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1、目的:檢測(cè)結(jié)直腸癌患者癌組織、配對(duì)癌旁組織及糞便中miRNA的表達(dá)情況,評(píng)價(jià)糞便miRNA對(duì)結(jié)直腸癌的診斷價(jià)值。
方法:收集2015年11月至2016年1月廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院結(jié)直腸肛門外科收治并手術(shù)的40例結(jié)直腸癌患者臨床資料、術(shù)前糞便標(biāo)本、術(shù)中腫瘤組織和相應(yīng)癌旁組織標(biāo)本,同時(shí)收集20例健康人的糞便作為對(duì)照組。分別提取所有組織及糞便中的RNA,經(jīng)核酸電泳及Nanodrop1000檢測(cè)RNA純度并測(cè)定其濃度,經(jīng)加尾及逆轉(zhuǎn)錄
2、。以U6為內(nèi)參基因,用熒光定量PCR(RT-PCR)檢測(cè)各標(biāo)本中10個(gè)目標(biāo)miRNAs(miRNA17、miRNA18a、miRNA21、miRNA31、miRNA92a、miRNA96、miRNA143、miRNA181b、miRNA221、miRNA222)的表達(dá)量。比較結(jié)直腸癌組織與相應(yīng)癌旁組織中各miRNA的表達(dá)差異,比較結(jié)直腸癌患者與健康人糞便中各miRNA的表達(dá)差異,選出差異明顯的miRNA,再應(yīng)用受試者工作曲線(recei
3、ver operatingcharacteristic curve,ROC)及其曲線下面積(AUC)評(píng)估m(xù)iRNA對(duì)結(jié)直腸癌的診斷價(jià)值。
結(jié)果:10個(gè)目標(biāo)miRNA在結(jié)直腸癌組織、癌旁組織、及糞便樣本中均被檢測(cè)出。癌組織中的miRNA-17、miRNA-21、miRNA-31、miRNA-92a、miRNA-96、miRNA-221的表達(dá)高于相應(yīng)癌旁組織(P<0.01);miRNA-143的表達(dá)低于相應(yīng)癌旁組織(P<0.01)
4、。結(jié)直腸癌患者糞便中miRNA-21、miRNA-31、miRNA-92a的表達(dá)高于健康人糞便(P<0.01),miRNA-143的表達(dá)低于健康人糞便(P<0.05)。相關(guān)性分析結(jié)果表明,miRNA-21、miRNA-31、miRNA-92a、miRNA-143在結(jié)直腸癌患者糞便中的表達(dá)與癌組織中的表達(dá)相關(guān)性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。根據(jù)ROC曲線分析發(fā)現(xiàn):結(jié)直腸癌組糞便與健康人糞便相比,miRNA-21、miRNA-31、miRN
5、A-92a、miRNA-143兩兩組合后的AUC均比單個(gè)miRNA的AUC高,組合后AUC均大于0.9,miRNA-21+miRNA-143二者組合的AUC達(dá)到0.998,敏感度及特異度分別達(dá)到了97.5%和95.3%,組間比較差異有統(tǒng)計(jì)意義(P<0.01)。
結(jié)論:結(jié)直腸癌患者糞便中miRNA-21、miRNA-31、miRNA-92a、miRNA-143的表達(dá)與健康人糞便中的表達(dá)具有明顯差異,可作為結(jié)直腸癌診斷的潛在腫瘤標(biāo)
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