手足口病患兒大便中病毒核酸的監(jiān)測及臨床意義.pdf

1、第一部分 TaqMan探針實(shí)時(shí)熒光定量法在手足口病腸道病毒RNA檢測中的應(yīng)用
　　目的：建立一種針對手足口病腸道病毒量化的快速準(zhǔn)確檢測方法,評估該方法的靈敏性、特異性及穩(wěn)定性。
　　方法：收集72例（EV71組45例，非EV71組27例）手足口病患兒共計(jì)577份不同時(shí)期糞便，通過 TaqMan探針實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR One-step法測定其腸道病毒RNA，并準(zhǔn)確定量，同時(shí)與血EV71 IgM檢出率對比。
　　結(jié)果

2、：TaqMan探針RT-PCR法檢測手足口病患兒大便病毒核酸，靈敏性均達(dá)到101拷貝/μl,其 EV71與 EVU批間變異系數(shù)分別為2.94％∽4.56%、0.72%∽3.18%，其批內(nèi)變異系數(shù)分別為0.19%∽1.9%、0.09%∽0.49%。TaqMan探針RT-PCR法與血EV71 IgM對比，TaqMan探針 RT-PCR EV71組陽性檢出率與非 EV71組陰性檢出率分別為100%、0，而血EV71 IgM EV71與非EV7

3、1組檢出率分別為92.9%、73.1%。發(fā)現(xiàn)兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。病毒載量與病程相關(guān)（χ2=101.1 p=0.00），病毒載量在EV71與非EV71、普通組與重癥組中差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　結(jié)論：TaqMan探針實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR法靈敏性較高，特異度強(qiáng)，重復(fù)性好，且優(yōu)于血EV71 IgM檢測，病毒載量與病程相關(guān)，與病原及病情程度無關(guān)，是否能判斷手足口病患兒的預(yù)后還有待進(jìn)一步研究。
　

4、　第二部分連續(xù)性監(jiān)測手足口病患兒大便中病毒核酸及其載量的臨床意義
　　目的：通過連續(xù)性監(jiān)測手足口病患兒糞便中腸道病毒核酸載量，探討手足口病患兒的排毒時(shí)間、病毒載量與血清類型及病情程度的相關(guān)性。
　　方法：收集72例手足口病患兒的糞便標(biāo)本（其中EV71組45例，非EV71組27例；普通組17例，重癥組55例）每隔7天收集糞便1次，共12周，實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR TaqMan探針法定量檢測病毒核酸。并用T檢驗(yàn)或秩和檢驗(yàn)進(jìn)行數(shù)

5、據(jù)分析。
　　結(jié)果： EV71組患兒在第1-6周病毒核酸陽性率均為100％，第7-12周分別為97.7％、88.4％、83.1％、79.4％、79.4％、79.4％，非EV71組在第1-11周病毒核酸陽性率分別為100％、92％、73.6％、53％、38.2％、23.2％、6.97％、2.32％、0.77％、0.46％、0。這兩組糞便核酸陽性率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（t=4.75，P=0.001）。但普通組與重癥組病毒核酸陽性率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異