自閉癥大鼠海馬細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)及電針“長強(qiáng)”穴的干預(yù)作用.pdf

1、目的:
　　1.觀察細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白bax、bcl-2在自閉癥大鼠海馬的表達(dá)。
　　2.觀察電針“長強(qiáng)”穴對自閉癥大鼠海馬bax、bcl-2蛋白表達(dá)的影響。
　　方法一:
　　健康成年Wistar雌雄大鼠1∶1合籠，第二日清晨，觀察大鼠托盤，若有陰栓，則記為胚胎第1天，孕雌鼠單獨(dú)飼養(yǎng)。孕鼠隨機(jī)分為兩組，一組在E12.5（孕12.5天）時(shí)腹腔注射VPA（丙戊酸鈉），產(chǎn)下的仔鼠為模型組;另一組正常待產(chǎn)，產(chǎn)下的仔鼠為空

2、白組。產(chǎn)下的仔鼠經(jīng)發(fā)育行為學(xué)測評，篩選出自閉癥大鼠，再予Morris水迷宮試驗(yàn)測試其學(xué)習(xí)記憶能力。隨機(jī)取空白組和模型組大鼠各12只，相同環(huán)境下飼養(yǎng)20天，不予干預(yù)。療程結(jié)束第二日再予Morris水迷宮試驗(yàn)測試，取腦組織，應(yīng)用免疫組化和免疫印跡檢測技術(shù)觀察大鼠海馬bax、bcl-2蛋白的表達(dá)。
　　方法二:
　　造模及測評同方法一。取36只自閉癥大鼠隨機(jī)分為電針“長強(qiáng)”組（長強(qiáng)組）、電針非穴組（非穴組）、非針刺對照組（模型組）

3、各12只，另隨機(jī)選取空白組大鼠12只。長強(qiáng)組取長強(qiáng)穴，電針刺激(連續(xù)波，頻率為2Hz，強(qiáng)度為2mA)20min，連續(xù)治療20天為1個(gè)療程，共1個(gè)療程;非穴組取大鼠右脅肋下緣一橫指處，余操作同長強(qiáng)組;空白組和模型組在相同環(huán)境下飼養(yǎng)，不予干預(yù)。療程結(jié)束第二日再予Morris水迷宮試驗(yàn)測試，取腦組織，應(yīng)用免疫組化和免疫印跡檢測技術(shù)觀察大鼠海馬bax、bcl-2蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果一:
　　1.睜眼試驗(yàn):與空白組相比，模型組睜眼遲

4、，PN12無差異，PN13、PN14、PN15、PN16有顯著性差異(P＜0.05）。
　　2.熱板致痛試驗(yàn):與空白組相比，模型組痛閾升高，PN9、PN11、PN13和PN15有顯著性差異(P＜0.05）。
　　3.Morris水迷宮:療程前:與空白組相比，模型組平均潛伏時(shí)間延長、穿越平臺次數(shù)減少，有顯著性差異(P＜0.05）。療程后:與空白組相比，模型組平均潛伏時(shí)間延長、穿越平臺次數(shù)減少，有顯著性差異(P＜0.05）。

5、r>　　4.免疫組化:與空白組相比，模型組bax蛋白的表達(dá)降低、bcl-2蛋白的表達(dá)升高，有顯著性差異（P＜0.05）。
　　5.免疫印跡:與空白組比，模型組bax蛋白的表達(dá)降低、bcl-2蛋白的表達(dá)升高，有顯著性差異(P＜0.05)。
　　結(jié)果二:
　　1.睜眼試驗(yàn):同結(jié)果一中睜眼試驗(yàn)。
　　2.熱板致痛試驗(yàn):同結(jié)果一中熱板致痛試驗(yàn)。
　　3.Morris水迷宮:療程前:同結(jié)果一中療程前。療程后:與模型組

6、相比，空白組、長強(qiáng)組平均潛伏時(shí)間縮短、穿越平臺次數(shù)增加，有顯著性差異(P＜0.05)，非穴組平均潛伏時(shí)間縮短、穿越平臺次數(shù)增加，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　4.免疫組化:與模型組相比，長強(qiáng)組bax蛋白的表達(dá)升高、bcl-2蛋白的表達(dá)降低，有顯著性差異(P＜0.05);非穴組bax蛋白的表達(dá)升高、bcl-2蛋白的表達(dá)降低，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　5.免疫印跡:與模型組相比，長強(qiáng)組bax蛋白的表達(dá)升高