人血清白蛋白特異性單域抗體的篩選鑒定、特性分析及應(yīng)用.pdf

1、人血清白蛋白是存在于人體內(nèi)的一種重要而常見(jiàn)的蛋白質(zhì)，是疾病檢測(cè)與診斷的重要標(biāo)記物之一。同時(shí)，關(guān)于如何去除血清中高豐度白蛋白以促進(jìn)血漿蛋白質(zhì)組學(xué)分析和生物標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)，一直以來(lái)也備受人們的關(guān)注。因此，建立并發(fā)展一種有效而快速的白蛋白檢測(cè)方法，具有重要意義。同時(shí)，關(guān)于如何建立有效去除血清高豐度蛋白質(zhì)（白蛋白）的方法的問(wèn)題也亟待解決，其對(duì)血清蛋白質(zhì)組學(xué)的深入研究至關(guān)重要。
　　本研究旨在對(duì)駱駝免疫人血清白蛋白、建立免疫文庫(kù)的基礎(chǔ)上，借助

2、課題組成熟的噬菌體展示平臺(tái)與技術(shù)，篩選并經(jīng)PE-ELISA鑒定、測(cè)序、表達(dá)獲得人血清白蛋白特異的單域抗體;再對(duì)這些單域抗體進(jìn)行一系列特性分析并試圖建立一套白蛋白檢測(cè)的方法，同時(shí)試圖利用NHS-活化珠子與單域抗體結(jié)合組裝親和柱、建立一套親和去除的方法。
　　經(jīng)過(guò)努力，最終我們成功獲得了一個(gè)高質(zhì)量的噬菌體展示白蛋白單域抗體文庫(kù)，并獲得了四株特異針對(duì)人血清白蛋白的單域抗體。經(jīng)過(guò)一系列分析，這些單域抗體表現(xiàn)出純度好、產(chǎn)量高、特異性強(qiáng)、親和