從炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激探究麻醉劑影響老齡大鼠認(rèn)知功能的分子機(jī)制.pdf

1、由血管損傷和炎癥引起的認(rèn)知障礙影響著大腦功能。研究已經(jīng)證實(shí)，認(rèn)知障礙與血管性損傷、炎癥直接關(guān)聯(lián)，而損傷程度與炎癥、血管性損傷呈正相關(guān)。研究表明，大腦在認(rèn)知功能上發(fā)揮著自己的特殊作用，全面的大腦保護(hù)可能在急性心肌缺血再灌注損傷的情況下，有助于降低患者的認(rèn)知障礙。七氟醚對(duì)抗心肌和腦損傷能起到積極的作用，因?yàn)樗兄诮档托募『难趿?，抑制心肌鈣離子的運(yùn)動(dòng)，激活線(xiàn)粒體信號(hào)傳導(dǎo)通路，并且阻止炎癥因子的產(chǎn)生。目前對(duì)于血管損傷的治療主要依賴(lài)于手術(shù)與麻醉

2、的聯(lián)合治療，然而，關(guān)于七氟醚在急性心肌缺血再灌注損傷導(dǎo)致的認(rèn)知障礙治療方面的效果，沒(méi)有直接的和系統(tǒng)化的驗(yàn)證。在本研究中，我們?cè)O(shè)法確定麻醉劑七氟醚和芬太尼對(duì)于大鼠腦組織長(zhǎng)期認(rèn)知功能的影響，以及和炎性因子如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、白介素-1β(IL-1β)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)潛在的相關(guān)性。我們使用穿梭箱和水迷宮測(cè)試去研究Wistar大鼠的認(rèn)知功能。結(jié)果表明，經(jīng)過(guò)七氟醚或芬太尼治療的大鼠同急性心肌缺血再灌注大鼠模型相比，電擊

3、次數(shù)更少并且有更多的主動(dòng)逃生次數(shù)。麻醉劑的治療也縮短學(xué)習(xí)和記憶的周期，這表明了麻醉劑在認(rèn)知功能方面的保護(hù)作用。此外，我們的研究結(jié)果揭示在使用麻醉藥的大鼠頭部組織中TNF-α和IL-1β表達(dá)降低而VEGF表達(dá)升高。這些發(fā)現(xiàn)強(qiáng)調(diào)了通過(guò)調(diào)節(jié)炎癥因子的表達(dá)，七氟醚和芬太尼在急性心肌缺血再灌注損傷老齡大鼠的認(rèn)知功能恢復(fù)中發(fā)揮著改善作用。
　　與微血管損傷相關(guān)的缺血組織再灌注是炎癥反應(yīng)活化的直接后果。臨床治療血管損傷的主要方法是手術(shù)結(jié)合麻醉，

4、常規(guī)的麻醉劑如丙泊酚可能引起自主認(rèn)知功能障礙，不利于血管損傷后認(rèn)知障礙的康復(fù)。所以我們計(jì)劃通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的方法，對(duì)于七氟醚和芬太尼對(duì)急性心肌缺血再灌注損傷的老齡大鼠大腦的保護(hù)作用進(jìn)行調(diào)查。前期研究中，我們認(rèn)為七氟醚和芬太尼在上調(diào)VEGF表達(dá)，降低TNF-α和IL-1β表達(dá)水平時(shí)，可能有助于老齡大鼠術(shù)后認(rèn)知功能損害的康復(fù)。本研究擬從分子機(jī)制方面探討七氟醚和芬太尼對(duì)老齡大鼠認(rèn)知功能的影響，探討其對(duì)認(rèn)知功能的保護(hù)機(jī)制。120只Wistar大鼠隨

5、機(jī)分為四組，A組大鼠接受假手術(shù)，B組大鼠為急性心肌缺血再灌注模型，C組為B組的基礎(chǔ)上吸入七氟醚，D組在B組的基礎(chǔ)上靜脈注射芬太尼。采用TUNEL檢測(cè)Wistar大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞凋亡指數(shù)，采用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定海馬神經(jīng)元的凋亡率和胞漿內(nèi)鈣離子水平。再利用熒光探針測(cè)定鼠海馬神經(jīng)元胞漿中線(xiàn)粒體的膜電位情況。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定大鼠心尖血液中炎癥因子的含量。測(cè)定各組經(jīng)前述方法分離提純的海馬神經(jīng)元細(xì)胞勻漿內(nèi)線(xiàn)粒體呼吸鏈復(fù)合物活性。使用

6、麻醉藥的大鼠血液中TNF-α和IL-1β表達(dá)降低而VEGF表達(dá)升高。麻醉劑的治療降低了神經(jīng)元凋亡率和凋亡指數(shù)，減輕了缺血時(shí)鈣離子向神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)移，提高了神經(jīng)元胞漿內(nèi)線(xiàn)粒體膜電位活性和線(xiàn)粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ～Ⅳ活性。麻醉劑可以有效減輕老齡大鼠因急性心肌缺血再灌注損傷造成的認(rèn)知功能障礙，其機(jī)制與提高VEGF表達(dá)水平，促進(jìn)新生血管形成過(guò)程，減輕炎癥因子所參與的對(duì)海馬神經(jīng)元細(xì)胞所造成的炎性損傷有關(guān)。此外，麻醉劑還能夠減輕海馬神經(jīng)元內(nèi)氧化應(yīng)激過(guò)