下調(diào)miR-18a和miR-328抑制肺腺癌A549細(xì)胞的侵襲和遷移.pdf

1、【目的】：
　　肺癌是全身各種腫瘤中發(fā)病率與死亡率最高的惡性腫瘤，男性位居第一，女性僅次于乳腺癌位居第二，嚴(yán)重威脅人們的健康與生命。隨著腫瘤相關(guān)分子機(jī)制研究的深入以及分子靶向藥物的應(yīng)用，以基因?yàn)閷?dǎo)向的個(gè)體化多學(xué)科綜合治療將扮演著越來(lái)越重要的角色。微小 RNA（miRNA）是一類(lèi)長(zhǎng)約22個(gè)核苷酸的保守非編碼小分子RNA，通過(guò)調(diào)控目標(biāo)基因表達(dá)，影響腫瘤細(xì)胞的增殖、分化及凋亡。本研究旨在分析miR-18a和miR-328在肺腺癌A549

2、細(xì)胞中的表達(dá)，探討下調(diào)miR-18a或miR-328的表達(dá)對(duì)其侵襲和遷移能力的影響。
　　【方法】：
　?。?）運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)肺腺癌A549細(xì)胞和正常支氣管上皮BEAS-2B細(xì)胞中miR-18a和miR-328的相對(duì)表達(dá)量。
　?。?）通過(guò)獲取人 miR-18a、miR-328序列，設(shè)計(jì)并合成其 inhibitor序列及NC序列，應(yīng)用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù)，以下調(diào)miR-18a或miR-328的表達(dá)，從而建立低表

3、達(dá)miR-18a或miR-328的A549細(xì)胞模型。
　?。?）進(jìn)一步采用TranswellTM侵襲和遷移實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)各組A549細(xì)胞侵襲和遷移能力的變化。
　　【結(jié)果】：
　?。?）與正常支氣管上皮BEAS-2B細(xì)胞相比，肺腺癌A549細(xì)胞中miR-18a和miR-328均呈高表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）。
　?。?）與空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組相比，肺腺癌A549細(xì)胞中，轉(zhuǎn)染miR-18a inhib

4、itor組的miR-18a的表達(dá)明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）；轉(zhuǎn)染miR-328 inhibitor組的miR-328的表達(dá)同樣明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）。
　?。?）TranswellTM侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果顯示，與空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組相比，轉(zhuǎn)染miR-18a inhibitor組的A549細(xì)胞侵襲能力明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.01)；轉(zhuǎn)染miR-328 inhibitor組的A549

5、細(xì)胞侵襲能力明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.01）。
　?。?）與空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組相比，轉(zhuǎn)染miR-18a inhibitor組的A549細(xì)胞與轉(zhuǎn)染miR-328 inhibitor組的A549細(xì)胞遷移能力均明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.01)。
　　【結(jié)論】：
　　在A549細(xì)胞中miR-18a和miR-328均呈高表達(dá)，下調(diào)A549細(xì)胞miR-18a或miR-328的表達(dá)水平均可有效抑制腫瘤細(xì)胞