三氧化二砷誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡過程中IκB-α，核因子-κB蛋白表達(dá)的研究.pdf

1、自70年代以來,中國學(xué)者率先發(fā)現(xiàn)三氧化二砷(As<,2>O<,3>)靜脈滴注可有效治療急性早幼粒細(xì)胞性白血病(acute promyelocytic leukemia,APL),取得了極高的臨床緩解率,目前也開始用于慢性粒細(xì)胞性白血病以及其他類型白血病的臨床治療,其對白血病的作用機(jī)制主要是誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡和促進(jìn)分化.材料與方法:K562細(xì)胞,K562/ADR細(xì)胞由浙江大學(xué)腫瘤研究所提供,U937細(xì)胞由浙江大學(xué)血液病研究所提供.實(shí)驗(yàn)共設(shè)

2、三氧化二砷實(shí)驗(yàn)組、空白對照組及陰性對照組,三氧化二砷的實(shí)驗(yàn)用濃度范圍1~16μM,監(jiān)測時間點(diǎn)選擇24小時.我們以MTT法測定三氧化二砷對K562、K562/ADR、U937細(xì)胞的增殖抑制作用,并求得其24小時的半數(shù)抑制濃度(IC<,50>).用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)測定三氧化二砷對三種細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡作用,間接熒光法測定細(xì)胞漿內(nèi)IκB-α蛋白的變化,并用Western印跡法分別檢測了三種細(xì)胞胞漿內(nèi)IκB-α蛋白和胞核內(nèi)P65蛋白表達(dá).結(jié)論:

3、1.三氧化二砷對K562,K562/ADR,U937細(xì)胞均有不同程度的增殖抑制作用,增殖抑制率和凋亡誘導(dǎo)率均表現(xiàn)為K562細(xì)胞>U937細(xì)胞>K562/ADR細(xì)胞,說明其增殖抑制作用與誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡有關(guān).2.三氧化二砷對無NF-κB組成性激活的K562細(xì)胞可以增加胞核內(nèi)P65亞基的表達(dá),對有組成性激活的U937細(xì)胞可以抑制胞核內(nèi)P65亞基的表達(dá),而對由藥物誘導(dǎo)產(chǎn)生組成性激活的K562/ADR細(xì)胞的胞核內(nèi)P65亞基的表達(dá)無影響.所以NF-κ