苯乙醇苷類化合物Torenoside B和Savatiside A對(duì)阿爾茨海默癥的保護(hù)作用研究.pdf

1、碩士學(xué)位論文（專業(yè)學(xué)位）中文題目苯乙醇苷類化合物TenosideB和SavatisideA對(duì)阿爾茨海默癥的保護(hù)作用研究英文題目TheprotectiveeffectofPhenylethanoidglycosidestenosideBsavatisideAonAlzheimerdisease研究生姓名季士亮指導(dǎo)教師姓名劉艷麗李笑然專業(yè)名稱藥學(xué)研究方向神經(jīng)藥理所在院部藥學(xué)院論文提交日期2016年5月學(xué)校代碼：10285學(xué)號(hào)：2014452

2、6016苯乙醇苷類化合物TenosideB和SavatisideA對(duì)阿爾茨海默癥的保護(hù)作用研究中文摘要I苯乙醇苷類化合物TenosideB和SavatisideA對(duì)阿爾茨海默癥的保護(hù)作用研究中文摘要目的：目的：β淀粉樣蛋白引起的氧化應(yīng)激在神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮重要作用。Aβ25–35可導(dǎo)致活性氧(ROS)的產(chǎn)生和誘導(dǎo)胞內(nèi)鈣超載。從鹿茸草中提出的單體成分savatisideA(SA)、tenosideB(TB)在心肌細(xì)胞上已被證實(shí)

3、具有抗氧化應(yīng)激活性。本實(shí)驗(yàn)主要探討其在體內(nèi)外對(duì)Aβ25–35引起的阿爾茨海默癥(AD)的保護(hù)作用，并初步進(jìn)行機(jī)制探討，為SA和TB防治神經(jīng)退行性疾病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法方法:采用MTT比色法確定Aβ25–35誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞的最佳造模劑量和SA、TB的有效保護(hù)劑量；倒置熒光顯微鏡觀察神經(jīng)細(xì)胞的形態(tài)變化；流式細(xì)胞儀檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)ROS的水平；各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞內(nèi)氧化指標(biāo)GSHPX、SOD、MDA的測(cè)定；DNAladder檢測(cè)細(xì)胞DNA損傷；流式細(xì)胞儀

4、測(cè)定神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度；WesternBlot法檢測(cè)Calnexin、PAMPK1、PAMPK2以及COX2蛋白的表達(dá)；在體內(nèi)，采用單側(cè)海馬注射Aβ25–35誘導(dǎo)小鼠AD模型，探討SA和TB的神經(jīng)保護(hù)作用。結(jié)果：結(jié)果：Aβ25–35誘導(dǎo)PC12和SHSY5Y神經(jīng)細(xì)胞凋亡，SA和TB兩個(gè)化合物均能提高細(xì)胞存活率；倒置顯微鏡下可觀察到細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯改變，在Aβ25–35組，PC12和SHSY5Y細(xì)胞生長(zhǎng)明顯受到抑制，細(xì)胞集聚、貼壁功能減

5、弱，部分細(xì)胞碎裂、死亡，給予SA、TB后，均能有效對(duì)抗Aβ25–35引起的細(xì)胞形態(tài)變化；Aβ25–35可引起SHSY5Y、PC12細(xì)胞內(nèi)ROS水平顯著升高，SA，TB(25100uM)均可抑制Aβ25–35引起的細(xì)胞內(nèi)ROS水平的升高，當(dāng)同時(shí)給予活性氧抑制劑NAC處理后，細(xì)胞內(nèi)ROS水平會(huì)進(jìn)一步降低，表明SA，TB(25100uM)發(fā)揮著抗氧化應(yīng)激的作用；損傷組細(xì)胞內(nèi)的MDA含量均較之正常組細(xì)胞有所升高，SOD和GSHPX活性降低，而給