mTOR-P70S6K信號通路在食管鱗狀細胞癌發(fā)生發(fā)展中的作用.pdf

1、食管癌是常見的一種惡性腫瘤，它最常見的組織學(xué)類型是鱗狀細胞癌，全世界每年約有30萬食管癌死亡病例，中國是世界上食管癌的高發(fā)國家，發(fā)病率和死亡率均較高。研究表明，食管癌的發(fā)生發(fā)展是多因素、多階段、多基因相互作用的復(fù)雜過程，并且存在多種信號通路的異?；罨?。因此，通過研究食管癌發(fā)展過程中的信號通路，闡明食管癌的發(fā)生機制，依然是食管癌治療研究的目標。
　　多個研究報道證明：mTOR/P70S6K信號傳導(dǎo)通路在多種腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過程中存在

2、過度激活。mTOR通路參與細胞增殖、分化、遷移等調(diào)節(jié)，被認為是蛋白質(zhì)合成的主要信號調(diào)節(jié)通路。mTOR是一種多功能激酶，其活化后可磷酸化P70S6K并促進mRNA翻譯，生成細胞周期跨越G1期所必需的各種蛋白。有報道稱mTOR在乳腺癌、結(jié)腸癌、淋巴瘤等多種腫瘤中高表達，但在食管鱗狀細胞癌中的研究報道還不多。
　　本實驗通過免疫組化、WesternBlot及RT-PCR方法探討mTOR及p-P70S6K在食管鱗狀細胞癌中的表達情況，并分

3、析它們與食管鱗狀細胞癌臨床病理學(xué)參數(shù)的關(guān)系，進一步觀察mTOR/P70S6K信號傳導(dǎo)通路在食管鱗狀細胞癌發(fā)生發(fā)展中的作用，提供一種新的思路針對臨床治療食管鱗狀細胞癌。
　　目的：探討mTOR/P70S6K信號傳導(dǎo)通路在食管鱗狀細胞癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用及相關(guān)機制。
　　方法：
　　1、采用免疫組織化學(xué)SP法檢測90例食管鱗狀細胞癌中mTOR與p-P70S6K蛋白的表達情況。將所收集的病例依據(jù)不同的年齡、性別、浸潤深度、

4、分化程度及臨床分期進行分組，分析兩者與臨床病理學(xué)特征的相關(guān)性，進一步探討二者與食管鱗狀細胞癌生物學(xué)行為之間的關(guān)系。
　　2、收集新鮮癌組織與癌旁組織各30例，依據(jù)不同臨床分期進行分組，分別提取每對癌與癌旁組織的總蛋白，并用WesternBlot方法檢測mTOR與p-P70S6K的蛋白表達，進一步分析兩者與食管鱗狀細胞癌臨床分期的關(guān)系。
　　3、將30對新鮮組織依據(jù)不同分化程度進行分組，分別提取每對癌與癌旁組織的總RNA，進行

5、RT-PCR，計算mTOR與P70S6K的相對表達量，探討兩者與食管鱗狀細胞癌分化程度的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　1、免疫組化結(jié)果
　?。?）mTOR在食管鱗狀細胞癌組織和癌旁組織中的表達
　　90例癌組織的陽性率70.00％（63/90），癌旁陽性率15.00%(3/20)，在癌組織中的表達高于癌旁組織，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　?。?）mTOR與臨床病理指標的關(guān)系
　　mTOR蛋白表

6、達與食管鱗狀細胞癌的分化程度、浸潤深度及臨床分期存在相關(guān)性。
　　低分化鱗狀細胞癌陽性率48.72%（19/39），高分化鱗狀細胞癌陽性率86.27%（44/51），組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；侵及黏膜及黏膜下層者陽性率11.11%（1/9），侵及肌層陽性率55.88%（19/34），侵及纖維膜陽性率91.49%（43/47），陽性率呈逐級升高過程，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；臨床分期Ⅰ-Ⅱ期陽性率52.78%

7、（19/36），Ⅲ-Ⅳ期陽性率81.48%（44/54），組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　mTOR與患者的年齡、性別、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及有無脈管瘤栓無相關(guān)性，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　?。?）p-P70S6K在食管鱗狀細胞癌組織和癌旁組織中的表達
　　90例癌組織的陽性率71.11%（64/90），癌旁陽性率5.00%(1/20)，在癌組織中的表達高于癌旁組織，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）

8、。
　?。?）p-P70S6K與臨床病理指標的關(guān)系
　　p-P70S6K蛋白表達與食管鱗狀細胞癌的分化程度、浸潤深度及臨床分期存在相關(guān)性。
　　低分化鱗狀細胞癌陽性率56.41%（22/39），高分化鱗狀細胞癌陽性率82.35%（42/51），組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；侵及黏膜及黏膜下層者陽性率22.22%（2/9），侵及肌層陽性率70.59%（24/34），侵及纖維膜陽性率80.85%（38/47），組間

9、差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；
　　臨床分期Ⅰ-Ⅱ期陽性率50.00%（18/36），Ⅲ-Ⅳ期陽性率85.19%（46/54），組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　p-P70S6K與患者的年齡、性別、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及有無脈管瘤栓無相關(guān)性，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　?。?）mTOR及p-p70S6K蛋白在食管鱗狀細胞癌組織中的表達呈正相關(guān)關(guān)系(rp=0.492，P=0.000)。
　　2、W

10、esternBlot結(jié)果
　　WesternBlot結(jié)果顯示癌旁組織、食管鱗狀細胞癌組織（根據(jù)臨床分期分為Ⅰ-Ⅱ期食管鱗狀細胞癌組及Ⅲ-Ⅳ期食管鱗狀細胞癌組）內(nèi)mTOR及p-P70S6K的蛋白表達。
　?。?）mTOR蛋白水平在各組中表達逐漸升高（0.440±0.023，0.712±0.021，0.836±0.018），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　?。?）p-P70S6K蛋白水平在各組中表達逐漸升高（0.23

11、7±0.011，0.454±0.022，0.620±0.042），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　3、RT-PCR結(jié)果
　　RT-PCR結(jié)果顯示癌旁組織、食管鱗狀細胞癌組織（根據(jù)分化程度分為低分化食管鱗狀細胞癌組及高分化食管鱗狀細胞癌組）內(nèi)mTOR及P70S6KmRNA表達水平變化。
　?。?）mTORmRNA表達水平在各組中逐漸升高（0.484±0.030，0.715±0.018，0.912±0.015），差