谷氨酰胺預(yù)防新生鼠壞死性小腸結(jié)腸炎的作用研究.pdf

1、孟陽(yáng)：谷氨酰胺預(yù)防新生鼠壞死性小腸結(jié)腸炎的作用研究!谷氨酰胺預(yù)防新生鼠壞死性小腸結(jié)腸炎的作用研究中文摘要目的：通過(guò)建立新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎的動(dòng)物模型，探討預(yù)防性補(bǔ)充谷氨酰胺對(duì)壞死性小腸結(jié)腸炎新生鼠的腸粘膜中白細(xì)胞介素6(IL6)、腫瘤壞死因子旺(TNFa)、白細(xì)胞介素10(IL一10)及分泌型球蛋白IgA(SIgA)含量的影響，為臨床應(yīng)用谷氨酰胺預(yù)防新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎提供科學(xué)依據(jù)。方法：選用60只兩日齡新生Wistar鼠，雌雄不限

2、，隨機(jī)分三組：空白對(duì)照組(A)、模型組(B)、干預(yù)組(C)，每組n=20只。A組于母鼠旁正常喂養(yǎng)，B、c組均人工喂養(yǎng)代鼠乳，C組：每只039／Kg谷氨酰胺灌胃，每天～次，持續(xù)五天；B組和C組均于實(shí)驗(yàn)第六天起內(nèi)毒素(LPS)5mg／kg灌胃，每天一次，持續(xù)三天。LPS灌胃結(jié)束后第2、6、12、24小時(shí)，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)抽取5只采用斷頸法處死，解剖留取十二指腸下端至直腸上端腸道組織，其中回盲部近端腸管觀(guān)察Wistar鼠病理標(biāo)本，剩余的腸管用酶

3、聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)腸組織勻漿中TNF一0【、IL一6、IL10、SIgA的含量。采用免疫組化法檢測(cè)三組Wistar鼠腸道病理組織標(biāo)本，觀(guān)察腸組織中IL6、TNF—a、IL一10炎癥因子表達(dá)。結(jié)果：1各組新生Wistar鼠一般情況和腸組織病理形態(tài)學(xué)改變B組中新生鼠逐漸萎靡、體毛雜亂，其中12只出現(xiàn)腹部青紫，6只發(fā)生抽搐、血便，3只在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中死亡。動(dòng)物處死后，見(jiàn)胃潴留明顯，腸壁充血，腸管擴(kuò)張、水腫，腸腔滲出物增多，可見(jiàn)腸壁片

4、狀出血壞死。HE染色后光鏡下變化：B組2小時(shí)腸上皮細(xì)胞變性，黏膜下和固有層水腫分離，絨毛萎縮、脫落；6小時(shí)可見(jiàn)腸上皮結(jié)構(gòu)基本消失腸絨毛結(jié)構(gòu)崩解分離，黏膜下層和肌層重度水腫；12小時(shí)腸上皮結(jié)構(gòu)開(kāi)始修復(fù)，絨毛結(jié)構(gòu)不清；24小時(shí)后黏膜下層、基層水腫，絨毛結(jié)構(gòu)開(kāi)始修復(fù)。C組中新生鼠少動(dòng)、體毛稍雜亂，伴腹部膨隆，解剖后見(jiàn)腸壁輕度擴(kuò)張、水腫，無(wú)出血壞死灶，光鏡下腸組織病理?yè)p傷改變較B組輕。2各組新生Wistar鼠腸組織IL6、TNF—a、IL一10

5、、SIgA含量變化B組腸組織IL一6的含量在2h、6h、12h、24h與A組比較有顯著增加(P005)，C組腸組織IL6的含量在2h、6h、12h與B組比較有顯著降低(PO05)。B組腸組織TNF—a的含量在2h、6h、12h、24h與A組比較有顯著增加(P005)，C組腸組織TNFa的含量在2h、6h、12h、24h與B組比較有顯著降低(P005)。B組腸組織IL一10的含量在2h、孟陽(yáng)：谷氨酰胺預(yù)防新生鼠壞死性小腸結(jié)腸炎的作用研究S

6、tudyontherolesofGiutamineinthepreventionatneonatalratmodelofnecrotizingenterocolitisobjection：Abstract3Toestablishnecrotizingenterocolitis(NEC、modelandstudytheimpactofexpressionlevelofglutamineoninterleukin一6(IL一6)、Tumor

7、necrosisfactora(TNF伐)、interleukin—IO(IL一10)andsecretoryimmunoglobulinA(SIgA)intheintestinaltissueofneonatalrats，InordertoprovidenewScientificbasisandtheoreticalsupportforpreventionandcurenecrotizingenterocolitis(NEC)Meth

8、ods：60neonatalWistarratsaged2daysweredividedintothreegroupsatrandom，(nolimittomaleorfemale)：Interventiongroup(A)、Modelgroup(B)、andMargincontrolgroup(C)，n=20AgroupwerereceivedglutaminefO39／kg)withintragastricgavageonceper

9、dayforfivedaysAandBgroupweregivenlipopolysaccharide(LPS)(5mg／kg，treatedbyultrapurewater，5mg／m1)intragastricadministrationonthesixthdayonceperdayforthrseedaysTheratsofAandBgroupweregiveformulafeeding，theratsofCgrouplivedw

10、ithfemalemiceFiverats，selectedformeachgroupatrandom，weredecapitatedrespectivelyat2，6，12and24hafterLPSintragastricadministrationofAandBgroupObtainedduodenuminferiortectumsuperiorintestinaltissue，inwhichtheileocecaljunctio

11、nwasstainedbyhematoxylinandeosin(HE)forthehistologicalanalysis，andtheremainswasusedtomeasurethecontentofIL一6、TNF一0c、IL一10andSIgAwithenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)inhomogenateofintestinaltissueUsingimmunohistochemi

12、strytOdetecttheexpressionofIL6、TNFc【、IL一10innewbornratintestinaltissuesofthreegroupsResuits：1ThesymptomandpathomorphologychangeofilealtissueofeachgroupTheneonatalWistarratsofBgroupappearedlazygradually、messyhairtwelveoft

13、hemshowedabdominalbruising，sixofthemshowedconvulsions、bloodydiarrhea，threeofthemdiedinthestudyAtferkilledthoserats，wesawthattheirstomachaccumulatedverymuch，thewalloftheirintestinesandmesenterycongested，intestinalcanaldil