lncRNA-AF113014通過(guò)miRNA-20a上調(diào)Egr2的表達(dá)抑制肝癌細(xì)胞增殖.pdf

1、目的：
　　研究lncRNA-AF113014對(duì)肝癌發(fā)生發(fā)展產(chǎn)生的作用及機(jī)制研究。
　　方法：
　　1.通過(guò)qRT-PCR對(duì)從基因芯片技術(shù)篩選出的在正常肝細(xì)胞和肝癌細(xì)胞中具有差異表達(dá)的lncRNAs進(jìn)行驗(yàn)證，從中選取在肝癌細(xì)胞中低表達(dá)的lncRNA-AF113014作為研究對(duì)象。
　　2.通過(guò)MTS和克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了lncRNA-AF113014對(duì)SMMC-7721和SK-Hep1肝癌細(xì)胞增殖功能的影響。

2、>　　3.尋找lncRNA-AF113014的靶基因。在SMMC-7721細(xì)胞中用qRT-PCR和Western blot實(shí)驗(yàn)分別在mRNA和蛋白水平檢測(cè)lncRNA-AF113014對(duì)靶基因表達(dá)的影響。
　　4.MTS和克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)靶基因Egr2生物學(xué)功能。
　　5.雙蟲(chóng)熒光素酶實(shí)驗(yàn)對(duì)lncRNA-AF113014，miRNA-20a和Egr2三者間相互關(guān)系的研究。
　　6.用裸鼠成瘤、免疫組化和Western

3、blot實(shí)驗(yàn)在體內(nèi)驗(yàn)證lncRNA-AF113014對(duì)腫瘤增殖和Egr2的影響。
　　結(jié)果：
　　1.lncRNA-AF113014在肝癌細(xì)胞中呈低表達(dá)。
　　2.lncRNA-AF113014抑制肝癌細(xì)胞增殖。
　　3.lncRNA-AF113014促進(jìn)靶基因Egr2的表達(dá)。
　　4.Egr2能夠抑制SMMC-7721細(xì)胞增殖。
　　5.lncRNA-AF113014通過(guò)結(jié)合miRNA-20a從而上