基于PCR的天麻、Hg2+檢測(cè)方法及PCR結(jié)合DiSC2(5)的一步可視化檢測(cè)法的建立.pdf

1、本文主要采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)，以中藥相關(guān)性物質(zhì)為研究對(duì)象，展開(kāi)了三部分與檢測(cè)方法相關(guān)的探索性研究。隨著中醫(yī)藥的快速發(fā)展，中成藥成為了中藥現(xiàn)代化發(fā)展的重要成果，而中藥材的真實(shí)性、安全性是中成藥質(zhì)量控制的關(guān)鍵。一些商家為了謀取暴利，通常會(huì)以性狀相似、化學(xué)成分相近、重金屬含量超標(biāo)的中藥材摻偽混合銷(xiāo)售，尤其是一些名貴中藥材，其摻偽現(xiàn)象尤為明顯。如今以檢測(cè)化合物作為檢測(cè)指標(biāo)的方法存在很多弊端，重金屬的檢測(cè)方法也有一定的弊端，為了彌補(bǔ)這

2、些檢測(cè)方法的不足，本文利用PCR技術(shù)，對(duì)全天麻膠囊中天麻常見(jiàn)偽品（馬鈴薯）進(jìn)行分子鑒定；建立了對(duì)中藥材有害物質(zhì)重金屬汞的檢測(cè)方法；為了便于前兩者檢測(cè)結(jié)果的呈現(xiàn)，建立了新型的一步可視化檢測(cè)方法。主要工作包括以下三部分：
　　1.建立了含有天麻藥材的中成藥中天麻及其偽品的DNA檢測(cè)方法，首次在全天麻膠囊中檢測(cè)出天麻常見(jiàn)摻偽品（馬鈴薯）的DNA，結(jié)果證明該方法特異性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)單，結(jié)果可靠性高，能成功檢測(cè)中成藥中天麻藥材是否摻偽。

3、　　2.重金屬汞是影響中藥材安全性的外源性有害物質(zhì)，嚴(yán)重影響人類(lèi)的健康，為了實(shí)現(xiàn)簡(jiǎn)單快速的實(shí)時(shí)檢測(cè)，我們利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)以及兩個(gè)胸腺嘧啶核苷酸對(duì)重金屬汞離子的特異性選擇，建立了對(duì)重金屬汞離子的定性和定量檢測(cè)方法。
　　3.PCR產(chǎn)物的檢測(cè)通常是通過(guò)傳統(tǒng)的瓊脂糖凝膠電泳法，如今已有基于G-四聚體的可視化檢測(cè)方法，但是該方法需要分兩步進(jìn)行，極易對(duì) PCR反應(yīng)造成污染，本文利用花青染料建立了新型的一步可視化檢測(cè)方法，反應(yīng)