電項(xiàng)針對大鼠睡眠剝奪及其誘發(fā)氧化應(yīng)激反應(yīng)影響機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本論文是在以往對電項(xiàng)針臨床應(yīng)用和研究的基礎(chǔ)上,對電項(xiàng)針治療失眠的作用作了系統(tǒng)全面的總結(jié)、歸納后,通過睡眠剝奪大鼠動(dòng)物模型,觀察其腦干網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)、腦腸肽、NO和SOD含量的變化,從分子水平對電項(xiàng)針治療失眠及其氧化應(yīng)激反應(yīng)進(jìn)行深入研究。 目的：1通過電項(xiàng)針干預(yù)睡眠剝奪大鼠的實(shí)驗(yàn)研究探討電項(xiàng)針對失眠及其誘發(fā)氧化應(yīng)激反應(yīng)影響機(jī)制。 方法：將大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、電項(xiàng)針組、甜夢膠囊組、黃芪注射液組,除空白組外,

2、其余組通過腹腔注射PCPA復(fù)制睡眠剝奪大鼠模型。 1觀察對比睡眠剝奪5天后各組大鼠體重變化。 2通過電鏡觀察大鼠神經(jīng)細(xì)胞的變化情況。 3通過熒光分光光度計(jì)觀察大鼠腦中5-HT、5-HIAA、NE含量的變化。 4通過光柵分光光度計(jì)觀察腦干中SOD及NO含量的變化。 5通過免疫組化染色法觀察CCK8、GABA在睡眠剝奪大鼠腦干組織中陽性表達(dá)情況。 結(jié)果： 1模型組大鼠腦干網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中5-

3、HT、5-HIAA、GABA、CCK8含量降低,NO、SOD、NE含量升高,與空白組對比有顯著差異(P<0.01),理論上造模成功。 2睡眠剝奪5天后,模型組大鼠體重減輕,與空白組比較有明顯差異(P<0.01),電項(xiàng)針組大鼠體重?zé)o明顯變化,與空白組無明顯差異(P>0.05)。 3電鏡下觀察可見,睡H民剝奪后,模型組與甜夢膠囊組大鼠腦干細(xì)胞膜邊界不清晰,細(xì)胞渾濁,細(xì)胞內(nèi)有空泡變性,線粒體空泡變性,腫脹明顯粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)含量減少

4、,突觸融合。而電項(xiàng)針組未見明顯變化。 4熒光分光光度計(jì)法證實(shí),睡眠剝奪后,電項(xiàng)針可以提高腦干網(wǎng)狀組織內(nèi)5-HT、5-HIAA的含量,降低NE的含量,與模型組比較有顯著差異(P<0.01),甜夢膠囊組NE的含量降低,同模型組相比有顯著性差異(P<0.01),與電項(xiàng)針組比較無顯著性差異(P>0.05)。甜夢膠囊組5-HT、5-HIAA的含量降低,同模型組相比無顯著性差異(P>0.05)。與電項(xiàng)針比較有顯著性差異(P<0.05)。

5、 5光柵分光光度計(jì)法證實(shí),睡眠剝奪后,電項(xiàng)針組和黃芪注射液組大鼠腦干網(wǎng)狀組織內(nèi)NO、SOD的含量降低,與模型組比較均有顯著差異(P<0.01)。兩組比較無顯著性差異(P>0.05)。 6免疫組織化學(xué)染色法證實(shí),睡眠剝奪后,電項(xiàng)針組和甜夢膠囊組大鼠腦干網(wǎng)狀組織內(nèi)CCK8的含量升高,與模型組比較有顯著差異(P<0.01),兩組比較無顯著性差異(P>0.05)。電項(xiàng)針組和甜夢膠囊組大鼠腦干網(wǎng)狀組織內(nèi)GABA的含量升高,與模型組比較

6、,電項(xiàng)針組有顯著差異(P<0.01),甜夢膠囊組無明顯差異(P>0.05),兩組比較有顯著性差異(P<0.05)。 結(jié)論： 1睡眠剝奪可以破壞大鼠腦干中的神經(jīng)細(xì)胞,而電項(xiàng)針對神經(jīng)細(xì)胞具有保護(hù)作用,抑制睡眠剝奪對大鼠腦干神經(jīng)細(xì)胞的損害。 2電項(xiàng)針可以通過恢復(fù)5-HT通路與NE通路之間的相互平衡和制約,進(jìn)而恢復(fù)正常的睡眠-覺醒節(jié)律,從而糾正失眠。 3電項(xiàng)針可通過增強(qiáng)GABA的抑制作用,從而實(shí)現(xiàn)治療失眠的目的。