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文檔簡介
1、目的:
觀察益腎膠囊含藥血清對高糖環(huán)境下小鼠腎小球足細胞自噬的影響。
方法:
分別以益腎膠囊0.625g/kg·d、1.25g/kg·d、2.5g/kg·d及貝那普利30mg/kg·d的劑量給予大鼠灌胃7天,經(jīng)腹主動脈取血,離心、滅菌制備不同濃度的益腎膠囊含藥血清及貝那普利含藥血清,對體外培養(yǎng)的小鼠腎小球足細胞進行分組干預(yù),細胞分為:正常組(NG)、高糖組(HG)、低濃度益腎膠囊含藥血清組(LY)、中濃度益
2、腎膠囊含藥血清組(MY)、高濃度益腎膠囊含藥血清組(HY)、貝那普利含藥血清組(BP)。Western Blot檢測自噬相關(guān)LC3Ⅱ蛋白與泛素結(jié)合蛋白p62(p62/SQSTMl)蛋白的表達變化。透射電鏡下觀察各組足細胞內(nèi)自噬體的變化。光學(xué)顯微鏡觀察各組足細胞形態(tài)。
結(jié)果:
1.Western Blot檢測結(jié)果:各細胞組LC3Ⅱ蛋白的表達:與NG相比,HG足細胞自噬相關(guān)蛋白LC3Ⅱ表達減少(p<0.05);與HG相比
3、,各藥物干預(yù)組LC3Ⅱ蛋白表達水平均呈上升趨勢,其中HY、BP顯著升高(p<0.05);而HY與BP相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)。各細胞組p62蛋白的表達:與NG相比, HG足細胞p62蛋白表達增多(p<0.05);與HG相比,各藥物干預(yù)組p62蛋白表達水平均呈下降趨勢,其中HY、BP顯著降低(p<0.05);而HY與BP相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)。
2.透射電鏡觀察各細胞組自噬體結(jié)果:與NG相比,HG細胞內(nèi)
4、自噬體數(shù)目明顯減少(p<0.05),與HG相比,各藥物干預(yù)組自噬體數(shù)目呈上升趨勢,其中HY、BP顯著升高(p<0.05);而HY與BP相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)。
3.光學(xué)顯微鏡觀察各組足細胞形態(tài)結(jié)果:NG足細胞貼壁生長,從胞體延伸出許多突起。HG較NG有更多足細胞從培養(yǎng)皿底部脫落,貼壁細胞足突縮短。LY、MY、HY、BP與HG足細胞相比在形態(tài)上前者更接近NG;其中HY與BP細胞增殖更旺盛。
結(jié)論:
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