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文檔簡(jiǎn)介
1、研究背景與目的:
結(jié)直腸癌(Colorectalcancer,CRC)為人類最常見(jiàn)的胃腸道惡性腫瘤之一,其發(fā)病機(jī)制尚不明確。具核梭桿菌(Fusobacteriumnucleatum,F(xiàn)n)是一種革蘭氏陰性厭氧桿菌,多見(jiàn)于口腔疾病如牙周炎,近年來(lái)有研究發(fā)現(xiàn)其與結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān),但具體的致癌機(jī)制仍未清楚。范科尼貧血(Fanconianemia,F(xiàn)A)是以FA通路失活導(dǎo)致DNA損傷修復(fù)功能障礙為分子基礎(chǔ)的血液疾病,有明顯的腫瘤
2、易感性,研究證實(shí)部分非FA來(lái)源的散發(fā)腫瘤的發(fā)生與FA通路失活有關(guān);范科尼貧血互補(bǔ)群基因D2(FanconianemiacomplementationgroupD2,F(xiàn)ANCD2)是FA通路的關(guān)鍵基因,已有研究發(fā)現(xiàn)其在結(jié)直腸癌中表達(dá)異常。本文主要研究結(jié)直腸癌中具核梭桿菌感染與FANCD2表達(dá)之間的相關(guān)性,探討具核梭桿菌是否有可能通過(guò)FA通路失活機(jī)制導(dǎo)致結(jié)直腸癌的發(fā)生。同時(shí),經(jīng)研究證實(shí)消化道惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移與促炎癥細(xì)胞因子的作用關(guān)
3、系密切,為此我們還研究了結(jié)直腸癌組織中腫瘤壞死因子-a(Tumornecrosisfactor-a,TNF-a)、白細(xì)胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)的表達(dá)與具核梭桿菌之間的相關(guān)性。
方法:
采用RT-PCR方法檢測(cè)40例結(jié)直腸癌組織及其配對(duì)正常組織中具核梭桿菌的豐度、FANCD2mRNA的表達(dá),分別分析具核梭桿菌、FANCD2mRNA表達(dá)與結(jié)直腸癌患者臨床病理特征的關(guān)系,并進(jìn)一步分析具核梭桿菌感染
4、與FANCD2表達(dá)兩者之間的相關(guān)性。隨機(jī)選取其中21例結(jié)直腸癌組織及其配對(duì)組織,同樣采用RT-PCR方法檢測(cè)具核梭桿菌的豐度和促炎性細(xì)胞因子(TNF-a、IL-6)表達(dá),并分析具核梭桿菌與兩者之間的相關(guān)性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果均采用SPSS20.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理及分析,檢驗(yàn)水準(zhǔn)a=0.05,P<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:
1、結(jié)直腸癌組織及其配對(duì)正常組織中均可檢測(cè)出具核梭桿菌,癌組織中具核梭桿菌的相對(duì)豐度較配對(duì)正常組織
5、升高的例數(shù)占67.5%(27/40),兩者分別為0.054916(0.004354,1.87703)、0.027057(0.002264,0.338817),癌組織的具核梭桿含量較配對(duì)正常組織升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.022)。結(jié)直腸癌中具核梭桿菌相對(duì)豐度與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P=0.048),但與性別、年齡、腫瘤部位、分化程度、浸潤(rùn)深度及Dukes分期無(wú)明顯關(guān)系(P>0.05)。
2、結(jié)直腸癌組織及其配對(duì)組織中均有FANC
6、D2mRNA表達(dá),結(jié)直腸癌組織FANCD2mRNA比配對(duì)正常組織升高的例數(shù)占患者總例數(shù)的70.0%(28/40),癌組織的FANCD2mRNA相對(duì)表達(dá)量較配對(duì)正常組織升高,分別為0.016629(0.007040,0.042966)、0.005518(0.001347,0.012658),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.002),其表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P=0.023),但與性別、年齡、腫瘤部位、分化程度、浸潤(rùn)深度及Dukes分期未見(jiàn)明顯相關(guān)
7、(P>0.05)。
3、結(jié)直腸癌中具核梭桿菌的感染與FANCD2表達(dá)升高之間無(wú)明顯相關(guān)性(rSpearman=0.091,P=0.578)。
4、結(jié)直腸癌組織及其配對(duì)組織中均可檢測(cè)出促炎癥細(xì)胞因子TNF-a、IL-6,癌組織中TNF-amRNA相對(duì)表達(dá)量較配對(duì)正常組織升高,分別為0.002893(0.001509,0.009993)、0.002291(0.000752,0.005196),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.
8、011)。癌組織的IL-6mRNA相對(duì)表達(dá)量較配對(duì)正常組織升高,分別為0.005627(0.003652,0.025999)、0.003952(0.001904,0.015148),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.048)。
5、結(jié)直腸癌中具核梭桿菌感染與促炎癥細(xì)胞因子TNF-a呈正相關(guān)關(guān)系,且其相關(guān)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(rSpearman=0.436,P=0.048);與IL-6之間呈弱正相關(guān)性,未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(rSpearman=0
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