RGS20基因在三陰性乳腺癌中的作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、研究目的:
　　目前，乳腺癌已經(jīng)成為全球女性最常見的惡性腫瘤，也是第二大導(dǎo)致女性死亡的腫瘤。三陰性乳腺癌(triple-negative breast cancer，TNBC)是一類雌、孕激素受體陰性和人類表皮生長(zhǎng)因子（Her-2）不表達(dá)的乳腺癌亞型，占所有浸潤(rùn)性乳腺癌的10-20％。然而，三陰性乳腺癌是目前乳腺癌治療領(lǐng)域的難題，其靶向治療的缺乏以及三陰性乳腺癌的不良預(yù)后都促使人們更努力地去尋找可行的分子靶點(diǎn)以治療這些腫瘤患者。近

2、年來，隨著基因“組學(xué)”技術(shù)的進(jìn)步和廣泛應(yīng)用，國(guó)內(nèi)外越來越多的研究機(jī)構(gòu)陸續(xù)開展腫瘤測(cè)序數(shù)據(jù)庫的構(gòu)建，并且正在發(fā)掘一些可在三陰性乳腺癌鑒定中應(yīng)用的潛在分子特征。本研究旨在通過分析乳腺癌的測(cè)序數(shù)據(jù)庫，探索并驗(yàn)證三陰性乳腺癌中可能存在的分子靶標(biāo)。
　　研究方法:
　　1.通過生物信息學(xué)的方法分析TCGA乳腺癌數(shù)據(jù)庫，篩選出三陰性乳腺癌特異性分子指標(biāo)RGS20基因。
　　2.通過real time PCR檢測(cè)30例三陰性乳腺癌（

3、癌及癌旁配對(duì)）標(biāo)本，檢測(cè)RGS20基因mRNA的表達(dá)水平。
　　3.入組86例構(gòu)建三陰性乳腺癌組織芯片(TMA)，通過免疫組化技術(shù)檢測(cè)RGS20基因的蛋白表達(dá)水平，來探索RGS20基因與三陰性乳腺癌的臨床病理特征之間的關(guān)系。
　　4.通過K-M plot數(shù)據(jù)庫的生存分析，進(jìn)一步探索RGS20基因?qū)θ幮匀橄侔┑念A(yù)后影響。
　　5.構(gòu)建RGS20基因高表達(dá)的慢病毒及其siRNA，通過過表達(dá)及抑制等實(shí)驗(yàn)，分析RGS20基因

4、對(duì)三陰性乳腺癌細(xì)胞系的影響，探索其可能的機(jī)制。
　　研究?jī)?nèi)容:
　　1.TCGA數(shù)據(jù)分析，RGS20基因在三陰性乳腺癌組織中的表達(dá)明顯高于癌旁組織，且在三陰性乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移病例中呈現(xiàn)高表達(dá)。
　　2.結(jié)合TCGA數(shù)據(jù)庫分析及real time PCR分析，RGS20基因在三陰性乳腺癌的癌組織中表達(dá)顯著高于癌旁對(duì)照組織。
　　3.對(duì)86例三陰性乳腺癌組織芯片分析，發(fā)現(xiàn)RGS20基因表達(dá)陽性病例其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)更

5、高，ki-67增殖系數(shù)更高，以及有著更差的N分期和臨床分期。
　　4.K-Mplot的生存分析提示RGS20基因高表達(dá)的三陰性乳腺癌患者其無復(fù)發(fā)生存(relapse free survival，RFS)較低。
　　5.細(xì)胞功能學(xué)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，RGS20基因具有促進(jìn)三陰性乳腺癌細(xì)胞增殖以及侵襲的能力。
　　主要結(jié)論:
　　1.與其他分子類型乳腺癌相比，RGS20基因在三陰性乳腺癌中具有特異性的高表達(dá)，因此，其可能是三陰