柑橘病理學(xué)

1、柑橘碎葉病柑橘碎葉病摘要：本文先從柑橘碎葉病的發(fā)生概況，傳播途徑，危害癥狀以及防治方法等一些宏觀方面進(jìn)行概述。然后再?gòu)奈⒂^方面寫(xiě)引起柑橘碎葉病的病毒及其檢測(cè)方法。關(guān)鍵詞：碎葉病危害癥狀防治方法檢測(cè)柑橘碎葉病(Tatterleaf)于1962年在美國(guó)加利福尼亞的北京來(lái)檬上首先發(fā)現(xiàn)。受感染的北京來(lái)檬不表現(xiàn)癥狀，但嫁接接種于厚皮檸檬時(shí)，新葉上出現(xiàn)葉片扭曲、葉緣殘缺呈破碎因而得名。報(bào)道有碎葉病的國(guó)家，除美國(guó)外，還有南非、澳大利亞、日本、菲律賓和

2、韓國(guó)。1.1.概況概況在國(guó)內(nèi)，1984年臺(tái)灣首先報(bào)道、蕉柑和柳橙感染柑橘碎葉病毒，后又發(fā)現(xiàn)默科特、溫州蜜柑、華盛頓臍橙、無(wú)酸甜橙、和葡萄柚亦受感染。浙江黃巖的本地早、少核本地早、槾橘、早橘、朱紅、乳橘、北京來(lái)檬、興津溫州蜜柑及溫州的柳橙等10個(gè)品種的枳砧或枸頭橙砧的植株都感染碎葉病毒。四川重慶江北農(nóng)場(chǎng)的北京來(lái)檬，國(guó)家果樹(shù)種質(zhì)重慶柑橘圃的蕉柑、柱柑、五布紅心柚、古老錢沙田柚、相橘、冰糖橙、蒔橘等受碎葉病感染。廣西柳州的蕉柑、新會(huì)橙、暗柳橙

3、、柱柑，廣東的楊村新會(huì)橙、汕頭蕉柑，福建漳州的槿柑，湖南的冰糖橙和大紅甜橙以及湖北的黃陵無(wú)核橙等亦受柑橘碎葉病毒的侵染。它主要危害以枳和枳橙作砧木的柑橘樹(shù)，引起植株黃化、衰弱，甚至整株枯死。2.2.傳播途徑傳播途徑2.12.1通過(guò)嫁接傳病毒通過(guò)嫁接傳病毒據(jù)報(bào)道，用帶碎葉病毒的北京來(lái)檬嫁接接種在以臘斯克枳橙、特洛亞枳橙、卡里佐枳橙和枳作砧木的甜橙上，會(huì)引起接合部腫大，樹(shù)體矮化衰弱。2.22.2通過(guò)受污染的刀剪傳播通過(guò)受污染的刀剪傳播據(jù)報(bào)道

4、，通過(guò)污染的刀剪在香櫞之間傳病，傳毒率達(dá)92%以上。2.32.3通過(guò)菟絲子從長(zhǎng)春花傳到枳橙通過(guò)菟絲子從長(zhǎng)春花傳到枳橙3.3.危害癥狀危害癥狀3.13.1以枳及枳橙作砧的柑橘植株染病后砧穗接合部環(huán)縊靠近接口的接穗部腫大。剝開(kāi)接合部樹(shù)皮，可見(jiàn)接穗與砧木間的木質(zhì)部有一圈縊縮線，受強(qiáng)風(fēng)等外力推動(dòng)，病樹(shù)砧穗接合處易斷裂，裂面光滑。3.23.2在葉片出現(xiàn)黃色透明斑點(diǎn)，圓形或不規(guī)則形，葉片邊緣缺損葉片畸形且葉脈透明。3.33.3在莖上首先出現(xiàn)水漬狀的

5、縱向溝條，后變成黃白色條斑，稍凹陷，剝開(kāi)黃斑處的樹(shù)皮，莖的木質(zhì)部沒(méi)有凹陷，有時(shí)條斑聯(lián)合成斑塊，枝條彎曲。3.43.4地上部黃化、落葉。植株生長(zhǎng)衰弱、矮化、結(jié)果很少，甚至枯死。4.4.防治方法防治方法離子lμL.，10mmol／L引物1μL.，cDNAlμL.，TaqDNA聚合酶004u／μL.，用滅菌的雙蒸餾水補(bǔ)足25μL.。[1]6.3.26.3.2多重多重PCRPCR反應(yīng)體系反應(yīng)體系[3]dNTPs的濃度提高到05mmol／L，鎂離

6、子設(shè)7個(gè)處理(15、20、25、30、35、40、45mmol／L)，Hot—starTaq酶01U／μL.，病毒特異引物03lamol／L。反應(yīng)程序：94℃預(yù)變性3min；940C變性30s，60℃退火30s，72℃延伸lmin，35個(gè)循環(huán)，最后一個(gè)循環(huán)72℃延伸10min。所用PCR試劑購(gòu)于北京天為時(shí)代生物技術(shù)有限公司。PCR均在PTC100，MJ—ResearchINCPCR擴(kuò)增儀上進(jìn)行。[1]6.4PCR6.4PCR產(chǎn)物的檢測(cè)分

7、析和測(cè)序產(chǎn)物的檢測(cè)分析和測(cè)序PCR產(chǎn)物的電泳分析：1TBE電泳緩沖液，25％瓊脂糖凝膠(含EB05斗g／mL)，5L上樣，100v穩(wěn)壓電泳至譜帶完全分開(kāi)。在BIOIMAGINGSYSTEM觀察結(jié)果。PCR產(chǎn)物測(cè)序由上海鼎安生物科技有限公司完成。[1]參考文獻(xiàn)[1]肖遠(yuǎn)輝曾繼吾張秋明周碧容.2007.柑橘衰退病、裂皮病和碎葉病的多重RTPCR檢測(cè)方法研究.植物病理學(xué)報(bào)37(1)：3135.[2]張?zhí)祉稻幹?2000.柑桔病毒病.中國(guó)農(nóng)業(yè)出