VentX促進造血干細胞向紅系分化及對腫瘤干細胞分化的初探.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、非洲爪蟾蜍xvent基因同源哺乳動物基因VentX,作為一個新發(fā)現(xiàn)的造血發(fā)育調(diào)節(jié)基因,對調(diào)控造血干細胞的增殖與分化起著重要作用,此外它還參與中胚層的分化定型、細胞衰老、細胞增殖與分化及炎癥反應等的調(diào)節(jié)。
  GATA家族成員GATA-2,通過與靶基因的GATA結合位點結合,在造血系統(tǒng)發(fā)育中起關鍵性的調(diào)節(jié)作用。實驗室前期實驗已證實GATA-2可以結合到VentX啟動子區(qū)兩個GATA結合位點來順式調(diào)控VentX,本文利用VentX和G

2、ATA-2的過表達載體和基因沉默的慢病毒,在從人骨髓中分離出的CD34+細胞中進行了VentX和GATA-2二者的過表達或沉默,通過Western bloting檢測了VentX和GATA-2的表達水平,通過細胞增殖實驗和聯(lián)苯胺染色檢測等實驗考察VentX和GATA-2對CD34+細胞增殖以及向紅系分化的影響,結果發(fā)現(xiàn)在CD34+細胞中過表達GATA-2或VentX均可抑制細胞增殖,提高紅系分化特異因子α-,β-珠蛋白的表達,促進CD3

3、4+細胞向紅系分化。
  腫瘤干細胞(tumor stem cells,TSCs)理論認為TSCs是腫瘤組織內(nèi)一小部分能夠自我更新并有能力再生腫瘤的細胞,與腫瘤的形成和生長密切相關,其理論從一個全新的角度詮釋了腫瘤的發(fā)生、發(fā)展本質(zhì),給腫瘤的靶向性、根治性治療帶來了希望。但目前對TSCs的研究還處于初級階段,TSCs維持自我更新及無限增殖潛能的分子機制尚不清楚,影響TSCs多向分化潛能的相關因素也未得到完全闡明。鑒于TSCs與正常干

4、細胞有諸多相似特征和VentX基因?qū)υ煅杉毎姆只{(diào)節(jié),本文進行了VentX對腫瘤干細胞分化的初步探索。利用無血清懸浮培養(yǎng)富集腫瘤干細胞及在乳腺癌BT549細胞中過表達VentX,考察了VentX過表達與腫瘤干細胞比例的關系以及對干細胞標志物ALDH1和干細胞分化重要因子Nanog、 Oct4、TGF-β表達的影響,結果發(fā)現(xiàn)在BT549細胞中,VentX的表達隨腫瘤干細胞的比例升高而增加。過表達VentX與無血清懸浮培養(yǎng)富集對ALDH

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