喹賽多在豬、雞、魚、大鼠和人體內的藥動學研究.pdf

1、喹賽多作為喹噁啉類藥物的新品種，和同類藥物相比抗菌譜更廣，有顯著的促進畜禽生長和提高飼料利用率的作用。已有研究表明，喹賽多可以有效促進畜禽及魚類的生長;同時，與同類藥物相比毒性更低，具有良好的開發(fā)應用前景。作為一類新型獸用藥物的研發(fā)內容，藥代動力學是其中重要的部分。本研究采用平衡透析法測定喹賽多與雞、魚和大鼠血漿蛋白結合率，為揭示其體內的作用特點及動力學行為提供基礎資料;開展了三個劑量的喹賽多在豬、雞、魚和大鼠體內的血液藥代動力學研究，

2、計算了不同動物體內喹賽多及其代謝物藥動學參數(shù)并擬合了藥物濃度-時間曲線，揭示了藥物在四種動物體內代謝及動力學特征;此外，測定人口服喹賽多后喹賽多原形及其代謝物在血、尿和糞中含量，鑒定了在實驗過程中不同時間點收集的血液、糞便和尿液樣品中的代謝物種類，闡明了喹賽多在人體的代謝及藥動學特征以及與食品動物的異同性，觀測了喹賽多對人體可能產生的不良反應。研究中還采用人肝微粒體作為實驗材料，對喹賽多進行體外代謝研究，與喹賽多在實驗動物和靶動物體內、

3、體外代謝結果進行比較，查看有無新的代謝物產生及代謝的種屬差異性。
　　1.喹賽多與雞、魚和大鼠血漿蛋白結合率的測定
　　血漿蛋白結合率直接影響藥物藥理及毒性作用，是藥物在體內的重要參數(shù)之一。本研究采用平衡透析法結合HPLC，測定喹賽多與大鼠、魚和雞的血漿蛋白結合率。喹賽多平衡透析48h時可達到平衡狀態(tài)。在0.05、0.5和1.0mg/L濃度下，喹賽多與大鼠、魚和雞血漿蛋白結合率分別為67.23±1.47％、67.13±0.3

4、4％、60.97±0.63％;53.53±1.66％、41.66±1.36％、39.82±1.01％和37.30±0.98％、34.74±1.19％、32.54±1.74％。結果證明，喹賽多在大鼠血漿中屬于中血漿蛋白結合藥物，可能不利于藥物以游離形式進入體內發(fā)揮作用。喹賽多在魚和雞血漿中屬于低血漿蛋白結合藥物，有利于藥物以游離形式進入體內發(fā)揮作用。
　　2.喹賽多在豬、雞、魚和大鼠體內的藥代動力學研究
　　為探討不同劑量喹賽

5、多在四種動物體內的吸收、分布與消除特點，本試驗在建立喹賽多及其5種代謝物在豬、雞、魚和大鼠血液中定量分析方法的基礎上，研究了豬、雞、魚和大鼠灌服不同劑量喹賽多后血液中原形及其5種主要代謝產物的經時變化規(guī)律。24頭杜長大三元雜交豬分別按照10、40和100mg/kgb.w.單次灌服喹賽多，給藥后分別在不同時間點經前腔靜脈采集血液3-4mL;30只科寶肉雞單次灌服喹賽多50、100和200mg/kgb.w.，給藥后分別在不同時間經翼靜脈叢采

6、集血樣2mL;210尾健康鯉魚單次灌服喹賽多10、20和40mg/kgb.w.，給藥后分別在不同時間經鯉魚尾靜脈采集血樣3mL;90只Wistar大鼠分別單次灌服喹賽多100、300和500mg/kgb.w.，給藥后分別在不同時間經大鼠眼眶靜脈叢采集血樣0.5mL;分離上述血漿并采用HPLC法檢測血藥濃度，用非房室法計算藥動學參數(shù)。
　　豬:結果顯示，在豬血漿共檢測到5種化合物，分別是Cy0、Cy1、Cy2、Cy4和Cy6。原形C

7、y0最早在血漿中出現(xiàn)，低劑量下在0.75h能夠檢測到，中劑量和高劑量下于0.17h就可以檢測到。低劑量下，三種代謝物Cy1、Cy4和Cy6均在4h檢出。中劑量下Cy1、Cy4和Cy6也均在4h能檢出，Cy2在5h檢出。高劑量下Cy1最早在2h檢出，Cy2、Cy4和Cy6均在4h能檢出。40mg/kgb.w.劑量下，Cy0達峰濃度Cmax為0.04μg/mL，消除半衰期T1/2為7.41h，藥時曲線下面積(AUC)為0.19(h·μg·m

8、L-1)。Cy6達峰濃度Cmax為0.17μg/mL，消除半衰期T1/2為9.04h，藥時曲線下面積(AUC)為2.02(h·μg·mL-1)。結果表明，喹賽多和代謝物吸收迅速，吸收較少，分布廣，原形藥物比代謝物消除更快。不同劑量下，代謝物的濃度均高于原形藥物的濃度。Cy0、Cy1、Cy2和Cy4消除半衰期隨著劑量的升高沒有顯著性的變化，表明它們在動物體內可能遵循線性動力學過程。Cy6的消除半衰期在不同劑量下隨著劑量的加大而延長，提示其

9、在豬體內可能存在非線性動力學過程。研究結果揭示了喹賽多在豬體內的動力學特征及劑量依賴性，為深入研究喹賽多藥理、毒理學特點及臨床有效性與安全性提供科學依據(jù)。
　　雞:結果顯示，在雞血漿共檢測到2種化合物，分別是Cy0和Cy6;50和100mg/kgb.w.時，只能檢測到Cy6，最早檢出Cy6為給藥后0.5h;200mg/kgb.w.時，均檢測到Cy0和Cy6，最早檢出時間分別為給藥后0.17和0.5h。200mg/kgb.w.劑量下

10、，Cy0達峰濃度Cmax為0.034μg/mL，消除半衰期T1/2為2.91h，藥時曲線下面積(AUC)為0.07(h·μg·mL-1);Cy6達峰濃度Cmax為0.039μμg/mL，消除半衰期T1/2為3.66h，藥時曲線下面積(AUC)為0.09(h·μg·mL-1)。結果表明，喹賽多和代謝物吸收迅速，吸收較少，分布廣，原形藥物比代謝物消除更快。不同劑量下，代謝物的濃度均高于原形藥物的濃度。Cy6消除半衰期隨著劑量的升高沒有顯著性

11、變化，表明它們在動物體內可能存在線性動力學過程。研究結果揭示了喹賽多在肉雞體內的動力學特征及劑量依賴性，為深入研究喹賽多藥理、毒理學特點及臨床有效性與安全性提供科學依據(jù)。
　　魚:結果顯示，在鯉魚血漿共檢測到3種化合物，分別是Cy0、Cy1和Cy6。低劑量下只檢測到Cy6一種代謝物，中劑量下檢測到兩種代謝物分別是Cy1和Cy6，高劑量下檢測到Cy0、Cy1和Cy6三種化合物。其中高劑量下原形Cy0最先被檢測出，給藥后0.25h就能

12、在血漿中檢測到;代謝物Cy1和Cy6在三個劑量下都是給藥后1h后能夠檢出。40mg/kgb.w.劑量下，Cy0達峰濃度Cmax為0.063μg/mL，消除半衰期T1/2為5.41h，藥時曲線下面積(AUC)為0.49(h·μg·mL-1)。Cy1達峰濃度Cmax為0.069μg/mL，消除半衰期T1/2為5.56h，藥時曲線下面積(AUC)為0.52(h·μg·mL-1)。Cy6達峰濃度Cmax為0.061μg/mL，消除半衰期T1/2

13、為8.68h，藥時曲線下面積(AUC)為0.64(h·μg·mL-1)。結果表明，喹賽多和代謝物吸收迅速，吸收較少，分布廣，原形藥物比代謝物消除稍快。不同劑量下，代謝物的濃度均高于原形藥物的濃度;隨著劑量升高各代謝物的峰濃度增大。代謝物Cy1和Cy6消除半衰期隨著劑量的升高無顯著變化，表明它們在鯉體內是線性動力學過程。研究結果揭示了喹賽多在鯉魚體內的動力學特征及劑量依賴性，為深入研究喹賽多藥理、毒理學特點及臨床有效性與安全性提供科學依據(jù)

14、。
　　大鼠:結果顯示，在大鼠血漿共檢測到原形和3種代謝物，分別是Cy0、Cy1、Cy4和Cy6，其中原形Cy0最早在血漿中出現(xiàn)，低劑量下在0.75h能夠檢出，中劑量和高劑量下于0.17h就可以檢出。低劑量下，三種代謝物均在2h檢出，中、高劑量下Cy1和Cy4在1h能檢測出，Cy6在2h檢測出。100mg/kgb.w.劑量下，Cy0達峰濃度Cmax為0.10μg/mL，消除半衰期T1/2為6.35h，藥時曲線下面積(AUC)為0.

15、51(h·μg·mL-1);Cy6達峰濃度Cmax為0.22μg/mL，消除半衰期T1/2為8.50h，藥時曲線下面積(AUC)為2.28(h·μg·mL-1)。結果表明，喹賽多和代謝物吸收迅速，吸收較少，分布廣，原形藥物比代謝物消除更快，代謝物的濃度均高于原形藥物的濃度。Cy0、Cy1和Cy4消除半衰期隨著劑量的升高而延長，表明它們在動物體內可能存在非線性動力學過程。Cy6的消除半衰期在不同劑量下無顯著變化，提示其在大鼠體內為線性動力

16、學過程。研究結果揭示了喹賽多在大鼠體內的動力學特征及劑量依賴性，為深入研究喹賽多藥理、毒理學特點及臨床有效性與安全性提供科學依據(jù)。
　　3.喹賽多在人體內藥動學和肝微粒體的代謝研究
　　采用人肝微粒體作為實驗材料，研究了喹賽多在人肝微粒體內的代謝情況。用CO差示光譜法檢測CYP450的活性及含量，進而用硝苯地平作為喹賽多代謝相關酶的探針底物，驗證喹賽多代謝酶的活性。結果表明，喹賽多在人肝微粒體中可發(fā)生廣泛代謝，檢測到了成原形

17、Cy0和4種(Cy1、Cy2、Cy13和Cy15)代謝物，其中Cy1和Cy2含量最多，為主要的代謝物。在此研究條件下沒有發(fā)現(xiàn)新的代謝產物;主要的代謝途徑是脫氧和側鏈酰胺鍵的水解斷裂，代謝途徑與代謝方式跟實驗動物和食品動物相比均沒有顯著差異。
　　健康受試者16人，隨機分為給藥組和對照組，給藥組10人，單劑量口服喹賽多(15mg/kgb.w.)膠囊劑。對照組6人，單劑量口服淀粉(15mg/kgb.w.)膠囊劑。給藥后分別在不同時間點

18、經靜脈采血2mL，采用HPLC方法檢測血漿中喹賽多及其代謝物濃度，用非房室模型統(tǒng)計矩理論計算喹賽多及其代謝產物的藥動學參數(shù)。收集給藥后不同時間段內的糞便和尿液，計算藥物的回收量。同時，試驗前后分別測定受試者的心電圖、血壓、脈搏、體溫等生理指標。結果顯示，人血漿中檢出三種化合物分別是Cy0、Cy1和Cy6。Cy0出現(xiàn)最早，給藥后30min檢出。Cy1和Cy6都是給藥后6h檢出。Cy1藥動學參數(shù):T1/2為8.34h，Cmax為0.068μ

19、g/mL，AUC(0-36h)為0.72(h·μg·mL-1)。Cy6的藥動學參數(shù):T1/2為11.8h，Cmax為0.156μg/mL，AUC(0-36h)為2.04(h·μg·mL-1)。喹賽多在人體內吸收較少，在人體內存在形式以代謝物為主，吸收和消除比較快。在人的尿液中檢測到了原形Cy0和11種代謝物(分別是Cy1、Cy2、Cy4、Cy5、Cy6、Cy7、Cy8、Cy10、Cy13、Cy14和Cy15)，糞便中檢測到了原形Cy0和

20、10種(分別是Cy1、Cy2、Cy4、Cy6、Cy7、Cy8、Cy10、Cy12、Cy13和Cy15)代謝物。糞便和尿液中回收的藥物以原形藥物為主;相比發(fā)現(xiàn)，在糞便中回收的藥量遠大于尿液中回收的藥物量。糞便和尿液中原形和代謝物給藥后三天基本檢測不到，糞便和尿液中藥物的總回收率為(36.13±2.22)％。給藥前后人的血液生理生化指標沒有顯著性的改變且都在正常的生理范圍之內。結果表明，喹賽多在人體內代謝較快，代謝物種類較多，其代謝途徑與實