A型流感病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS1與PI3K調(diào)節(jié)亞基P85β蛋白的相互作用研究.pdf

1、磷脂酰肌醇-3激酶(Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)是在眾多被激活信號通路中起到樞紐作用的關(guān)鍵蛋白分子。PI3K不但參與調(diào)節(jié)早期A型流感病毒進入細胞的過程,而且它的激活還將導(dǎo)致感染后期細胞凋亡被抑制,后者功能的實現(xiàn)則依賴于流感病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS1的表達。已被證實,PI3K調(diào)節(jié)亞基P85β與NS1蛋白的直接相互作用能導(dǎo)致PI3K的激活,參與次相互作用的位點是NS1蛋白的效應(yīng)區(qū)以及P85β蛋白的iSH2

2、和SH3區(qū)域。但是,NS1結(jié)合P85β蛋白導(dǎo)致PI3K被激活的具體機制尚不清楚,因此,如果可以得到NS1與P85β蛋白的復(fù)合物晶體結(jié)構(gòu),從而在三維空間結(jié)構(gòu)上定位出蛋白間相互作用的關(guān)鍵氨基酸,并解釋這種相互作用所導(dǎo)致的PI3K激活機制是一種潛在的行之有效的方法。在本文的實驗中,我們克隆并表達H5N1株NS1效應(yīng)區(qū)蛋白以及P85βiSH2和SH3區(qū)域的蛋白,重復(fù)驗證這些區(qū)域的相互作用,結(jié)果表明只有P85β的iSH2區(qū)域跟NS1效應(yīng)區(qū)存在直接