Notch-Hes1及Wnt-β-catenin信號通路在Barrett食管發(fā)生發(fā)展中的作用.pdf

1、Barrett食管(BE)是指食管下段復(fù)層鱗狀上皮被化生的單層柱狀上皮所替代的一種病理現(xiàn)象，可伴腸化或無腸化，其中伴有特殊腸上皮化生者屬于食管腺癌的癌前病變。BE是胃食管反流病最重要的并發(fā)癥，是食管腺癌的癌前病變，近些年，食管腺癌的發(fā)病率逐漸增長，在西方國家的增長速度己逐為惡性腫瘤的首位，而國內(nèi)隨著飲食結(jié)構(gòu)的變化及內(nèi)鏡技術(shù)的使用，Barrett食管的發(fā)生率及檢出率也逐年增高，但迄今Barrett食管的發(fā)病機(jī)制尚不明確。
　　Not

2、ch/Hes1及Wnt/β-catenin信號通路在Barrett食管發(fā)生發(fā)展中的作用非常重要，國外有學(xué)者曾研究報道Wnt/β-catenin信號通路中關(guān)鍵基因Wnt2在Barrett食管發(fā)生發(fā)展中有重要作用；及在Barrett食管細(xì)胞系中Notch/Hes1信號通路與膽汁酸的關(guān)系；并且有文獻(xiàn)報道此兩條通路在多種腫瘤發(fā)生發(fā)展中關(guān)系密切，但Wnt/β-catenin信號通路中關(guān)鍵基因Wnt1和β-catenin及Notch/Hes1信號通

3、路在Barrett食管大鼠模型中的作用，國內(nèi)外尚未見報道。
　　目的：本研究通過構(gòu)建Barrett食管的大鼠模型，采用免疫組化方法檢測Barrett食管組織中Notch信號通路Notchl、Delta、Hes1和Wnt信號通路Wnt1及β-catenin關(guān)鍵基因的表達(dá)情況，旨在探討以上兩條通路在Barrett食管發(fā)生發(fā)展過程中的作用，為本病的發(fā)生機(jī)制研究及防治提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　1.SD雄性8周齡大鼠80只

4、隨機(jī)分為4個組，包括正常對照組、單純鐵劑組、食管胃十二指腸側(cè)側(cè)吻合術(shù)組(反流EGDA組)、食管胃十二指腸側(cè)側(cè)吻合術(shù)+鐵劑組(反流加鐵劑組)，后兩組行外科手術(shù)建立大鼠胃食管混合反流的模型，術(shù)后2周給單純鐵劑組和反流加鐵劑組大鼠腹腔注射右旋糖酐鐵注射液(30mg/kg，每周2次，共30周)，術(shù)后12周各組均處死5只大鼠，術(shù)后32周處死剩余大鼠，取食管中下段行大體觀察及HE染色后光鏡下病理學(xué)檢查。
　　2.取得標(biāo)本后，應(yīng)用免疫組化的方法

5、檢測Notch1、Delta、Hes1、Wnt1及β-catenin在NE、RE及BE中的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1.實(shí)驗(yàn)中各組死亡率為：正常對照組0％、單純鐵劑組0％、反流組6.7％、反流加鐵劑組10％，反流組、反流加鐵劑組死亡率與對照組、單純鐵劑組相比差異有顯著性(P<0.05)，反流組與反流加鐵劑組相比，死亡率無明顯差異(P>0.05)，術(shù)后12周，單純鐵劑組出現(xiàn)部分食管粘膜水腫粗糙、光鏡下顯示為食管粘膜慢性炎癥，

6、反流組與反流加鐵劑組均出現(xiàn)較嚴(yán)重的食管粘膜損害，表現(xiàn)為食管粘膜充血水腫，粗糙，可見點(diǎn)片狀潰瘍及出血糜爛灶，重者出現(xiàn)條帶狀的白斑樣增生；到術(shù)后32周時各組食管粘膜損傷較前更加嚴(yán)重，但單純鐵劑組未發(fā)生BE，反流組與反流加鐵劑組BE的發(fā)生率分別為21.4％、49.1％。反流組與反流加鐵劑組中BE的發(fā)生率具差異有顯著性(P<0.05)；
　　2.免疫組化指標(biāo)
　　1)Notch1及Delta在NE、RE及BE中MOD分別為0.042

7、8±0.0316，0.1636±0.0198，0.2368±0.0251，及0.0475±0.0208，0.1462±0.0304，0.2345±0.0376，三組任意比較有顯著性差異(P<0.05)。
　　2)Hes1及Wnt1在NE、RE及BE中MOD分別為0.0691±0.0265，0.1599±0.0364，0.2473±0.0329，及0.0638±0.0271，0.1517±0.0281，0.2764±0.0440，三

8、組任意比較有顯著性差異(P<0.05)。
　　3)β-catenin在NE、RE及BE中MOD分別為0.0412±0.0334，0.1742±0.0184，0.2399±0.0304，三組任意比較有顯著性差異(P<0.05)。
　　4)Notch1與Delta及Hes1的MOD之間的相關(guān)系數(shù)分別為r=0.676。r=0.684；Wnt1與β-catenin的MOD相關(guān)系數(shù)r=0.884；Notch1與β-catenin的MO

9、D相關(guān)系數(shù)r=0.630。
　　結(jié)論：
　　1.應(yīng)用食管胃十二指腸側(cè)側(cè)吻合術(shù)(即EGDA術(shù))成功建立了胃和十二指腸內(nèi)容物混合反流的動物模型，并在長期混合反流的基礎(chǔ)上應(yīng)用鐵劑加重食管的損傷，更容易誘導(dǎo)BE的發(fā)生，證實(shí)該模型較為安全、有效，是進(jìn)行BE研究中較為理想的動物模型建造方式。
　　2.Notch及Wnt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的關(guān)鍵基因在Barrett食管的異常表達(dá)明顯上調(diào)，提示此兩條信號通路均參與了Barrett食管的發(fā)生發(fā)