龍血素A調(diào)控毛囊干細(xì)胞增殖分化修復(fù)大鼠觸須部皮膚創(chuàng)面的研究.pdf

1、廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文，是個(gè)人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)特別加以注明引用的內(nèi)容外，本論文不含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明并致謝。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名日期：≥l易年關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明5月弓。日本人完全了解廣州中醫(yī)藥大學(xué)有關(guān)保留使用學(xué)位論文的規(guī)定，

2、同意學(xué)校保留或向國家有關(guān)部門機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許被查閱和借閱。本人授權(quán)廣州中醫(yī)藥大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)印手段保存和匯編本學(xué)位論文。(保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定)論文作者簽名蠶見論文導(dǎo)師簽名邋日期：如f6年弓月弓。日廣州中醫(yī)藥大學(xué)2016屆碩士學(xué)位論文的變化，檢測下游目的基因LEFl、TCF3、cmyc、cyclinD1的變化。以慢病毒為載體，構(gòu)建LEFl過表

3、達(dá)質(zhì)粒并轉(zhuǎn)染FSCs，進(jìn)一步探討龍血素A對FSCs中Wnt／Bcate血信號通路的調(diào)控。4、采用n心泓A基因芯片技術(shù)，對龍血素A作用前后的FSCs進(jìn)行miRNA高通量篩選，并經(jīng)qI盯于CR實(shí)驗(yàn)進(jìn)行有效驗(yàn)證，初步探索龍血素A對FSCs中miRNA的調(diào)控，并在此基礎(chǔ)上預(yù)測相關(guān)信號通路。研究結(jié)果l、龍血素A能有效促進(jìn)大鼠觸須部創(chuàng)面止血、收縮、結(jié)痂，能抑制炎癥反應(yīng)、促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖、促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的分泌、促進(jìn)表皮及毛囊的修復(fù)。2、體外分離、培

4、養(yǎng)的FSCs呈CKl5、CKl9表達(dá)陽性，龍血素A誘導(dǎo)后FSCs可向表皮細(xì)胞分化，呈CKl4、IIlV0luVc血、CKlO表達(dá)陽性。3、龍血素A作用后FSCs中，GSK3D表達(dá)下降，pcatenin表達(dá)上升，LEFI、TCF3、cmyc、cyclinD1基因表達(dá)均上調(diào)，龍血素A能激活FSCs中Wn邯catenin信號通路。以慢病毒為載體的LEFl過表達(dá)質(zhì)粒對FSCs轉(zhuǎn)染效率達(dá)37％，轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞中LEFl、cyclinD1基因表達(dá)上調(diào)

5、。4、經(jīng)nliRNA基因芯片初步篩選，龍血素A作用FSCs后，m濃21、miR299表達(dá)上調(diào)，miR296、miR335表達(dá)下調(diào)，提示龍血素A可能通過TGFDSmad通路、BMP和／或MAPK通路調(diào)控FSCs的增殖與分化。研究結(jié)論1、龍血素A能促進(jìn)大鼠觸須部皮膚創(chuàng)面修復(fù)。2、龍血素A能促進(jìn)體外培養(yǎng)的FSCs增殖、分化。3、龍血素A能通過調(diào)控Wnt／BcateIlin信號通路，影響FSCs增殖、分化。4、龍血素A有可能通過調(diào)控TG鄧Sma