植物乳桿菌MA2降膽固醇功能突變子的構(gòu)建及相關(guān)基因的初步研究.pdf

1、近幾年來，隨著生活水平的提高，人們飲食中的膽固醇含量日漸增高。而過高的膽固醇含量在人體內(nèi)會(huì)誘發(fā)如冠心病、動(dòng)脈硬化等一系列心腦血管疾病，對人們的身體健康造成了極大的威脅。因此，研究如何減低機(jī)體內(nèi)膽固醇的方法成為近幾年來學(xué)者的研究熱門。其中，通過食用乳酸菌來降低膽固醇的方法逐漸引起人們關(guān)注。作為人們普遍能夠接受的益生菌中的一類，乳酸菌來源廣泛且使用安全。
　　本研究以本實(shí)驗(yàn)室保藏的一株具有良好降膽固醇能力的植物乳桿菌（Lactobac

2、illus plantarum）MA2為研究對象，利用人工Mμ轉(zhuǎn)座重組技術(shù)對其進(jìn)行轉(zhuǎn)座誘變。對轉(zhuǎn)座DNA的擴(kuò)增，純化和濃縮，隨后制備轉(zhuǎn)座復(fù)合物，利用電轉(zhuǎn)化方法獲得植物乳桿菌MA2的突變子，采用PCR方法進(jìn)行驗(yàn)證，得到含有Mμ轉(zhuǎn)座序列的陽性轉(zhuǎn)化子。利用鄰苯二甲醛法對獲得的陽性轉(zhuǎn)化子和植物乳桿菌MA2的體外降膽固醇能力進(jìn)行測定，篩選出一株降膽固醇能力顯著下降的陽性突變子，編號(hào)為MA2-Mμ。并且，相對于植物乳桿菌MA2，轉(zhuǎn)化子MA2-Mμ的