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文檔簡介
1、目的:
研究泛素連接酶復(fù)合體(Skp1–Cul1–F-box-protein,SCF)特異性亞基FBXO11的表達(dá)對肺腺癌A549細(xì)胞遷移的影響。
方法:
將培養(yǎng)的肺腺癌 A549細(xì)胞株分為三組:空白組(Blank組)、陰性對照RNA組(siRNA-NC組)、FBXO11干擾組(siRNA-FBXO11組),應(yīng)用Li-pofectamine2000將siRNA-FBXO11、siRNA-NC組分別轉(zhuǎn)染至si
2、RNA-FBXO11組和siRNA-NC組的A549細(xì)胞中。(1)應(yīng)用試劑Trizol提取A549細(xì)胞中總的RNA,RT-PCR半定量的方法檢測 FBXO11的 mRNA水平;(2)免疫印跡法(Western-Blot)法檢測FBXO11和Snail的蛋白水平;(3)劃痕修復(fù)實驗檢測A549細(xì)胞的遷移能力。
結(jié)果:
(1) RT-PCR結(jié)果示,Blank組、siRNA-NC組和siRNA-FBXO11組之間比較有差異
3、,且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與Blank組、siRNA-NC組比較,siRNA-FBXO11組 FBXO11的 mRNA水平顯著降低(P<0.05),而 Blank組與siRNA-NC組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。(2) Western-Blot結(jié)果示:FBXO11蛋白水平比較,三組之間有差異,且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與 Blank組、siRNA-NC組比較,siRNA-FBXO11組FBXO11的蛋
4、白水平顯著降低(P<0.05),而Blank組與siRNA-NC組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。Snail蛋白水平比較,三組之間有差異,且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與Blank組、siRNA-NC組比較,siRNA-FBXO11組的snail蛋白表達(dá)水平顯著增加(P<0.05),而Blank組與siRNA-NC組比較無顯著性差異(P>0.05)。(3)劃痕實驗結(jié)果顯示:比較三組之間的遷移能力有差異,且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(
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