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文檔簡介
1、目的:體外建立穩(wěn)定的三維皮膚(即全層皮膚)創(chuàng)面模型;聯(lián)合多學(xué)科的技術(shù)與方法證明創(chuàng)面收集液對表皮干細胞的增殖和分化有促進作用。
方法:通過組織工程學(xué)手段建立三維皮膚等價物的凍傷模型,以收集的成年Wistar大鼠背部全層皮膚創(chuàng)面滲出液為刺激因子,選擇1、3、7、14、21天時相收集標(biāo)本,進行β1整合素、α6整合素、K19抗體的免疫組化染色,觀察并分析抗體表達陽性細胞的分布情況及表達強度。
結(jié)果:(1)通過組織工程
2、學(xué)手段,以表皮干細胞為種子細胞,成纖維細胞-鼠尾膠原凝膠為真皮替代物,模擬在體的培養(yǎng)條件,實現(xiàn)了穩(wěn)定的三維皮膚創(chuàng)面模型的建立。(2)無創(chuàng)面組、創(chuàng)面收集液+創(chuàng)面組、創(chuàng)面組的特異性抗體免疫組化圖像比對顯示,皮膚創(chuàng)面的愈合過程中,創(chuàng)緣附近出現(xiàn)了散在的抗體染色陽性細胞,尤集中于鄰近創(chuàng)面區(qū)。(3)無創(chuàng)面組抗體染色陽性細胞的分布與數(shù)量在不同時相區(qū)別不大,差異無顯著性(P>0.05);凍傷后,以創(chuàng)面收集液為刺激因子的實驗組和無創(chuàng)面收集液干預(yù)組之間對比
3、,在傷后1天,抗體表達陽性細胞數(shù)量相當(dāng),差異無顯著性(P>0.05);凍傷后3天、7天、14天、21天不同時相的免疫組化結(jié)果比對,刺激因子干預(yù)組的表皮干細胞的特異性抗體陽性表達均要強于非干預(yù)組,差異有顯著性(P<0.01)。
結(jié)論:離體三維皮膚創(chuàng)面愈合過程中表皮干細胞有異位現(xiàn)象;全層皮膚創(chuàng)面收集液在創(chuàng)面愈合過程中,對表皮干細胞的增殖和分化有促進作用;本研究結(jié)果將令人們深刻認識創(chuàng)面愈合的機制與特性,為加速創(chuàng)面愈合及研發(fā)理想的
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