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
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文檔簡介
1、目的:檢測結直腸癌患者癌組織、配對癌旁組織及糞便中miRNA的表達情況,評價糞便miRNA對結直腸癌的診斷價值。
方法:收集2015年11月至2016年1月廣西醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院結直腸肛門外科收治并手術的40例結直腸癌患者臨床資料、術前糞便標本、術中腫瘤組織和相應癌旁組織標本,同時收集20例健康人的糞便作為對照組。分別提取所有組織及糞便中的RNA,經(jīng)核酸電泳及Nanodrop1000檢測RNA純度并測定其濃度,經(jīng)加尾及逆轉錄
2、。以U6為內參基因,用熒光定量PCR(RT-PCR)檢測各標本中10個目標miRNAs(miRNA17、miRNA18a、miRNA21、miRNA31、miRNA92a、miRNA96、miRNA143、miRNA181b、miRNA221、miRNA222)的表達量。比較結直腸癌組織與相應癌旁組織中各miRNA的表達差異,比較結直腸癌患者與健康人糞便中各miRNA的表達差異,選出差異明顯的miRNA,再應用受試者工作曲線(recei
3、ver operatingcharacteristic curve,ROC)及其曲線下面積(AUC)評估m(xù)iRNA對結直腸癌的診斷價值。
結果:10個目標miRNA在結直腸癌組織、癌旁組織、及糞便樣本中均被檢測出。癌組織中的miRNA-17、miRNA-21、miRNA-31、miRNA-92a、miRNA-96、miRNA-221的表達高于相應癌旁組織(P<0.01);miRNA-143的表達低于相應癌旁組織(P<0.01)
4、。結直腸癌患者糞便中miRNA-21、miRNA-31、miRNA-92a的表達高于健康人糞便(P<0.01),miRNA-143的表達低于健康人糞便(P<0.05)。相關性分析結果表明,miRNA-21、miRNA-31、miRNA-92a、miRNA-143在結直腸癌患者糞便中的表達與癌組織中的表達相關性無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。根據(jù)ROC曲線分析發(fā)現(xiàn):結直腸癌組糞便與健康人糞便相比,miRNA-21、miRNA-31、miRN
5、A-92a、miRNA-143兩兩組合后的AUC均比單個miRNA的AUC高,組合后AUC均大于0.9,miRNA-21+miRNA-143二者組合的AUC達到0.998,敏感度及特異度分別達到了97.5%和95.3%,組間比較差異有統(tǒng)計意義(P<0.01)。
結論:結直腸癌患者糞便中miRNA-21、miRNA-31、miRNA-92a、miRNA-143的表達與健康人糞便中的表達具有明顯差異,可作為結直腸癌診斷的潛在腫瘤標
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