“肺腸合治法”對腸道菌群失調合并過敏性哮喘大鼠氣道重塑的免疫調節(jié)機制研究.pdf

1、實驗目的：本課題在建立大鼠腸道菌群失調合并過敏性哮喘的基礎上，予肺腸合治法的代表方劑加味升降散進行干預，通過對本動物實驗的觀察，選擇與哮喘氣道重塑相關的多項指標，探討肺腸合治法對腸道菌群失調合并過敏性哮喘大鼠氣道重塑的影響，為“肺與大腸相表里”臟腑相關理論尋找實證依據(jù)。
　　實驗方法：以SD大鼠為研究對象，在抗生素誘導其腸道菌群失調模型基礎上采用卵清蛋白（OVA）、氫氧化鋁（Al(OH)3）混懸液在大鼠雙側胸部、腹股溝及腹腔進行注

2、射和霧化吸入激發(fā)哮喘，建立腸道菌群失調合并過敏性哮喘大鼠模型。加味升降散干預后，通過肺、腸同步觀察的研究思路，用病理學方法觀察大鼠肺腸組織的病理形態(tài)變化，用ELISA法檢測大鼠血清和支氣管肺泡灌洗液（BALF）中TGF-β1、IL-17含量；用免疫組化法檢測肺、腸內MMP-9、TIMP-1的含量與比值。
　　實驗結果：1.行為學觀察：與腸道菌群合并過敏性哮喘大鼠模型組相比，中藥肺腸合治干預組大鼠呼吸困難、流涕、抓撓等癥狀有不同程度

3、減輕；在飼養(yǎng)過程中，大鼠毛色光澤度、整體情況也較好；
　　2.組織病理形態(tài)顯示，肺腸合治組大鼠肺內支氣管壁及周圍組織炎性細胞浸潤、黏膜上皮損傷較模型組有減輕，各組腸組織內炎癥反應及腸黏膜的損傷也較模型組有緩解；
　　3.肺功能實驗中模型組呼吸頻率（F）與正常對照組相比有顯著增高（P<0.05））,每分鐘通氣量（MVb）、吸氣流量峰值（PIFb）呼氣流量峰值（PEFb）顯著減?。≒<0.05或P<0.01）。與模型組相比較，肺

4、腸合治組可降低大鼠F（P<0.05或P<0.01），升高MVb、PIFb、PEFb（P<0.05或P<0.01）；
　　4.模型組鼠BALF及腸黏液中sIgA含量明顯低（P<0.05或P<0.01）空白對照組；與模型組比較，陽性組及治療組大鼠BALF及腸黏液中sIgA含量較模型組升高（P<0.05或P<0.01）；
　　5.相關細胞因子水平
　　1）模型組大鼠血清及BALF中TGF-β1、IL-17含量明顯高于空白對照

5、組大鼠（P<0.05或P<0.01）；與模型組比較，陽性組及肺腸合治組對TGF-β1、IL-17有不同程度下調作用（P<0.05），具有顯著性差異有統(tǒng)計學意義。
　　2）免疫組化結果顯示：模型組與空白組比較MMP-9/TIMP-1比值失衡嚴重（<1）；陽性組及肺腸合治干預組與模型組比較MMP-9水平升高緩慢、TIMP-1水平升高明顯（P<0.05）；對MMP-9/TIMP-1的比值接近正常，有顯著調節(jié)作用。實驗結論：肺腸合治法改善