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1、目的:探討硫氧還蛋白結(jié)合蛋白(thioredoxin-interacting protein,TXNIP)激活核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3(NLR family pyrin domain containing3,NLRP3)炎性小體與子癇前期(preeclampsia,PE)發(fā)病的關(guān)系。
方法:收集重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2013.12至2014.6時(shí)間內(nèi)分娩的PE與正常胎盤(pán)組織,各收集15例。應(yīng)用蛋白質(zhì)免疫印跡法(We
2、stern Blot,WB)檢測(cè)胎盤(pán)組織中TXNIP以及NLRP3炎性小體的表達(dá)水平。以人絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞(Human transformed primary extravillous trophoblast cell line,HTR8/SVneo)建立PE細(xì)胞模型。各組處理后使用WB檢測(cè)細(xì)胞TXNIP以及NLRP3蛋白表達(dá)水平,應(yīng)用半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)檢測(cè)試劑盒檢測(cè)caspase-1的活性,應(yīng)用蛋白質(zhì)免疫共沉淀法(
3、Co-Immunoprecipitation,Co-IP)檢測(cè)TXNIP與NLRP3、凋亡相關(guān)的斑點(diǎn)樣蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)之間的相互作用,并實(shí)時(shí)檢測(cè)細(xì)胞侵襲與增值。
結(jié)果:TXNIP與NLRP3在PE組胎盤(pán)組織中的表達(dá)明顯高于正常組(P=0.003,P=0.002);在細(xì)胞模型中,H/R處理后,TXNIP與NLRP3的表達(dá)
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