肝癌細胞HepG2株線粒體LETM1基因突變研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：構建LETM1基因真核表達載體，并檢測肝癌HepG2細胞株的LETM1基因突變，探討線粒體LETM1基因在肝癌發(fā)生中的意義。
　　方法：從HepG2株細胞中提取mRNA及合成cDNA，設計并合成LETM1基因引物。用PCR方法擴增LETM1基因，連接到真核表達載體pCMV-3Tag-6、pCMV-3Myc-2A上，構建重組質粒pCMV-3Tag-LETM1和pCMV-3Myc-LETM1。將質粒進行HindⅢ/XhoⅠ雙酶切

2、、測序和檢測突變位點。
　　結果：成功構建了重組質粒pCMV-3Tag-LETM1和pCMV-3Myc-LETM1；測序LETM1基因序列長度為5462bp；肝癌HepG2細胞株的LETM1基因突變發(fā)生于G148A（纈氨酸→異亮氨酸）、G320A（甘氨酸→天冬酰胺）、G344A（精氨酸→組氨酸）、A1760G（賴氨酸→精氨酸）和A1825G（蘇氨酸→丙氨酸）。
　　結論：
　　1. LETM1基因突變最常發(fā)生于G148

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