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1、目的:越來越多的研究已證實(shí)免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)在多種腫瘤中存在表達(dá),并提示其表達(dá)可能具有促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移等生物學(xué)意義。課題組前期研究證實(shí)免疫球蛋白M(ImmunoglobulinM,IgM)在鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)組織和細(xì)胞系中存在異位表達(dá),抗人IgM抗體可以顯著抑制人NPC HNE-1細(xì)胞及裸鼠移植瘤的生長(zhǎng),提示NPC中表達(dá)的IgM有生長(zhǎng)因子樣作用。在臨床工
2、作中不同NPC患者對(duì)放射治療的敏感性存在明顯個(gè)體差異,而NPC中異位表達(dá)IgM與NPC放療敏感性的關(guān)系尚不明確。糖蛋白96(glycoprotein96,gp96)是細(xì)胞內(nèi)的重要分子伴侶蛋白,屬于熱休克蛋白90(heat shock protein,HSP90)家族,參與Ig(包括IgM)的折疊和組裝;且HSP90家族參與細(xì)胞增殖和凋亡相關(guān)的信號(hào)通路。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)抗人IgM抗體可以抑制gp96蛋白的表達(dá);另有研究證實(shí)gp96在NP
3、C組織高表達(dá),且其表達(dá)水平與放療敏感性及患者預(yù)后呈負(fù)相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)擬通過檢測(cè)鼻咽癌組織中IgM與gp96的表達(dá)情況,分析兩者表達(dá)與NPC患者放療敏感性的關(guān)系,探討IgM在NPC組織中表達(dá)對(duì)NPC放射治療的作用和臨床意義。
方法:回顧性選取2013年7月至2015年3月就診于西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科且臨床資料完整的NPC患者,根據(jù)放療后3個(gè)月復(fù)查增強(qiáng)核磁共振(nuclearmagnetic resonance,MRI)
4、了解鼻咽部腫塊消退情況,按照世界衛(wèi)生組織(world health organization,WHO)關(guān)于實(shí)體腫瘤放射治療敏感性評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)選取60例NPC放療前組織標(biāo)本,其中30例為放療敏感組,30例為放療耐受組;并取30例同期鼻咽部慢性炎癥作為對(duì)照;同期選取放射治療3-6個(gè)月后頸部殘留淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移病灶并行頸部淋巴結(jié)清掃者9例。采用免疫組化鏈霉素抗生素蛋白-過氧化物酶連結(jié)法(streptavidin-perosidase,SP)檢測(cè)IgM和
5、gp96在各標(biāo)本中的表達(dá)情況;由兩位病理醫(yī)師在不知病例資料的情況下使用盲法閱片判斷,并在高倍鏡(×400)下,隨機(jī)選取每張切片10個(gè)染色良好視野,結(jié)合陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)和染色強(qiáng)度對(duì)免疫組化的結(jié)果進(jìn)行判定。應(yīng)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS18.0進(jìn)行x2檢驗(yàn),計(jì)算Fisher確切概率;Spearman相關(guān)性分析,分析IgM和gp96在鼻咽癌中的表達(dá)及與放療敏感性的關(guān)系。
結(jié)果:(1)免疫組化結(jié)果顯示IgM蛋白在NPC組織及炎性鼻咽黏膜組織中高表
6、達(dá)率分別為58.3%(35/60)和30.0%(9/30),兩者比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=6.425,P<0.05);gp96蛋白在NPC組織及炎性鼻咽黏膜組織中高表達(dá)率分別為65.0%(39/60)和20.0%(6/30),兩者比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=16.200,P<0.05);(2) IgM蛋白在NPC放療敏感組和放療耐受組的高表達(dá)率分別為36.7%(11/30)和80.0%(24/30),兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2
7、=11.589,P<0.05),即NPC放療耐受組中IgM蛋白高表達(dá)率明顯高于NPC放療敏感組;gp96蛋白在NPC放療敏感組和放療耐受組的高表達(dá)率分別為46.7%(14/30)和83.3%(25/30),兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=8.864,P<0.05),即NPC放療耐受組中g(shù)p96蛋白高表達(dá)率明顯高于NPC放療敏感組;(3) IgM和gp96蛋白在NPC組織中的表達(dá)呈正相關(guān)性(r=0.443,P<0.05);(4) IgM與
8、gp96蛋白在NPC放療后頸部殘留淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移腫瘤組織中的高表達(dá)率分別為88.9%(8/9)和77.8%(7/9);(5)IgM蛋白在T1-2期NPC患者的高表達(dá)率為26.3%(5/19),T3-4期高表達(dá)率為73.2%(30/41),兩者比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=11.727,P<0.05);臨床分期Ⅰ-Ⅱ期及Ⅲ-Ⅳ期患者IgM蛋白高表達(dá)率分別為29.2%(7/24)和77.8%(28/36),其差異比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=11.
9、055,P<0.05),而IgM蛋白表達(dá)在不同性別、年齡、病理類型、分化類型及有無淋巴轉(zhuǎn)移組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05);gp96蛋白在臨床分期Ⅰ-Ⅱ期及Ⅲ-Ⅳ期患者中的高表達(dá)率分別為41.7%(10/24)和80.6%(29/36),其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=9.573,P<0.05),NPC患者gp96蛋白表達(dá)在不同性別、年齡、病理類型、分化類型、TNM分期組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05);(6) NPC患者
10、的組織類型、分化類型、T分期、淋巴轉(zhuǎn)移及臨床分期與NPC的放療敏感性密切相關(guān)(P均<0.05),而NPC患者性別及年齡與放療敏感性無明顯相關(guān)性(P均>0.05)。
結(jié)論:(1)IgM和gp96在NPC組織中高表達(dá),提示兩者可能與鼻咽癌的發(fā)病機(jī)制有關(guān);(2)IgM和gp96的表達(dá)水平與NPC放療敏感性呈負(fù)相關(guān),提示它們可以作為預(yù)測(cè)NPC患者放療敏感性的指標(biāo);(3)IgM和gp96在NPC組織中表達(dá)呈正相關(guān),同時(shí)檢測(cè)兩個(gè)指標(biāo)可能會(huì)
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