紫蛇尾(Ophiopholis mirabilis)多糖的提取、純化及生物活性研究.pdf

1、本論文以黃渤海交界處長(zhǎng)島海域的紫蛇尾作為實(shí)驗(yàn)材料,采用正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)化了紫蛇尾多糖的提取工藝,測(cè)定了紫蛇尾粗多糖的脫蛋白工藝,并對(duì)紫蛇尾多糖理化性質(zhì)進(jìn)行了測(cè)定,研究了紫蛇尾多糖的分離純化,以及紫蛇尾粗多糖的部分生物活性,包括:抑菌活性,抗氧化活性以及對(duì)心肌細(xì)胞的保護(hù)作用,為紫蛇尾資源的開(kāi)發(fā)利用提供必要的理論依據(jù)。
　　采用L9(34)正交實(shí)驗(yàn)法,以多糖產(chǎn)率為指標(biāo),研究提取溫度、提取時(shí)間、料液比、提取次數(shù)4個(gè)因素對(duì)提取工藝的影響。以正

2、交實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果為條件建立多元線(xiàn)性模型,結(jié)果表明:對(duì)紫蛇尾多糖得率影響最大的因素是溫度,其次是提取次數(shù)、提取時(shí)間和料水質(zhì)量比。本實(shí)驗(yàn)得出的最佳提取工藝條件為:料水質(zhì)量比1∶20,溫度70℃,提取時(shí)間4h,提取次數(shù)4次。結(jié)果可信,說(shuō)明紫蛇尾多糖的產(chǎn)率和提取工藝相關(guān)因素有顯著的相關(guān)關(guān)系。
　　采用實(shí)驗(yàn)中常用的Sevag法,酶法,以及酶-Sevag法聯(lián)用三種方法,進(jìn)行脫蛋白比較。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,酶-Sevag法聯(lián)用是脫除紫蛇尾中粗多糖中蛋

3、白質(zhì)最為有效的方法。
　　采用傳統(tǒng)的水提和堿提法得到兩種紫蛇尾多糖粗品,測(cè)定這兩種紫蛇尾粗多糖的的部分常規(guī)理化性質(zhì),并對(duì)其進(jìn)行分離純化。
　　采用改進(jìn)的平板菌落計(jì)數(shù)法測(cè)定紫蛇尾粗多糖是否具有抑菌活性以及對(duì)不同醇沉濃度的粗多糖進(jìn)行了抑菌活性的比較,并采用濾紙片法對(duì)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行了驗(yàn)證。采用改進(jìn)的瓊脂稀釋法測(cè)定了紫蛇尾粗多糖的最低抑菌濃度。研究結(jié)果表明所提取的6種紫蛇尾粗多糖均具有抑菌活性。
　　采用化學(xué)方法測(cè)定紫尾粗多

4、糖的抗氧化活性,其中包括對(duì)紫蛇尾粗多糖的還原能力的測(cè)定,對(duì)超陽(yáng)離子和羥基離子的清除能力的測(cè)定以及抑制紅細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化能力的測(cè)定。研究結(jié)果表明,紫蛇尾粗多糖具有較強(qiáng)抗氧化能力,能有效的清除羥自由基、超氧陰離子,抑制紅細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化,且其抗氧化能力與劑量成正相關(guān)性。
　　采用過(guò)氧化法構(gòu)建了心肌細(xì)胞H9c2的氧化模型,測(cè)定了紫蛇尾粗多糖對(duì)H9c2氧損傷的保護(hù)作用,以及對(duì)由氧損傷引起的H9c2細(xì)胞凋亡率、線(xiàn)粒體膜電位、BCl-2、Ba