昆蟲病理學(xué)-昆蟲病毒

1、,,,,01.前言,02.昆蟲病毒的類群,03.重要昆蟲病毒概述,04.昆蟲病毒的生產(chǎn),05.昆蟲病毒在害蟲防治上的應(yīng)用,1 前言,——1.昆蟲病毒的最早記載,昆蟲病毒是引起昆蟲致病和死亡的重要病原體。最早關(guān)于昆蟲病毒的記載是中國，在1149年出版的《農(nóng)書》中，就記載有家蠶的“高節(jié)”“腳腫”病，即中國農(nóng)民俗稱的“膿病”。20世紀(jì)初才證明“膿病”病原是核型多角體,蠶(高節(jié)),病蠶腹腳基部變?yōu)槿榘咨?蠶(正常),,2 昆蟲病毒的類群,病毒

2、virus：一類形態(tài)最小，結(jié)構(gòu)最簡單的微生物。由單一的核酸(RNA或DNA)組成中心核、核外包裹一層外殼蛋白組成。昆蟲病毒：是指能感染昆蟲且能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖的病毒，涉及20多個科，能夠用于生物防治的主要包括囊泡病毒科Ascoviridae、桿狀病毒科 Baculoviridae 、虹彩病毒科Iridoviridae、裸露病毒科Nudiviridae、痘病毒科Poxvirinae、細(xì)小病毒科 Parvoviridae、呼腸孤病毒科

3、Reoviridae等科的成員。病毒病viral disease：由病毒病原體引起的疾病。,,2.1 昆蟲病毒的基本特征,（1）典型病毒粒的構(gòu)造,病毒粒有時也稱病毒顆?；虿《玖Ｗ? virus 、 particle ) , 專指成熟的、結(jié)構(gòu)完整的和有感染 性的單個病毒。病毒粒的基本成分是核酸和蛋白質(zhì)。,,2.2 病毒的主要類群,（2）病毒的主要類群：,傳統(tǒng)上，以“原始寄主”來將病毒劃分為若干類群。“原始寄主”：病

4、毒的反應(yīng)首先引起人類注意的寄主。,病毒的主要類群,,,2.3 不同種類病毒的分類,（3）不同種類病毒的分類,分類依據(jù)： ①形態(tài)學(xué)特征 病毒粒子的形狀、大小；亞顯微結(jié)構(gòu)等 ②生物化學(xué)和生物物理學(xué)特征 核酸類型、核酸特性、蛋白質(zhì)構(gòu)成以及隔成分的含量、 分子量、浮力密度和沉降系數(shù)等

5、 ③生物學(xué)特征 病毒入侵生物體的復(fù)制過程、寄主范圍和傳遞方式等,根據(jù)國際病毒分類委員會（ICTV）第九次報告，將目前所承認(rèn)的2284種病毒和類病毒歸入6個目、87個科、19個亞科和349個屬。 其中昆蟲病毒涉及20多個科,不同種類病毒的分類,,2.4 不同種類病毒的結(jié)構(gòu),（4）不同種類病毒的結(jié)構(gòu),,3 重要昆蟲病毒的概述,到1986年前為止：國內(nèi)外已從約1100種昆蟲、螨類中分出約1690種病

6、毒我國已從約7目26屬190種昆蟲中分離出234株病毒已知昆蟲病毒的寄主有鱗翅目、膜翅目、雙翅目、鞘翅目、直翅目、半翅目、同翅目、脈翅目、革翅目、毛翅目、蜉蝣目、蜻蜓目等，尤以鱗翅目為主要寄主。,目前已知至少有20余類的昆蟲病毒，但研究歷史最長、防治應(yīng)用最廣的是桿狀病毒科中的核型多角體病毒（Nuclear Polyhedrosis Virus, NPV）和顆粒體病毒（Granulosis Virus, GV）以及呼腸孤病毒科中的質(zhì)型

7、多角體病毒（Cytopkasmic Polyhedrosis Virus, CPV）。當(dāng)然囊泡病毒科中煙草夜蛾囊泡病毒3h株（Helithis virescens ascovirus 3h，HvAV-3h）的作為后起之秀，近年來也有突出表現(xiàn)。,,3 重要昆蟲病毒的概述,核型多角體病毒(nuclear polyhedrosis viruse,簡稱NPV)是研究得最早和最為詳細(xì)的一類昆蟲病毒。在分類上為桿狀病毒屬（Baculovirus

8、）的A亞組。,3.1 核型多角體病毒(NPV),,3 重要昆蟲病毒的概述,3.1 核型多角體病毒(NPV),一般形態(tài)特征： - 具有較大的包涵體，稱為多角體(polyhedra，簡稱IB或PIB)，在被感染的細(xì)胞核內(nèi)形成。,舞毒蛾 ＮＰＶ,病毒粒子,春尺蠖NPV,病毒粒子,美國白蛾NPV,病毒粒子,- 多角體大小常因寄主昆蟲種類的不同而不同，甚至在統(tǒng)一寄主細(xì)胞內(nèi)，多角體的形狀大小也有區(qū)別。常見的形狀有三角形、四角形、五角形、立方體

9、、不規(guī)則形等。,,3.1 核型多角體病毒(NPV),病毒粒子由外到內(nèi)： 囊膜（內(nèi)膜）——一層脂質(zhì)膜 衣殼（內(nèi)膜）——主要成分是蛋白質(zhì) 髓核——由DNA組成，呈螺旋狀 后兩者加在一起成為核衣殼。 一個品系的NPV，可能每個囊膜內(nèi)均只有一個核衣殼，也由可能每個囊膜內(nèi)由1到多個核衣殼而成為“病毒束”，前者稱為單粒包埋型病毒，后者稱為多粒包埋型病毒。,,NPV病

10、毒粒子結(jié)構(gòu)圖,,3.1 核型多角體病毒(NPV),（1）NPV的理化性狀：,不溶于水及多種有機溶劑如乙醇、乙醚、三氯甲烷、苯、丙酮等強酸或強堿溶液處理，能使多角體蛋白質(zhì)溶解。病毒粒子外有包涵體的保護，可在自然條件下存活多年仍不失效。對低溫有較高的忍受力。 如家蠶NPV在–135℃～–150℃條件下反復(fù)凍結(jié)融解5次，其感染力不變。對高溫的抵抗力較差，如粉紋夜蛾NPV的失活溫度為82～88℃10min，棉鈴蟲NPV的失活溫

11、度為75～80℃10min，粘蟲的NPV在100℃經(jīng)10min失活。,,3.1 核型多角體病毒(NPV),2、 感病特征： NPV感染幼蟲后，初期外部病征不明顯，后期行動遲緩，食欲減少，體色變化（鱗翅目幼蟲體色淡而少毛，油光或現(xiàn)淡黃斑；膜翅目葉蜂感病早期第三節(jié)至第五節(jié)由鮮綠色變成淡黃色），4天后開始死亡，5-7天為死亡高峰。幼蟲死后，組織液化，表皮輕觸即破，流出膿狀體液，無臭。一般蟲子瀕死前，表現(xiàn)很不安寧，常爬到養(yǎng)蟲器具的頂部或

12、植物的頂部倒懸而死。,被LdNPV感染的舞毒蛾組織液化,LdNPV多角體 舞毒蛾死亡狀,,3.1 核型多角體病毒(NPV),被NPV病毒感染致死的美國白蛾幼蟲,感NPV春尺蠖死亡癥狀,(先吐絲纏住尾部，倒掛樹枝),,3.1 核型多角體病毒(NPV),3、侵入途徑和侵染部位 NPV傳染途徑主要為食入感染，極少可從皮膚及氣門感染。致病的因素是病毒粒子而不是多角體。NPV食入后，多角體進入中腸后，堿性條件下病毒粒子被釋放出

13、來，將其遺傳物質(zhì)注入昆蟲細(xì)胞，使得昆蟲細(xì)胞受到病毒遺傳信息的控制而復(fù)制病毒，最終導(dǎo)致害蟲細(xì)胞的破壞和害蟲的死亡；NPV對昆蟲的侵染部位依不同的寄主而有差異。棉鈴蟲NPV主要侵染幼蟲的血細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、氣管、馬氏管、神經(jīng)節(jié)和表皮細(xì)胞的細(xì)胞核，有些昆蟲的中腸細(xì)胞、絲腺體、肌肉及生殖系統(tǒng)細(xì)胞也被感染。,MNPV感染鱗翅目昆蟲感染模型,,3.1 核型多角體病毒(NPV),·桿狀病毒曾以選擇性和?；愿叨Q，但試驗證明一種昆蟲的桿

14、 狀病毒能感染其他昆蟲的事例并不少見。·家蠶NPV能侵染柞蠶等11種昆蟲。歐洲云杉卷葉蛾(Choristoneura murinana)的NPV能侵染云杉卷葉蛾(C．funiiferana)、蘋果囊蛾、 李食心蟲、歐洲松梢卷葉蛾等。紅棕灰夜蛾(Sarcopolia illoba)NPV 能侵染銀紋夜蛾、黃地老虎、粘蟲等12種夜蛾科害蟲。,4、NPV的選擇性與專化性,5、NPV的交叉感染性,一種昆蟲也可

15、合并感染兩類不同的病毒，如黃地老虎、菜粉蝶、粘蟲、粉紋夜蛾、云杉卷葉蛾等可合并感染核型多角體病毒和顆粒體病毒。粘蟲合并感染NPV和GV時，GV能增強NPV的感染，有協(xié)同增效作用。有些合并感染則有干擾作用，如云杉卷葉蛾先感染的病毒妨礙后感染病毒的發(fā)展。,,3 重要昆蟲病毒的概述,3.2 顆粒體病毒(GV),·顆粒體病毒（granulosis virus，簡稱GV）在分類上屬桿狀病毒科B亞組。·病毒粒子外有囊膜。包涵

16、體呈顆粒體，卵形或橢圓形，很小，300-511nm ×119-350nm。病毒粒子桿狀，稍彎曲，大小因寄主種類不同而異。GV的核酸是DNA。,霜天蛾GV的形態(tài),小菜蛾GV經(jīng)堿處理后的病毒粒子,,3.2 顆粒體病毒(GV),1、GV的理化性狀,·不溶于水和一般的有機溶劑如乙醚、乙醇、丙酮、二甲苯等。·遇強酸或強堿，包涵體能迅速溶解，并可使病毒粒子變性而失 去侵染力。·可在室溫下保存5年以

17、上而不失侵染力。·高溫可使其失活。·冰凍無多大危害。較低的溫度有可能延長貯存的時期。·紫外線或其他輻射線能使完整的病毒失活。·用稀堿處理后可獲得完整和具侵染性的病毒粒子。,,3.2 顆粒體病毒(GV),2、感病特征： 感染GV的幼蟲病征與NPV頗為相似，首先表現(xiàn)食欲減退，行動遲緩，腹部腫脹，最后停止攝食，剛死幼蟲頭部下垂，口腔向外吐出粘稠液。皮膚顏色（特別是腹面）從固有色澤逐漸變成灰

18、白色或乳黃色，但因蟲種而異。如菜粉蝶得病后腹面呈乳白色；蘋果小蠹蛾幼蟲腹面變得比健蟲更加發(fā)紫；鹿眼蛺蝶變成異常的褐色。病勢進一步發(fā)展，血液一般混濁呈乳白色。病死蟲體多為倒掛或呈“?”型掛在樹枝上。很快變黑。,楊扇舟蛾幼蟲死亡癥狀,楊扇舟蛾顆粒體病毒,楊扇舟蛾顆粒體病毒和幼蟲死亡癥狀,,3.2 顆粒體病毒(GV),3、GV的感染途徑,·通過口服進入易感蟲體，顆粒體在中腸中溶解，游離的病毒粒子通過 腸道柱形細(xì)胞的微絨毛而侵入，在這

19、些細(xì)胞核中增殖，新形成的顆粒體病毒釋放于血淋巴中而導(dǎo)致對其他組織的繼發(fā)感染。·蟲體外傷和寄生天敵產(chǎn)卵可引起GV對皮下感染，也可經(jīng)卵垂直傳播。,4、GV的?；?·顆粒體病毒的?；暂^強，交叉感染的情況甚為少見，一般認(rèn)為顆粒 體病毒是包涵體病毒含DNA的各類中?；宰顝姷囊活悺?#183;以往尚無顆粒體病毒能在植物或其他動物細(xì)胞中增殖的報道。近年我 國用小菜蛾細(xì)胞系BCIRL-Px2-HNU3復(fù)制小

20、菜粉蝶GV和用家蠶細(xì)胞 系Bm-21E-HNU5復(fù)制小菜蛾GV成功。,,3.2 顆粒體病毒(GV),5、GV的交叉感染現(xiàn)象,鱗翅目幼蟲可合并感染NPV和GV兩種病毒。如黃地老虎、菜粉蝶、粘蟲等可同時感染顆粒體病毒和NPV。粘蟲的六齡幼蟲如單感染NPV，死亡率3.4％，單感染顆粒體病毒，死亡率20%，如二種合并感染，則死亡率為80％，死體為NPV病征，體內(nèi)主要是核型多角體，也有些同時存在顆粒體。,,3 重要昆蟲病毒的概述,3.3

21、 質(zhì)型多角體病毒(CPV),·質(zhì)多角體病毒（cytoplasmic polyhedrosis virus，簡稱CPV）的發(fā)現(xiàn)比NPV和GV都要遲。日本蠶病學(xué)家石森直人早于1934年就觀察到家蠶的中腸上皮細(xì)胞內(nèi)存在有多角體，但當(dāng)時并未確定是由一種新型病毒引起的。·CPV可感染鱗翅目、雙翅目、膜翅目、鞘翅目、脈翅目5目昆蟲，但主要見于鱗翅目和雙翅目。,,3.3 質(zhì)型多角體病毒(CPV),1 BmCPV的包涵體形態(tài)，右下

22、為該包涵體的模式圖2 家蠶質(zhì)型CPV的包涵體形態(tài)，右上角為此包涵體的模式圖3 揚雪毒蛾CPV的多角體掃描電鏡圖像4 舞毒蛾CPV包涵體的掃描電鏡圖像,,1,2,3,4,CPV的一般形態(tài)特征:,其包涵體和NPV相似，也是多角體，但只在被感染細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)形成。質(zhì)型多角體呈六角形、四角形、球形、橢圓形等。CPV多角體因不同寄主而性狀不同，四角體－八角體，病毒粒子呈正20面體，直徑約60nm，表面有管狀突起其核酸是RNA，不同昆蟲CPV

23、的RNA含量不同。,,3.3 質(zhì)型多角體病毒(CPV),1、CPV的理化性狀,·不溶于水，但在水中經(jīng)較長時間可被蝕刻，而從表面失去粒子。·在堿液中的溶解度比NPV多角體的溶解度較小，如以稀Na2CO3液 或其他稀堿液處理，能失去表面病毒粒子，剩下不溶解的多角體， 呈多孔的海綿狀。·在堿液中很快被破壞，在從多角體中分離提純時須加注意。,,3.3 質(zhì)型多角體病毒(CPV),2、CPV的病理特

24、征,1、外部病征：發(fā)病初期病征不明顯，隨后昆蟲生長緩慢，體型縮小，且大小不成比例（頭大尾尖），毛長，有時半有體色變化（松毛蟲由黃綠色變?yōu)辄S色或白色），蟲尸體內(nèi)組織不液化解體，體壁不易破裂。蟲種不同，感染的齡期不同，病征有差異。一般經(jīng)7-20天死亡。2、侵染組織：CPV侵染寄主中腸柱狀上皮細(xì)胞，并在細(xì)胞質(zhì)中形成多角體。病毒入侵可分為三個階段：（1）病毒突起吸附于細(xì)胞表面；（2）突起埋入細(xì)胞表層；（3）纖維狀髓核被釋放入細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，在細(xì)胞表

25、面剩下空的病毒粒子。,,3.3 質(zhì)型多角體病毒(CPV),被CPV病毒感染致死的文山松毛蟲幼蟲,被CPV病毒感染的思茅松毛蟲幼蟲,被CPV病毒感染致死的馬尾松毛蟲幼蟲,,3.3 質(zhì)型多角體病毒(CPV),3、CPV的?；?通常認(rèn)為質(zhì)型多角體病毒只感染中腸上皮細(xì)胞。一般認(rèn)為其寄主專化的程度似較多數(shù)含DNA病毒者為低。往往能超科感染，從不同寄主所獲分離毒株也有同種的可能。,,3.4 煙芽夜蛾囊泡病毒3h株（HvAV-3h）,3.4 煙芽夜

26、蛾囊泡病毒3h株（HvAV-3h） 在分類上屬于囊泡病毒科，由采自湖南長沙的甜菜夜蛾體內(nèi)分離獲得，被囊泡病毒感染的甜菜夜蛾幼蟲體色發(fā)黃，取食能力急劇下降，無法將葉片啃食成蟲洞，僅在葉背面取食形成缺刻痕，感病血淋巴呈現(xiàn)乳白色，在顯微鏡下不能觀察到典型的血細(xì)胞，而是呈現(xiàn)數(shù)量巨大的圓形或橢圓形發(fā)亮小體，分散分布或聚集成簇。 HvAV-3h對甜菜夜蛾Spodoptera exigua 、斜紋夜蛾Spodoptera

27、litura、棉鈴蟲Helicoverpa armigera、煙青蟲Helicoverpa assulta 等宿主幼蟲具有高致病性。,HvAV-3h感染宿主幼蟲的癥狀及其血淋巴顯微形態(tài)學(xué)和顏色,,3.4 煙草夜蛾囊泡病毒3h株（HvAV-3h）,2、病毒粒子其病毒粒子呈腎形、尿囊狀或卵圓形，復(fù)合對稱具囊膜，長度200-400 nm，直徑約130 nm，由內(nèi)部顆粒與外部囊膜組成，對有機溶劑和去污劑敏感。負(fù)染觀察可見病毒粒子具有明顯的網(wǎng)

28、狀表象，其內(nèi)含環(huán)狀雙鏈DNA基因組。,A.典型泡囊病毒粒子模式圖，粒子由內(nèi)顆粒和外囊膜組成； B.煙芽夜蛾泡囊病毒3H (HvAV-3H)病毒粒子； C.病毒包涵體在細(xì)胞中的形成； D.釋放的病毒包涵體。紅色箭頭所示為（C）病毒包涵體及（D）成熟的病毒粒子。,,囊泡病毒細(xì)胞病理學(xué)假說—示主要階段,囊泡病毒感染宿主細(xì)胞，在細(xì)胞水平上觀察，始于細(xì)胞核的急劇增大，伴隨一系列的細(xì)胞核膜凹陷，細(xì)胞逐漸增大（一般會增大到健康細(xì)胞的5-10倍

29、）。隨著細(xì)胞核的繼續(xù)增大、內(nèi)陷，細(xì)胞膜、質(zhì)膜等宿主細(xì)胞原有結(jié)構(gòu)增大、內(nèi)陷的部分逐漸相互連接，將原宿主細(xì)胞割裂形成20-30個封閉的小室，成熟的病毒粒子被包含在這些小室中，形成直徑為5-10 µm的包埋有病毒粒子的囊泡，也稱病毒囊泡。上述病毒囊泡形成的過程在所有囊泡病毒感染中均有發(fā)生，但是在不同囊泡病毒中，這些過程也有一些區(qū)別。,3.4 煙草夜蛾囊泡病毒3h株（HvAV-3h）,,寄生蜂 - 宿主 - 病毒系統(tǒng)包含兩個循環(huán)：Hv

30、AV-3h的生命周期和寄生蜂的生命周期,病毒的傳播：在野外環(huán)境下，作為極度依賴于寄生蜂傳播的鱗翅目幼蟲專性寄生、慢性致死性病毒，囊泡病毒通常由雌性寄生蜂攜帶，通過雌蜂的產(chǎn)卵行為在鱗翅目幼蟲個體間傳播。,3.4 煙草夜蛾囊泡病毒3h株（HvAV-3h）,,3.4 煙草夜蛾囊泡病毒3h株（HvAV-3h）,Daily food intake of S. exigua larvae inoculated by min-pin injecti

31、on. (A) Third-instar larvae. (B) Fourth-instar larvae.,Daily body weight of S. exigua larvae inoculated by min-pin injection. (A) Third-instar larvae. (B) Fourth-instar larvae.,Survival curves of S. ex

32、igua larvae inoculated by min-pin injection. (A) Third-instar larvae. (B) Fourth-instar larvae. (C) Fifth-instar larvae,,4 昆蟲病毒的生產(chǎn),病毒為專性寄生病原，不能在人工培養(yǎng)基上生產(chǎn)，只能在寄主昆蟲活體或活細(xì)胞系中增殖。,4.1 在昆蟲活體中大量增殖昆蟲病毒,3種途徑：&#

33、183;直接在自然種群中繁殖 ·從野外采回大量活蟲接種繁殖 ·在室內(nèi)條件下飼育大量害蟲接種繁殖 可采用自然飼料或人工飼料。近年來，各種類型的昆蟲病毒包括NPV、CPV、GV和昆蟲痘病毒等通過人工飼料飼育昆蟲而增殖均獲得較好的成效。,,4 昆蟲病毒的生產(chǎn),（一）在昆蟲活體中增殖病毒（因地制宜） 1、野外噴灑收集法 選擇有力時機利用林間高蟲口區(qū)噴灑病毒，讓病毒在害蟲自然種群中繁殖，造成流行病，結(jié)

34、合害蟲防治，采集病死蟲。,病毒林間生產(chǎn)工藝：,,4 昆蟲病毒的生產(chǎn),2、從野外采集大量活蟲接種繁殖，在自然條件和室內(nèi)飼養(yǎng)接種。在林間用塑料薄膜圍欄飼養(yǎng)馬尾松毛蟲，每圍投放5000-6000頭3-5齡幼蟲，接種濃度為2.0×106 PIB/ml,接毒3次，感染后18-20天收集死蟲，平均每蟲復(fù)制量為1.6-3.8億多角體；在林間套籠5-6齡馬尾松毛蟲品均每蟲產(chǎn)4.24億多角體。,我國松毛蟲CPV的生產(chǎn),松毛蟲CPV的加工,松毛

35、蟲CPV的加工,,4 昆蟲病毒的生產(chǎn),松毛蟲CPV在我國的使用面積超過2萬ha，廣東應(yīng)用馬尾松毛蟲CPV防治面積達(dá)2600ha，殺蟲率在70％以上，持效5-6年。云南利用松毛蟲CPV防治文山松毛和云南松毛蟲930ha，當(dāng)代防效70.4-91.5％。,,4 昆蟲病毒的生產(chǎn),3、在室內(nèi)飼養(yǎng)大量害蟲接種病毒。采用自然飼料或人工飼料飼養(yǎng)昆蟲生產(chǎn)NPV、CPV、GV。人工飼料用于病毒生產(chǎn)，可以不受飼料植物生長季節(jié)的限制，為病毒生產(chǎn)的工廠化、機

36、械化、自動化創(chuàng)造條件；可以相對節(jié)省植物栽培和昆蟲飼養(yǎng)的勞動力；同時人工飼料還可以滅菌消毒，避免其他微生物對病毒產(chǎn)品的污染。,舞毒蛾NPV的生產(chǎn),病毒工廠化生產(chǎn)工藝：,,4 昆蟲病毒的生產(chǎn),4.2 在細(xì)胞系中大量增殖昆蟲病毒,用組織培養(yǎng)增殖的病毒在致病性、專化性及其他特性方面有無變異，尚待進一步研究。同時，因組織培養(yǎng)法要求條件較嚴(yán)格，大量增殖病毒還存在不少問題，目前尚未達(dá)到實用階段。,,4 昆蟲病毒的生產(chǎn),生物導(dǎo)彈防治技術(shù),基本原理:

37、 “生物導(dǎo)彈”治蟲是以昆蟲病毒流行病學(xué)為理論基礎(chǔ)，以卵寄生蜂為媒介傳遞病毒，使初孵幼蟲罹病，在靶標(biāo)害蟲中形成病毒二次感染，誘導(dǎo)病毒病流行達(dá)到控制害蟲的目的。如使赤眼蜂攜帶松毛蟲CPV，使松毛蟲卵表感染CPV，幼蟲孵化后取食卵殼而感染。,,4 昆蟲病毒的生產(chǎn),卵寄生蜂傳毒殺蟲示意圖,,4 昆蟲病毒的生產(chǎn),,4 昆蟲病毒的生產(chǎn),,5.1 影響病毒防治害蟲效果的環(huán)境因素,· 溫度 溫度可影響發(fā)病潛伏期的長短，NPV和CPV

38、等的傳播適溫約 為25℃，如將溫度從15℃提高到32℃，可減少棉鈴蟲 NPV對該蟲 的LT50從9到2～3天，減少LT80從29到11天。· 光線 紫外線對病毒的致病力有影響。在田間條件下，特別是用飛 機噴灑病毒懸液的情況下，日光照射能影響制劑的效果。室內(nèi)試 驗距紫外線源5cm，5min可使實夜蛾屬(Heliothis)的NPV全部失活， 可使粉紋夜蛾

39、的NPV在2h內(nèi)全部失效。田間GV制劑在日光暴曬的 甘藍(lán)葉面經(jīng)12～19h全部失效。昆蟲病毒制劑在田間的失效與日 光特別是紫外線的關(guān)系最大。制劑中加用紫外線保護劑或其他輔 劑可延長滯留而有助于增效。,pH和土壤 病毒的活性與其繁殖環(huán)境的pH有關(guān)，實夜蛾屬的NPV在pH為2時經(jīng)30min或pH為12時經(jīng)24h活性大減。棉鈴蟲的NPV最好保存在pH為7的條件下。 病毒在土壤中有相當(dāng)高的穩(wěn)定性，施于土壤內(nèi)的NP

40、V制劑在231周內(nèi)數(shù)量可無減少，粉紋夜蛾的NPV在土壤內(nèi)可保持活性達(dá)5年之久，不受雨水沖刷的影響，也不受正常pH和微生物分解作用的影響。因此，土壤成為這類病毒的貯存源，并可污染作物葉面，引起害蟲種群內(nèi)病毒病的流行。,,5.1 影響病毒防治害蟲效果的環(huán)境因素,,5.2 應(yīng)用昆蟲病毒防治害蟲的現(xiàn)狀,· 利用病毒防治害蟲一方面可以起到微生物殺蟲劑的短期防治作用， 另一方面使用后有可能使病毒長期存在于農(nóng)林

41、生態(tài)系中，作為一類 被引入的生態(tài)因子而起調(diào)節(jié)害蟲種群密度的作用。·常規(guī)方法施用或釋放帶毒昆蟲散布一定限量的病毒后，病原可在昆蟲種群 間自行傳播。毒餌劑和散布帶毒蟲體具有較高的經(jīng)卵傳播的潛力，其他 昆蟲或寄生物和捕食者有機械傳播病毒的潛能。,,5.1 局限性,昆蟲病毒對害蟲的防治也有其局限性，如感染的潛伏期較長，一般從感染到致死需7～14天或更長時間，由于?；暂^強，殺蟲譜性較窄。如僅用于短