抗VEGF單克隆抗體BD0801抑制人肝細(xì)胞癌裸鼠皮下移植瘤生長(zhǎng)的研究.pdf

1、目的:
　　研究人源化抗VEGF單克隆抗體BD0801單藥及聯(lián)合細(xì)胞毒藥物奧沙利鉑(Oxaliplatin，OXA)或5-氟尿嘧啶(5-Fu)對(duì)裸鼠人肝細(xì)胞癌SMMC-7721細(xì)胞皮下移植瘤的抑制作用，并初步探討其作用機(jī)制。
　　方法:
　　單藥實(shí)驗(yàn):以人肝細(xì)胞癌SMMC-7721細(xì)胞株作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，建立裸鼠皮下移植瘤模型，設(shè)立如下藥物處理組:BD0801低劑量處理組(2.5mg/kg)、BD0801中劑量處理組（5m

2、g/kg）、BD0801高劑量處理組（10mg/kg）、貝伐珠單抗(Bev)低劑量處理組(2.5mg/kg)、Bev中劑量處理組(5mg/kg)、Bev高劑量處理組（10mg/kg）、生理鹽水(NS)空白對(duì)照組（陰性對(duì)照組）;所有荷瘤裸鼠每周腹腔注射用藥2次，共用藥3周，治療期間，觀察裸鼠一般情況，監(jiān)測(cè)體重及皮下移植瘤的生長(zhǎng)情況，治療結(jié)束后次日，拉頸椎處死裸鼠，測(cè)量各組瘤體積及瘤重，計(jì)算瘤重抑制率及腫瘤體積抑制率，取組織行HE染色，微血

3、管密度(MVD)檢測(cè)，并行透射電鏡檢測(cè)腫瘤細(xì)胞凋亡，確定和比較BD0801與Bev抗HCC移植瘤生長(zhǎng)作用和最佳劑量。
　　聯(lián)合實(shí)驗(yàn):選取最佳劑量以人肝細(xì)胞癌SMMC-7721細(xì)胞株作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，建立裸鼠皮下移植瘤模型，設(shè)立如下藥物處理組:即A組(BD0801+OXA)、B組（BD0801+5-FU）、C組（BD0801單藥組）、D組(Bev+OXA)、E組（Bev+5-FU）、F組（Bev單藥組）、G組（OXA單藥組）、H組（5-

4、FU單藥組）、I組（等量NS陰性對(duì)照組），所有荷瘤裸鼠每周腹腔注射周藥2次，共用藥3周，治療期間，觀察裸鼠一般情況，監(jiān)測(cè)體重及皮下移植瘤的生長(zhǎng)情況，治療結(jié)束后次日，拉頸椎處死裸鼠，測(cè)量各組瘤體積及瘤重，計(jì)算瘤重抑制率及腫瘤體積抑制率，取組織行HE染色，MVD檢測(cè)，并行透射電鏡檢測(cè)腫瘤細(xì)胞凋亡，Western-Blot檢測(cè)VEGF/VEGFR信號(hào)通路的活化狀態(tài)。
　　結(jié)果:
　　1、與陰性對(duì)照組相比，BD0801中、高劑量組和

5、Bev中、高劑量組移植瘤抑制率均有顯著差異（P＜0.05）;且BD0801中、高劑量組較Bev中、高劑量有更好的抑瘤效果(P＜0.05)。與陰性對(duì)照組相比，BD0801中、高劑量組和Bev中、高劑量組移植瘤MVD計(jì)數(shù)顯著減少（P＜0.05）;且BD0801中、高劑量組移植瘤MVD計(jì)數(shù)分別較Bev中、高劑量顯著減少(P＜0.05)。Western Blot檢測(cè)結(jié)果顯示，BD0801較Bev能更有效地抑制移植瘤細(xì)胞VEGF/VEGFR通路活

6、性（P＜0.05）
　　2、與各單藥組相比，聯(lián)合組均能顯著增強(qiáng)對(duì)移植瘤生長(zhǎng)的抑制作用(P＜0.05)。與Bev+5-FU/OXA比較，BD0801+5-FU/OXA能更有效地抑制移植瘤生長(zhǎng)。聯(lián)合組MVD顯著低于各單藥組，BD0801聯(lián)合OXA/5-FU組MVD值均顯著低于Bev聯(lián)合OXA/5-FU組(P＜0.05)。Western Blot檢測(cè)結(jié)果顯示，與Bev+5-FU/OXA相比，BD0801+5-FU/OXA能更有效地抑制移

7、植瘤細(xì)胞VEGF/VEGFR通路活性(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　BD0801能有效抑制人肝癌SMMC-7721裸鼠皮下移植瘤的生長(zhǎng)并抑制移植瘤血管生成，且作用強(qiáng)于Bev，其作用機(jī)制可能與抑制癌細(xì)胞VEGF/VEGFR通路活性有關(guān)。BD0801聯(lián)合5-FU或OXA在體內(nèi)可顯著抑制SMMC-7721移植瘤生長(zhǎng)并抑制移植瘤血管生成，藥物呈協(xié)同作用，其作用機(jī)制可能與增強(qiáng)抑制瘤細(xì)胞VEGF/VEGFR通路活性有關(guān)。BD0801