2015版藥典二部附錄

1、《中國(guó)藥典》,2015年版主要增修訂內(nèi)容匯編（四部）,本版藥典對(duì)各部藥典共性附錄進(jìn)行整合，將原附錄更名為通則，包括制劑通則、檢定方法、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、試液試藥和指導(dǎo)原則。重新建立規(guī)范的編碼體系，并將藥典通則、藥用輔料單獨(dú)作為《中國(guó)藥典》四部。 本匯編提供《中國(guó)藥典》四部增修訂有關(guān)內(nèi)容包括制劑通則38個(gè)，檢定方法114個(gè)、藥用輔料修訂該品種97個(gè)、指導(dǎo)原則29個(gè)。,0502 薄層色譜法,定義：薄層色譜法系將供試品溶液點(diǎn)于薄層板上，

2、在展開(kāi)容器內(nèi)用展開(kāi)劑展開(kāi)，使供試品所含成分分離，所得色譜圖與適宜的對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)按同法所得的色譜圖對(duì)比，亦可用薄層色譜掃描儀進(jìn)行掃描，用于鑒別、檢查或含量測(cè)定。,將一部二部中對(duì)照物修訂為對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),,市售薄層板---補(bǔ)充分類(lèi)信息 市售薄層板按固定相種類(lèi)分為硅膠薄層板、聚酰胺薄層板、氧化鋁薄層板等；按固定相粒徑大小分為普通薄層板板（10~40um）和高效薄層板（5~10um）；按硅膠板是否含有熒光劑分為硅膠G板和硅膠GF254板。

3、基本同一部，刪除二部顯色劑部分。點(diǎn)樣------基本同一部，點(diǎn)樣點(diǎn)由直徑一般不大于4mm（原為3mm）。,0512高效液相色譜法,高效液相色譜法系采用高壓輸液泵將規(guī)定的流動(dòng)相泵入裝有填充劑的色譜柱，對(duì)供試品進(jìn)行分離測(cè)定的色譜方法。注入的物質(zhì)（原為供試品），由流動(dòng)相帶入色譜柱（原為柱內(nèi)）中，組分在柱內(nèi)分離，并進(jìn)入檢測(cè)器檢測(cè)，由積分儀或數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄和處理色譜信號(hào)。,對(duì)儀器的一般要求和色譜條件： 高效液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣器

4、、色譜柱、檢測(cè)器、積分儀或數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。色譜柱內(nèi)徑一般為3.9~4.6nm，填充劑粒徑為3~10um。超高效液相色譜儀是適應(yīng)小內(nèi)經(jīng)（約2mm或更?。┥V柱與小粒徑（約2um）填充劑的耐超高壓、小進(jìn)樣量、低死體積、高靈敏度檢測(cè)的高效液相色譜儀。,溫度會(huì)影響分離效果，品種正文中未指明色譜柱溫度時(shí)系指室溫，應(yīng)注意室溫變化的影響。為改善分離效果可適當(dāng)提高色譜柱的溫度，但還不宜超過(guò)60℃。品種正文項(xiàng)下規(guī)定的條件除填充劑類(lèi)型、流動(dòng)相組分、檢測(cè)

5、器類(lèi)型不得改變外，其余如色譜柱內(nèi)徑與長(zhǎng)度、填充劑粒徑、流動(dòng)相流速、流動(dòng)相組分比例、柱溫、進(jìn)樣量、檢測(cè)器靈敏度等，均可適當(dāng)改變，以達(dá)到系統(tǒng)適用性的要求。,調(diào)整流動(dòng)相組分比例時(shí)，當(dāng)小比例組分的百分比例X小于等于33%時(shí)，允許改變范圍為0.7X~1.3X; 當(dāng)X大于33%時(shí)，允許改變范圍為X-10~X+10。當(dāng)必須使用特定牌號(hào)的色譜柱方能滿(mǎn)足分離要求時(shí)，可在該品種正文項(xiàng)下注明。色譜系統(tǒng)的適用性試驗(yàn)通常包括理論板數(shù)、分離度、靈敏度（新增）

6、、拖尾因子和重復(fù)性等五個(gè)參數(shù)。,0541 電泳法,電泳是指溶解或懸浮于電解液中的帶電荷的蛋白質(zhì)、膠體、大分子或其他粒子，在電流作用下向其自身所帶電荷相反的電極方向遷移。電泳法是指利用溶液中帶有不同量電荷的陽(yáng)離子或陰離子，在外加電場(chǎng)中使供試品組分以不同的遷移速度向?qū)?yīng)的電極移動(dòng)，實(shí)現(xiàn)分離并通過(guò)適宜的檢測(cè)方法記錄或計(jì)算，達(dá)到測(cè)定目的的分析方法。電泳法一般可分為兩大類(lèi)：一類(lèi)為自由溶液電泳或移動(dòng)界面電泳，另一類(lèi)為區(qū)帶電泳。,第一法：紙電泳法

7、,濾紙：取色譜紙置1mol/l甲酸溶液中浸泡不少于12小時(shí)（原為浸泡過(guò)夜），取出，用水漂洗至洗液的PH值不低于4，置60℃烘箱烘干，備用。第二法：醋酸纖維素薄膜電泳法第三法：瓊脂糖凝膠電泳法（適用于檢測(cè)DNA,PCR反應(yīng)中的電泳檢測(cè)）,第四法：聚丙烯酰胺凝膠電泳法,定義：聚丙烯酰胺凝膠電泳法以聚丙烯酰胺凝膠為支持介質(zhì)。聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺單體和少量的交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺，在催化劑作用下聚合交聯(lián)而成的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠。單體的濃

8、度或單體與交聯(lián)劑比例的不同，其凝膠孔徑就不同。,使用聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質(zhì)進(jìn)行電泳，生物大分子保持天然狀態(tài)，其遷移速率不僅取決于電荷密度，還取決于分子大小和形狀，可以用來(lái)研究生物大分子的特性，如電荷、分子量、等電點(diǎn)等。根據(jù)儀器裝置的不同分為水平平板電泳、垂直平板電泳和盤(pán)狀電泳，根據(jù)制膠方式的不同又分為連續(xù)電泳和不連續(xù)電泳。,第五法：SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法,電泳： 垂直電泳：恒壓電泳，初始電壓為80v，進(jìn)入分離膠時(shí)調(diào)至150~2

9、00v，當(dāng)溴酚藍(lán)遷移至膠底處，停止電泳?；蚝懔麟娪荆院懔?0mA條件下開(kāi)始電泳，至供試品溶液進(jìn)入分離膠后將電流調(diào)至20mA，直至電泳結(jié)束。圓盤(pán)電泳：調(diào)節(jié)電流使每管8mA。,第六法：等電聚焦電泳法,方法1-----垂直板電泳 供試品溶液制備：將供試品對(duì)水透析（或用其他方法）脫鹽后，與供試品緩沖液按3:1體積比混勻。供試品溶液最終濃度應(yīng)不低于0.5mg/ml或按照品種項(xiàng)下的方法制備。方法2-----水平板電泳 供試品

10、溶液的制備：將供試品對(duì)水透析（或用其他方法）脫鹽，并使蛋白質(zhì)或多肽含量調(diào)節(jié)在每0.5~5mg/ml范圍或按照各品種項(xiàng)下的方法制備。,0612熔點(diǎn)測(cè)定法,第一法 測(cè)定易粉碎的固體藥品（在原有基上新增一個(gè)方法） B.電熱塊空氣加熱法 ：本法是采用自動(dòng)熔點(diǎn)儀的熔點(diǎn)測(cè)定法。自動(dòng)熔點(diǎn)儀有兩種測(cè)光方式：透射光方式和反射光方式。大部分自動(dòng)熔點(diǎn)儀可置多根毛細(xì)管同時(shí)測(cè)定。分取經(jīng)干燥處理（同第一法）的供試品適量，置熔點(diǎn)測(cè)定用毛細(xì)管中（同第一

11、法）；將自動(dòng)熔點(diǎn)儀加熱塊加熱至較規(guī)定的熔點(diǎn)低限約10℃時(shí)，將裝有供試品的毛細(xì)管插入加熱塊中，繼續(xù)加熱，調(diào)節(jié)升溫速率為每分鐘上升1.0~1.5 ℃，重復(fù)測(cè)定3次，取其平均值，即得。,,測(cè)定熔融同時(shí)分解的供試品時(shí)，方法如上述，但調(diào)節(jié)升溫速率使每分鐘上升2.5~3.0 ℃。遇有色粉末、熔融同時(shí)分解、固相消失不明顯且生成分解物導(dǎo)致體積膨脹、或含結(jié)晶水（或結(jié)晶溶劑）的供試品時(shí)，可適當(dāng)調(diào)整儀器參數(shù)，提高判斷熔點(diǎn)變化的準(zhǔn)確性。當(dāng)透射和反射測(cè)光方式受干

12、擾明顯時(shí)，可允許目視觀察熔點(diǎn)變化；通過(guò)攝像系統(tǒng)記錄熔化過(guò)程并進(jìn)行追溯評(píng)估，必要時(shí)，測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性需經(jīng)第一法驗(yàn)證。若對(duì)本法持有異議，應(yīng)以第一法測(cè)定結(jié)果為準(zhǔn)。,0731 蛋白質(zhì)含量測(cè)定,二部為底稿，結(jié)合三部?jī)?nèi)容整合修訂。對(duì)照品溶液制備：除另有規(guī)定外，取血清白蛋白（牛）對(duì)照品或蛋白含量測(cè)定國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品，加水溶解并制成每1ml中含0.2mg的溶液。（2015版藥典內(nèi)容與2010版藥典二部中相同，2010版藥典三部中標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液的制備中標(biāo)準(zhǔn)

13、蛋白質(zhì)溶液的濃度為每1ml含100ug）,測(cè)定法：精密量取對(duì)照品溶液0.0ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml（對(duì)照品溶液取用量可在本法測(cè)定范圍內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整），分別置具塞試管中，各加水至1.0ml，在分別加入堿性銅試液1.0ml，搖勻，室溫放置10min，個(gè)各加入福林酚試液【取福林試液中的貯備液（2mol/L酸濃度）1 → 16】4.0ml，立即混勻，室溫放置30min，照紫外—可見(jiàn)分光光度法（通則0401

14、），在650nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度；同時(shí)以0號(hào)管作為空白。,以對(duì)照品溶液濃度與其相對(duì)應(yīng)的吸光度計(jì)算線(xiàn)性回歸方程。另精密量取供試品溶液適量，同法測(cè)定。從線(xiàn)性回歸方程計(jì)算供試品溶液中的蛋白質(zhì)濃度，并乘以稀釋倍數(shù)，即得。,0901溶液顏色檢查法,第一法（規(guī)范描述）除另有規(guī)定外，取各品種項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解，置于25ml的納氏比色管中，加水稀釋至10ml。另取規(guī)定色調(diào)和色號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)比色液10ml，置于另一25ml納氏比色管中，兩管同置白色

15、背景上，自上向下透視，或同置白色背景前，平視觀察，供試品管呈現(xiàn)的顏色與對(duì)照管比較，不得更深。如供試品管呈現(xiàn)的顏色與對(duì)照管的顏色深淺非常接近或色調(diào)不完全一致，使目視觀察無(wú)法辨別兩者的深淺時(shí)，應(yīng)改用第三法（色差計(jì)法）測(cè)定，并將其測(cè)定結(jié)果作為判定依據(jù)。,各種色調(diào)色號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液的制備-新增0.5號(hào)色調(diào)標(biāo)準(zhǔn)比色液,品種項(xiàng)下規(guī)定的“無(wú)色”：系指供試品溶液與水或所用溶劑的顏色相同；“幾乎無(wú)色”：系指供試品溶液的顏色不深于相應(yīng)色調(diào)0.5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液

16、。【原定義為淺于用水稀釋1倍后的相應(yīng)色調(diào)1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液】,0902 澄清度檢查法,第一法：目視法 除另有規(guī)定外，按各品種項(xiàng)下規(guī)定的濃度要求，在室溫條件下將用水稀釋至一定濃度的供試品溶液與等量的濁度標(biāo)準(zhǔn)液分別置于配對(duì)的比濁用玻璃管（內(nèi)徑15~16mm，平底，具塞，以無(wú)色、透明、中性硬質(zhì)玻璃制成）中，在濁度標(biāo)準(zhǔn)液制備5min后，在暗室內(nèi)垂直同置于傘棚燈下，照度為1000lx，從水平方向觀察、比較，除另有規(guī)定外，供試品溶解后應(yīng)立即檢視

17、。 第一法無(wú)法準(zhǔn)確判定兩者的澄清度差異時(shí)，改用第二法進(jìn)行測(cè)定并以其測(cè)定結(jié)果進(jìn)行判斷。,第二法：濁度儀法【新增】本法采用散射光式濁度儀，適用于低、中濁度無(wú)色供試品溶液的濁度測(cè)定（濁度值為100NTU以下的供試品）。因?yàn)楦邼岫鹊墓┰嚻窌?huì)造成多次散射現(xiàn)象，使散射光強(qiáng)度迅速下降，導(dǎo)致散射光強(qiáng)度不能正確反映供試品的濁度值。0.5號(hào)至4號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液的濁度值范圍約為0~40NTU。,采用散射光式濁度儀測(cè)定時(shí)，入射光和測(cè)定的散射光呈90度夾角

18、，入射光強(qiáng)度和散射光強(qiáng)度關(guān)系式為Ⅰ =K’ T Ⅰ0；式中Ⅰ為散射光強(qiáng)度，單位為cd； Ⅰ0為入射光強(qiáng)度，單位為cd；K’為散射系數(shù)；T為供試品溶液的濁度值，單位為NTU.,系統(tǒng)的適用性試驗(yàn)：儀器應(yīng)定期（一般每月一次）對(duì)濁度標(biāo)準(zhǔn)液的線(xiàn)性和重復(fù)性進(jìn)行考察，采用0.5號(hào)至4號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行濁度值測(cè)定，濁度標(biāo)準(zhǔn)液的測(cè)定結(jié)果（單位NTU）與濃度間應(yīng)呈線(xiàn)性關(guān)系，線(xiàn)性方程的相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于0.999；取0.5號(hào)至4號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液，重復(fù)測(cè)定5次

19、，0.5號(hào)和1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液測(cè)量濁度值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于5%，2~4號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液測(cè)量濁度值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不大于2%。,測(cè)定法：按儀器說(shuō)明書(shū)要求采用規(guī)定的濁度液進(jìn)行儀器校正。溶液劑直接取樣測(cè)定；原料藥或其他劑型按照個(gè)論項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定制備標(biāo)準(zhǔn)供試品溶液，臨用時(shí)制備。分別取供試品溶液和相應(yīng)濁度標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定前應(yīng)搖勻，避免產(chǎn)生氣泡，讀取濁度值。供試品溶液濁度值不得大于相應(yīng)濁度標(biāo)準(zhǔn)液的濁度值。,0904可見(jiàn)異物檢查法,一二三部整合結(jié)果判定

20、：供試品中不得檢出金屬屑、玻璃屑、長(zhǎng)度超過(guò)2mm的纖維、最大粒徑超過(guò)2mm的塊狀物以及靜置一定時(shí)間后輕輕旋轉(zhuǎn)時(shí)肉眼可見(jiàn)的煙霧狀微粒沉積物、無(wú)法計(jì)數(shù)的微粒群或搖不散的沉淀，以及在規(guī)定時(shí)間內(nèi)較難計(jì)數(shù)的蛋白質(zhì)絮狀物等明顯可見(jiàn)異物。,0921 崩解時(shí)限檢查法-整合,檢查法：將吊籃通過(guò)上端的不銹鋼軸懸掛于金屬支架上，浸入1000ml燒杯中，并調(diào)節(jié)吊籃位置使其下降至低點(diǎn)時(shí)篩網(wǎng)距燒杯底部25mm，燒杯內(nèi)盛有溫度為37℃±1 ℃的水，調(diào)節(jié)水位

21、高度使吊籃上升至高點(diǎn)使篩網(wǎng)在水面下15mm處，吊籃頂部不可浸沒(méi)于溶液中。,0931溶出度與釋放度測(cè)定法,將二部中溶出度測(cè)定法和釋放度測(cè)定法整合為一個(gè)方法，增加部分裝置圖。定義：溶出度系指活性藥物從片劑、膠囊劑或顆粒劑等普通制劑在規(guī)定條件下溶出的速率和程度，在緩釋制劑、控釋制劑、腸溶制劑及透皮貼劑等制劑中也稱(chēng)釋放度。,0941含量均勻度檢查法,除另有規(guī)定外，片劑、硬膠囊劑、顆粒劑或散劑等，每一個(gè)單劑標(biāo)示量小于25mg或主藥含量小于每一個(gè)

22、單劑重量25%者；藥物間或藥物與輔料間采用混粉工藝制成的注射用無(wú)菌粉末；內(nèi)充非均相溶液的軟膠囊；單劑量包裝的口服混懸劑、透皮貼劑和栓劑等制劑通則項(xiàng)下規(guī)定含量均勻度應(yīng)符合要求的制劑，均應(yīng)檢查含量均勻度。,復(fù)方制劑僅檢查符合上述條件的組分，多種維生素或微量元素一般不檢查含量均勻度。凡檢查含量均勻度的制劑，一般不再檢查重（裝）量差異；當(dāng)全部主成分均進(jìn)行含量均勻度檢查時(shí)，復(fù)方制劑一般亦不再檢查重（裝）量差異。,除另有規(guī)定外，取供試品10個(gè)，照

23、各品種項(xiàng)下規(guī)定的方法，分別測(cè)定每一個(gè)單劑以標(biāo)示量為100的相對(duì)含量Xi，求其均值 和標(biāo)準(zhǔn)差以及標(biāo)示量與均值之差的絕對(duì)值A(chǔ)(A=|100- |)若A+2.2S≤L,(原為A+1.80S)則供試品的含量均勻度符合規(guī)定；若A+S>L,則不符合規(guī)定；若A+2.2S>L,且A+SL ≤L,則應(yīng)另取供試品20個(gè)復(fù)試。,根據(jù)初復(fù)試結(jié)果，計(jì)算30個(gè)單劑的均值X、標(biāo)準(zhǔn)差S和標(biāo)示量與均值之差的絕對(duì)值A(chǔ)，再按下述公式計(jì)算并判定。當(dāng)

24、A ≤0.25L時(shí)，若A2+S2 ≤0.25L2，則供試品的含量均勻度符合規(guī)定；若A2+S2 >0.25L2則不符合規(guī)定。若A>0.25L時(shí)，若A+1.7S ≤L,則符合規(guī)定； 若A+1.7S >L，則不符合規(guī)定。,上述公式中L為規(guī)定值。除另有規(guī)定外，L=15.0;單劑量包裝的口服混懸劑、內(nèi)充非均相溶液的軟膠囊、膠囊型或粉霧劑、單劑量包裝的眼用、耳用、鼻用混懸劑、固體或半固體制劑L=20.0;透皮貼劑、栓劑L=

25、25.0。,當(dāng)各品種項(xiàng)下規(guī)定的含量均勻度的限度為±20%或其他數(shù)值時(shí)，L=20.0或其他相應(yīng)的數(shù)值。當(dāng)各品種項(xiàng)下含量限度規(guī)定的上下限的平均值（T）大于100.0（%）時(shí)，若XT,則A= -T.同上法計(jì)算，判定結(jié)果，即得。當(dāng)T<100.0(%)時(shí)，應(yīng)在各品種正文中規(guī)定A的計(jì)算方法。,1143 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法,前言（規(guī)范表述）：當(dāng)測(cè)定結(jié)果有爭(zhēng)議時(shí)，除另有規(guī)定外，以凝膠限度試驗(yàn)結(jié)果為準(zhǔn)。本試驗(yàn)操作過(guò)程應(yīng)防止內(nèi)毒素