周、2～8周、4～6周和2～8周升高，分別在免疫后4周、6周、4周和8周達較高水平。其免疫應答水平，豬帶

6、絳蟲重組Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗組優(yōu)于重組Bb-TSO45W-4B疫苗組和重組Bb-TSOL18疫苗組。
　　進一步用豬帶絳蟲重組Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗免疫仔豬，豬帶絳蟲卵攻擊后發(fā)現，免疫仔豬獲得83.09％的保護力；血清IgG和IgG2a水平升高，IgG1水平降低；PBMC增殖水平升高；PBMC培養(yǎng)上清液中IL-2和IFN-γ水平升高，IL-4和IL-10水平降低。其免疫保護效果，豬帶絳蟲重

7、組 Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗組優(yōu)于重組Bb-TSO45W-4B疫苗組和重組Bb-TSOL18疫苗組。
　　結論：動態(tài)觀察表明，豬帶絳蟲重組Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗免疫仔豬后，可誘導仔豬產生有效的免疫應答。攻擊試驗表明，豬帶絳蟲重組 Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗能夠誘導仔豬產生一定的保護力，Th1型免疫應答在其誘導的保護性免疫機制中起重要作用。其免疫保護性，豬帶絳蟲重組 Bb-TSO