結(jié)締組織病相關(guān)肺間質(zhì)病變患者血清Gal-9、KL-6水平的檢測及臨床相關(guān)性研究.pdf

1、間質(zhì)性肺病（interstitial lung disease,ILD）作為一種肺間質(zhì)的急慢性非特異性炎癥，病因復(fù)雜，發(fā)病機(jī)制尚不明，早期表現(xiàn)為肺泡炎，隨著持續(xù)的炎癥損傷和修復(fù)，晚期逐漸進(jìn)展為彌漫性肺間質(zhì)纖維化，最后結(jié)局為呼吸衰竭，預(yù)后差、死亡率高。而導(dǎo)致繼發(fā)性ILD發(fā)生發(fā)展的主要病因之一為結(jié)締組織病（connective tissue disease,CTD）。CTD屬于自身免疫性疾病，屬于多系統(tǒng)性疾病，最容易累及肺部[1]，表現(xiàn)為I

2、LD。但CTD-ILD的發(fā)病機(jī)制尚不十分明確，可能是免疫紊亂刺激了巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞，從而導(dǎo)致其釋放多種細(xì)胞因子、蛋白酶和氧自由基等，這些物質(zhì)能夠?qū)е聯(lián)p傷肺泡上皮細(xì)胞和毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞之間的基底膜、同時可以促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增生等，破壞了肺泡結(jié)構(gòu)、肺泡-毛細(xì)血管膜等，使得纖維化逐漸進(jìn)展，從而導(dǎo)致低氧血癥和呼吸衰竭。
　　半乳糖凝集素-9（Galectin-9,Gal-9）是一種嗜酸性粒細(xì)胞趨化物。Gal-9能夠結(jié)合T細(xì)胞免疫球蛋白黏

3、蛋白分子3(Tim-3)[2-4]和T細(xì)胞的CD44［5］途徑，介導(dǎo)免疫效應(yīng)。有研究發(fā)現(xiàn)[6]，Gal-9在CTD患者中可能有抑制肺間質(zhì)纖維化的作用。同時有研究[6]利用免疫組化和肺組織活檢發(fā)現(xiàn)在ILD患者中，Gal-9有表達(dá)，且發(fā)現(xiàn)Gal-9能夠在肺泡II型細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中發(fā)生較強(qiáng)的免疫應(yīng)答。通過對CTD-ILD病人肺泡灌洗液中Gal-9的檢測，發(fā)現(xiàn)Gal-9的水平高于特發(fā)性ILD和特發(fā)性非特異性ILD，也得出了Ga

4、l-9可能是CTD-ILD的治療效果比其它兩者好的原因。同時，該研究認(rèn)為Gal-9主要來源于淋巴細(xì)胞。在CTD-ILD中可能通過Gal-9與Tim-3結(jié)合，引起Thl/Th17細(xì)胞凋亡或抑制其分化，抑制多種炎癥細(xì)胞因子釋放，介導(dǎo)免疫效應(yīng)，抑制了成纖維細(xì)胞的增生，從而抑制了肺纖維化[2、17]。
　　涎液化糖鏈抗原（Krebs von den Lungen-6,KL-6）是肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞分泌的一種大分子唾液酸糖蛋白，在正常的肺泡上

5、皮細(xì)胞表面表達(dá)量較少。ILD患者血清KL-6的濃度高于其他呼吸病患者或正常人[7-8]。當(dāng)KL-6水平大于500U/ml時，提示CTD可能合并了ILD[9]。就CTD而言，如果KL-6水平大于500U/ml，要高度懷疑合并ILD的可能，對于沒有合并ILD的CTD患者血清KL-6水平一般低于500U/ml[10]。血清KL-6水平越高，提示ILD的滲出性越強(qiáng)，活動性越高，所以血清KL-6水平與迅速進(jìn)展性間質(zhì)性肺?。≧apid progre

6、ss interstitial lungdisease,RP-ILD）相關(guān)[7]。
　　研究目的：
　　通過檢測CTD-ILD患者血清中Gal-9, KL-6的水平，比較其與無ILD的CTD組及正常對照組(normal control, NC)間的差異，分析其與實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)、肺功能、HRCT及肺動脈高壓的相關(guān)性，以及Gal-9與外周血Th17細(xì)胞表達(dá)率的相關(guān)性，初步探討Gal-9在CTD-ILD的發(fā)病機(jī)制中的可能作用，并進(jìn)一步

7、驗(yàn)證KL-6對于早期診斷ILD及評估病情進(jìn)展的重要作用。
　　研究方法：
　　病例對照研究，收集在廣州市第一人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科住院被確診為CTD-ILD的患者63例，同時選擇年齡、性別、病種匹配的CTD不合并 ILD的患者60例(CTD-NILD組)及性別、年齡匹配的健康體檢者30例(NC組)，詳細(xì)記錄CTD-ILD患者的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)（血沉、CRP、類風(fēng)濕因子、CCP、補(bǔ)體C3、C4、ANA）、肺功能（通氣功能、彌散功能）、肺

8、部HRCT（滲出為主、纖維化為主）、肺動脈高壓（心臟彩超檢查）等資料;同時用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清Gal-9、KL-6的水平，用流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血Th17細(xì)胞的表達(dá)。分別比較CTD-ILD組和CTD-NILD組以及NC組之間血清Gal-9，KL-6濃度。再將CTD-ILD組的Gal-9，KL-6分別與患者的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)（血沉、CRP、類風(fēng)濕因子、CCP、補(bǔ)體C3、C4、ANA）、肺功能（通氣功能、彌散功能）、肺部HRCT（

9、滲出為主、纖維化為主）、肺動脈高壓（心臟彩超檢查）做相關(guān)分析，以及比較 Gal-9濃度與外周血 Th17細(xì)胞表達(dá)率的相關(guān)性。運(yùn)用SPSS19.0軟件進(jìn)行差異性對比及各項(xiàng)指標(biāo)相關(guān)性統(tǒng)計(jì)分析。
　　研究結(jié)果：
　　1、一般情況
　　CTD-ILD患者63例，CTD-NILD患者60例，NC組30例，三組患者之間性別、年齡上無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均＞0.05)，CTD-ILD組與CTD-NILD組之間病程及病種無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均＞

10、0.05)。
　　2、三組之間血清Gal-9, KL-6水平比較
　?。?）CTD-ILD組與NC組比較:
　　CTD-ILD組Gal-9水平的中位數(shù)為102.4（79.2-125.3）ng/L，高于NC組的中位數(shù)76.9（68.3-89.3）ng/L水平(Z=-5.313，P＜0.05)；CTD-ILD組 KL-6均數(shù)水平（618.76±436.61）U/ml，顯著高于 NC組（278.97±243.33）U/ml(

11、P＜0.05)。
　?。?）CTD-NILD組與NC組比較:
　　CTD-NILD組Gal-9水平的中位數(shù)為133.1（102.8-158.2）ng/L，顯著高于NC組水平(Z=-2.563，P＜0.05)；CTD-NILD組KL-6水平為（314.54±123.56）U/ml，與NC組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　?。?）CTD-ILD組與CTD-NILD組比較:
　　CTD-ILD組Gal-9的中位數(shù)

12、水平低于CTD-NILD組(Z=-3.914，P＜0.05)；CTD-ILD組KL-6均數(shù)水平顯著高于CTD-NILD組(P＜0.05);
　　3、CTD-ILD患者Gal-9，KL-6水平與實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的相關(guān)性:
　?。?）血清Gal-9水平與血沉、CRP、類風(fēng)濕因子、CCP、補(bǔ)體C3、C4、ANA均無明顯相關(guān)性(P均＞0.05)；
　?。?）血清KL-6水平與血沉、CRP、類風(fēng)濕因子、CCP、補(bǔ)體C3、C4、ANA均

13、無明顯相關(guān)性(P均＞0.05)。
　　4、CTD-ILD患者Gal-9，KL-6水平與肺功能的相關(guān)性：
　?。?）血清Gal-9，KL-6水平與FVC、FEV1、FEV1/FVC、DLCO的相關(guān)性1）血清Gal-9與DLCO呈正相關(guān)（r=0.650，P=0.022），與FVC、FEV1、FEV1/FVC無明顯相關(guān)性（r=0.168，P=0.651；r=0.039，P=0.221；r=-0.348，P=0.138）。血清KL-

14、6與FEV1呈負(fù)相關(guān)（r=-0.301，P=0.019），與FVC、FEV1/FVC、DLCO無明顯相關(guān)性（r=-0.191，P=0.155；r=0.328，P=0.092；r=-0.061，P=0.342）。
　　（2）血清Gal-9，KL-6水平與肺通氣功能及彌散功能的相關(guān)性分組：根據(jù)肺通氣功能分組：正常/輕度通氣功能障礙組，中/重度通氣功能障礙組。根據(jù)肺彌散功能分組：正常/輕度彌散功能障礙組，中/重度彌散功能障礙組。

15、　　1）肺通氣功能:
　　正常/輕度通氣功能障礙組與中/重度通氣功能障礙組比較，血清Gal-9水平濃度無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(Z=-0.414，P＞0.05)；正常/輕度通氣功能障礙組與中/重度通氣功能障礙組比較，血清KL-6的水平濃度也無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　2）肺彌散功能:
　　正常/輕度彌散功能障礙組的血清 Gal-9水平高于中度/重度彌散功能障礙組(Z=-2.354，P＜0.05)；正常/輕度彌散功能障礙組與

16、中/重度彌散功能障礙組比較，血清KL-6的水平濃度無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　5、CTD-ILD患者血清Gal-9，KL-6水平與高分辨CT（HRCT）影像學(xué)表現(xiàn)的相關(guān)性:
　　根據(jù)HRCT的影像學(xué)表現(xiàn)進(jìn)行分組，分為:滲出性為主ILD組：磨玻璃樣改變，斑點(diǎn)斑片狀影；纖維化病變?yōu)橹鱅LD組：纖維條索狀，網(wǎng)格狀，蜂窩狀。
　　滲出性為主ILD組的血清Gal-9水平高于纖維化病變?yōu)橹鱅LD組(Z=-1.868，P＜0

17、.05)；
　　滲出性為主ILD組的血清KL-6水平也顯著高于纖維化病變?yōu)橹鱅LD組(P＜0.05)。
　　6、CTD-ILD患者Gal-9，KL-6水平與肺動脈高壓的相關(guān)性:
　　根據(jù)心臟彩超將ILD患者分組:有肺動脈高壓組（胸多普勒超聲心動圖示肺動脈收縮壓>35mmHg）和無肺動脈高壓組（胸多普勒超聲心動圖示肺動脈收縮壓≤35mmHg）。
　　兩組之間血清Gal-9的水平濃度無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(Z=-0.093，P

18、＞0.05)；兩組之間血清KL-6的水平濃度也無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　7、CTD-ILD患者血清Gal-9水平與KL-6水平的相關(guān)分析
　　血清Gal-9水平與KL-6水平無相關(guān)性（r=0.110，P=0.391）
　　8、CTD-ILD患者Gal-9濃度與Th17細(xì)胞表達(dá)率的相關(guān)分析
　　血清Gal-9濃度水平與Th17細(xì)胞表達(dá)率呈負(fù)相關(guān)（r=-0.25，P＜0.05）。
　　研究結(jié)論：

19、>　　1、CTD-NILD組血清Gal-9水平高于CTD-ILD組患者，血清Gal-9水平與DLCO呈正相關(guān)，正常/輕度彌散功能障礙組的血清Gal-9水平也高于中度/重度彌散功能障礙組，提示Gal-9可能具有抑制肺間質(zhì)病變的作用。
　　2、血清Gal-9水平與Th17細(xì)胞表達(dá)率呈負(fù)相關(guān)，Gal-9是否可以通過誘導(dǎo)Th17細(xì)胞凋亡或抑制其分化，抑制多種炎癥細(xì)胞因子釋放而發(fā)揮抑制肺間質(zhì)炎癥和纖維化的作用，有待進(jìn)一步的研究探討。